£*V ^ ^ ■** f *W&. 4^-v. L i > >* 4 r i* *' MARINE BIOLOGICAL LABORATORY. Received Accession No. Given by Place, ***flo book op pamphlet is to be removed fpom the liab» opatopy uiithout the pepmission of the Tpustees. ZEITSCHRIFT FÜR WISSENSCHAFTLICHE MIKROSKOPIE UND FÜR MIKROSKOPISCHE TECHNIK Unter besonderer Mitwirkung von Prof. Dr. Leop. Dippel in Darmstadt Prof. Dr. P. Schiefferdecker Prof. Dr. R. Brauns 111 Bonn in Giessen herausgegeben von Dr. WILH. JUL. BEHRENS in Göttingeu Band XVIII (Jahrgang 1901) Mit 3 Tafeln und 38 Holzschnitten LEIPZIG Verlag - von S. H i r z e 1 1901 Alle Rechte vorbehalten. 2 7 L Inhaltsverzeichnis s. I. Abhandlungen. Seite Arndt, G., Präcisionssäge zur Herstellung mikroskopischer Präparate harter Substanzen 14(5 Foot, K. , and Strobell, E. Ch. , ,A new niethod of focussing in photomicrography 421 Friedmann, E., Physikalisches Verfahren zur Einstellung von Celloi'din- objeeten im Mikrotom 14 Gurwitsch, A., Ein schnelles Verfahren der Eisenhämatoxylinfärbung 291 Harris, H. F., A new method of staining elastic tissue 290 Heidenhain, M. , Ueber die Schlittenbremse, eine Neuconstruction am Jung'schen Mikrotom zur Vermehrung der Stabilität der Schlittenführung 138 — , — , Ueber eine Paraffineinbettung mit Schwefelkohlenstoff als Durchgangsmedium 166 Köhler, A., Messband zum Einstellen der Projectionsoculare . . . 273 Kohn, R., Ueber mikroskopischen Elektricitätsnachweis 427 Kolster, R., Paraffineinbettung im luftleeren Räume 170 Kreidl, A., Eine neue stereoskopische Lupe 1" Lendenfeld, R. v., Bemerkungen zur Paraffinschnittmethode ... 18 Meissner, P., Apparat zum Einbetten in Paraffin 286 Meyer, A., Eine Mikroskopirlampe 144 Minervini, R., Modifikationen der Weigert'schen Methode zur speci- fischen Färbung des elastischen Gewebes 161 Moll, W. J., Ein Apparat zur scharfen Einstellung des Projections- Mikroskops aus einiger Entfernung 129 Noll, A., Ein neuer Aether- Gefrierapparat für Mikrotome .... 141 IV Inhaltsverzeichniss. Seite Poll, H. , Eine neue elektrische Mikroskopirlampe 413 Pranter, V., Ein billiger Ersatz für Deckgläser 159 Räuber, A., Ein Krystallodrom 418 Seheffer, W., Beitrüge zur Mikrophotographie 401 Schneider, G., lieber den Ersatz von Glas durch Gelatine .... '288 Tarames, T., Eine elektrische Mikroskopirlampe 280 Tandler, J., Mikroskopische Injectionen mit kaltflüssiger Gelatine . 22 Tellyesniczky, K. , Zur Frage der Messerstellung beim Schneiden der Paraffinobjecte 20 Wandolleck, B., Ein neuer Objecthalter (Universal-Centrirtisch) für Mikrophotographie mit auffallendem Licht 1 Weudt, G. v., Eine ausgezeichnete Beleuchtungsquelle für mikro- skopische Zwecke 417 — , — , Eine Methode der Herstellung mikroskopischer Präparate, welche für mikrophotographische Zwecke geeignet sind 293 II. Referate. Aderhold, R., Eine kleine technische Mittheilung 92 Aguerre, J. A., Untersuchungen über die menschliche Neuroglia . . 355 Aigner, A. , Ueber das Epithel im Nebenhoden einiger Säugethiere und seine secretorische Thätigkeit 80 Allen, Ch. E., On the origin and nature of the middle lamella . . 242 Amberg, O., Die von Schröter -Amberg modificirte Sedgwick- RAFTER'sche Methode der Planktonzählung 439 Auglade, D., u. Morel, Ch., Ueber eine neue Methode der Färbung der Neuroglia 484 Argutinsky, P., Malariastudien 440 — , — , Zur Kenntniss der Blutplättchen 342 Arnold , J. , Ueber „Fettkörnchenzellen" , ein weiterer Beitrag zur „Granulalehre" 42 — , — , „Fettkörnchenzellen" und „Graniüalehre" 44 Askanazy, M. , Ueber Art und Zweck der Invasion der Anguillula intestinalis in die Darmwand 444 Bardeen, Ch. R., New freezing microtome for use with carbon-dioxid tanks 299 Barton, J. K., A contribution to the anatomy of the digestive tract in Salmo salar 454 Bauer, M., Beitrag zur Histologie Berwerth, F., Ueber die Structur der chondritischen Meteorsteine . 382 Beyerinck , M. W. , Schwefelwasserstoffbildung in den Stadtgräben und Aufstellung der Gattung Aerobacter 370 Bielschowsky , M. , u. Plien , M., Zur Technik der Nervenzellen- färbung 82 Biffeu, R. H., On the biology of Bulgarin polymorphe Wett . . . 242 Billings, Fr. H., Beiträge zur Kenntniss der Samenentwicklung . . 377 Bischoff, E., Beitrag zur Anatomie des Igelgehirns 87 Bloch, L., Schwimmblase, Knochenkapsel und WEBEit'scher Apparat von Nemachilus barbatulus Günther 4f>0 Boccardi, G., e Citelli, S., Sul connetivo del vene e sulla membrana propria dei tuboli 408 Bock, M. de, Le corps cardiaque et les amibocytes des Oligochetes Limicoles 444 Bogdanow, N. , proisschoshdenii i snatschenii eosinofilnoi serni- sstossti i ob otnoschenii eja k prozessy krowetworenija . . 332 Boni, J., Methode zur Darstellung der Bacterienkapsel auch in festen Nährböden 94 — , — , Methode zur Darstellung einer „Kapsel" bei allen Bacterien- arten. Vorläufige Mittheilung 95 Borgert, A., Untersuchungen über die Fortpflanzung der tripylen Radiolarien, speciell von Aulacantha scobymantha H. ... 52 Borosini, A. v., Glaskolben zur Herstellung von Nährböden ... 90 ttosshard , H. , Zur Kenntniss der Verbindungsweise der Skelett- stücke der Arme und Banken von Antedon rosacea Linck [Comatula mediterranea Lam.] 54 Botezat, E., Die Innervation des harten Gaumens der Säugethiere . 204 Bouin, P., Contribution ä l'etude de la division cellulaire chez les Myriapodes. Mitoses spermatogenetiques chez le Geophilus linearis Koch 446 Brand, F., Bemerkungen über Grenzzellen und über spontan rothe Inhaltskörper der Cyanophyceen 237 Brauns, R., Ueber das Verhältniss von Conchit zu Aragonit . . . 253 VI Inhaltsverzeichniss. Seite Brauns , R. , Ungewöhnlich lange Beständigkeit einiger Schwefel- modificationen 512 Brenner, W., Untersuchungen an einigen Fettpflanzen 375 Brodmaun, K., Die Anwendung des Polarisationsmikroskops auf die Untersuchung degenerirter markhaltiger Nervenfasern ... 83 Broman, J., Ueber gesetzraässige Bewegungs- und Wachsthuins- erscheinungen (Taxis- und Tropismenformen) der Spermatiden, ihrer Centralkörper, Idiozomen und Kerne 320 Burckhard, G., Die Implantation des Eies der Maus und die Umbildung derselben zur Decidua 79 Byxbee, E. S., The development of the karyokinetic spindle in the pollen-mother-cells of Lavatera 112 Cade, A., Etüde de la Constitution histologique normale et de quel- ques variations fonctionnelles et experimentales des elements secreteurs des glandes gastriques du fond chez les mammiferes 204 Calugareanu, D., Recherches sur les modification histologiques dans les nerfs comprimes 354 Campbell, D. H., Studies on the Araceae 113 Canon, Bemerkung zu der Mittheilung von Dr. Hugo Marx „Ueber Sporenbildung und Sporenfärbung" 496 Capobianco, F., Sulla nevroglia del corpo calloso 485 Chamberlain, C. J., Methods in plant histology 230 Clark, J. G., The origine, development, and degeneration of the human ovary 459 Dahlgrün, W., Untersuchungen über den Bau der Excretionsorgane der Tunicaten 319 Davis, Br. M., Nuclear studies on Pellia 375 Dawidow, D. , Die FLORENCE'sche Methode für den Nachweis der Spermatozoon 81 Dawydoff. C, Beiträge zur Kenntniss der Regeneration bei den Ophiuren 54 Deegener, P., Entwicklung der Mundwerkzeuge und des Darmkanals von Hydrophilus 58 Deetjen, H., Die Hülle der rothen Blutzellen 473 — , — , Untersuchungen über die Blutplättchen 336 Dekhuyzen, M. C, Ueber die Thrombocyten (Blutplättchen) . . . 339 Deycke u. Voigtländer, Studien über culturelle Nährböden . . . 496 Doelter, C, Die Schmelzbarkeit der Mineralien und ihre Löslichkeit in Magmen 381 — , — , Neue Bestimmungen von Schmelzpunkten 513 — , — , Ueber die Bestimmung der Schmelzpunkte bei Mineralien und Gesteinen 249 Dörler, A., Neue und wenig bekannte rhabdocöle Turbellarien . . 444 Dogiel, A. S., Die Nervenendigungen im Bauchfell, in den Sehnen, den Muskelspindeln und dem Centrum tendineuui des Dia- phragmas beim Menschen und bei Säugethieren 361 Drigalski, v., u. Conradi, H., Ueber ein Verfahren zum Nachweis der Typhusbacillen 498 Inhaltsverzeichniss. VII Seite Ebner, V. v., Ueber die „Kittlinien" der Herzmuskelfasern .... 465 Edington, A., Eine einfache Methode zur Fixirung von Blutpräparaten 70 EggeJing, H. , Ueber die Deckzellen im Epithel von Ureter und Harnblase 453 Embden, G., Primitivfibrillenverlauf in der Netzhaut 488 Engel, C. S., Zur Färbung von Blut- und Eiterpräparaten mit Eosin- Methylenblau 200 Engelmann, Tb. W., Ueber ein Mikrospectralobjectiv mit Normal- spectrum 27 Epstein, St., Ein vereinfachtes Verfahren zur Züchtung anaerober Bacterien in Doppelschalen 91 Fajersztajn, J., Ein neues Silberimprägnationsverfahren als Mittel zur Färbung der Achsencylinder 214 — , — , Ueber den Hämatoxylin-Chromlack als Mittel zur Färbung der Achsencylinder 479 Fischel, A., Untersuchungen über vitale Färbung 179 Flint, J. M., The blood-vessels, angiogenesis, organogenesis, reticulum, and histology of the adrenal 409 Porti, A., L'impiego dell'aldeide formica per impedire la fluidifica- zione nei preparati alla gelatina glicerina 481 Fritsch, F. E., Untersuchungen über das Vorkommen von Kautschuk bei den Hippocrateaceen verbunden mit einer anatomisch systematischen Untersuchung von Blatt und Achse bei derselben Familie öi)7 Fujinami, A., Ueber die Gewebsveränderungen bei der Heilung von Knochenfracturen 462 Gardner, M., De l'histogenese du tissue elastique 63 — , — , K woprossu o gisstogenese i sstroenii elasstitschesskoi tkani 63 Gaubert, P., Sur la coloration artificielle des cristaux 246 Godlewski , J. , Ueber die Entwicklung des quergestreiften muscu- lösen Gewebes (Vorläufige Mittheilung) 192 Goldhorn, L. B., A new and rapid method of staining the chromatin of the malarial organism. Also a report on changes observed in erythrocytes containing such parasites 221 Gordon, J. W., An examination of the Abbe diffraction theory of the microscope 2;h; Gregory, E. R. , Observations on the development of the excretory System in turtles 461 Gross, J. , Untersuchungen über das Ovarium der Hemipteren, zu- gleich ein Beitrag zur Amitosenfrage 56 Gruber, E., Ueber das Verhalten der Zellkerne in den Zygosporen von Sporodinia grandis Link 102 Grünberg, C. , Beiträge zur vergleichenden Morphologie der Leuko- cyten 70 Gudden, H. , Ueber eine neue Modifikation der GoLGi'schen Silber- imprägnirungsmethode 213 Guerrini, G., Sugli elementi elastici del tessuto connettivo dei nervi 489 VIII Inhaltsverzeichniss. Seite Guieysse , A. , La capsule surrenale du cobaye. Histologie et fonc- tionneuient 206 Haase, A., Untersuchungen über den Bau und die Entwicklung der Haftlappen bei den Geckotiden 450 Haemers, A. Ch. , Modification de la methode de coloration par l'hematoxyline ä l'alun de fer (Heidenhain) 33 Hammerl, H., Ein Beitrag zur Züchtung der Anaeroben 365 Hansteen, B., Ueber das Fucosan als erstes scheinbares Product der Kohlensäureassimilation bei den Fucoideen 103 Häri, P., Modificirte HovEit'sche Schleimfärbung mittels Thionin . . 311 Harper, R. A., Sexual reproduction in Pyronema confluens and the morphology of the ascocarp 101 Harris, H. F., On the rapid conversion of haematoxylin into hsematein in staining Solutions 34 Hayaschikawa, J. , Die Verwendbarkeit der Harngelatine zur Züch- tung der Typhusbacillen 369 Hegler, R. , Untersuchungen über die Organisation der Phykochro- maceen 237 Heidenhain, M., Ueber die Structur des menschlichen Herzmuskels . 467 Heinz , R. , Eine einfache Methode zur Darstellung der Gallen- capillaren 350 — , — , Ueber Blutdegeneration und -Regeneration 200 Helbing, C, Erklärungsversuch für die specifische Färbung der Tuberkelbacillen 97 Helly, R., Zum Nachweise des geschlossenen Gefässsystems der Milz 346 Henneberg, B., Ruhende und thätige Muskelzellen in der Arterien- wand 196 Herfort, K., Die Reifung und Befruchtung des Eies von Petromyzon fluviatilis 211 Hesse, R., Untersuchungen über die Organe der Lichtempfindung bei niederen Thieren. VI. Die Augen einiger Mollusken .... 59 Hickson, S. J., Staining with brazilin 308 Hinterberger, A., Eine Modification des Geisselfärbeverfahrens nach van Ermengem 224 Hinze, G., Ueber den Bau der Zellen von Beggiatoa mirabilis Cohn 236 Höber, R., Ueber Resorption im Darm. Dritte Mittheilung .... 456 Hoff, J. van't, Erhöhung des Schmelzpunktes der Nährgelatine . . 364 Holferty, G. M., Ovule and embryo of Potamogeton natans . . . 243 Hunger, F. W. T., Ueber die reducirenden Körper der Oxydase- und Peroxydasereaction 233 Inghilleri, F., Ein neuer Spritzentypus für bacteriologische Unter- suchungen 492 Iwanoff, L. , Das Auftreten und Schwinden von Phosphorverbin- dungen in der Pflanze 234 Jacobitz, E., Die Sporenbildung des Milzbrands bei Anaerobiose (bei Züchtung in reiner Stickstoffatmosphäre) 368 Jahn, E., Myxomycetenstudien. 1. Dictydium umbilicatum Schrader 100 Inhaltsverzeichniss. IX Seite Japha, A., Zur Eosin-Methylenblaufärbung des Blutes 200 Joseph, M. , u. Loewenbach, G. , Dermato - histologische Technik. Ein Leitfaden für Aerzte und Studirende 2G Juel, H. O., Beiträge zur Kenntnis« der Tetradentheilung . ... 112 Justesen, P. Th., Die Entwicklung und Verzweigung des Bronchial- baumes der Säugethierlunge 343 Kadyi, lieber die Färbung der grauen Substanz mittels der Beizung mit Metallsalzen 483 Kahn, R. H., Ueber die in den Sehnen der schiefen Bauchmuskeln bei Fröschen vorkommenden „Inscriptiones elasticae" . . . 464 Kaplan, Methode zur Färbung des Nervensystems 212 Kassianow , N. , Studien über das Nervensystem der Lucernariden, nebst sonstigen histologischen Beobachtungen über diese Gruppe 53 Kindermann , V. , Ueber das sogenannte Bluten der Fruchtkörper von Stereum sahguinolentum Fries 102 Kishi, F., Ueber den Verlauf und die periphere Endigung des Nervus Cochleae 354 Kisskalt, C, Eine Modifikation der GitAM'schen Färbung 309 Klein, C, Optische Studien II 509 Kodis , T. , Eine neue Methode zur Färbung des Centralnerven- systems 352 Königsberger, J. , Die Minerallagerstätten im Biotitprotogyn des Aarmassivs 251 — , — , Zur optischen Bestimmung der Erze 245 Kohlbrugge, J. H. F., Die Entwicklung des Eies vom Primordial- stadium bis zur Befruchtung 324 Kolmer, W., Beitrag zur Kenntniss der motorischen Hirnrindenregion 487 Kolster, R., Ueber Centralgebilde in Vorderhornzellen der Wirbel- thiere 356 — , — , Ueber Centrosomen und Sphären in menschlichen Vorder- hornzellen 485 — , — , Ueber die Säurefuchsinfärbung degenerirender Nervenfasern . 4;>o Kopsch, F., Die Thrombocyten (Blutplättchen) des Menschenblutes und ihre Veränderung bei der Blutgerinnung. Eine Bestä- tigung der Befunde Deetjen's und Dekhuyzen's 341 Kranenburg, W. R. H. , Sur les cellules des glandes de l'estomac qui secretent de l'acide chlorhydrique et Celles qui secretent de la pepsine 45."» Kraus, E., Züchtung der Typhusbacillen aus dem Stuhl 99 Krause, R. , u. Philipp son, M., Untersuchungen über das Central- nervensystem des Kaninchens 86 Ksjunin, P. , Ueber das elastische Gewebe des Haarbalgs der Sinus- haare nebst Bemerkungen über die Blutgefässe der Haar- papille 192 Kurpjuweit, Entzündungsversuche am Knochen 7 Träger des Glasrohres in der breiten Oeffnung des Tisches auf und ab geschoben, das Object also in der Senkrechten gehoben und gesenkt. Es wird bei kleinen Objecten mit stark gewölbter Oberfläche nur durch einen glücklichen Zufall möglich sein, gleich beim Auf- heften auf das Glasrohr die für das jeweilige Bedürfhiss günstigste Stellung in der senkrechten Ebene zu treffen; dass dies nun nach- träglich leicht vorgenommen werden kann, habe ich dadurch erreicht, dass die Hülse des Glasrohres in der Ebene des Tisches um zwei horizontale Schildzapfen »schwenkbar ist. Als letzte Bewegung ist dann noch die schon anfangs erwähnte Drehung des Objectes um eine durch den Anheftungspuukt und die Längsachse des Glasrohrs gelegte Linie zu nennen. Es wird auch wie bei meinem ersten primitiven Versuch durch Drehung des Glas- rohres in der Hülse bewerkstelligt. So ist man im Stande, vermöge meines Tisches sechs verschie- dene Bewegungen mit dem Objecte auszuführen und mit grosser Leichtigkeit diejenige Stellung herauszufinden, die die beste Gewähr für eine möglichst allseitige Schärfe bietet. Vermittels Transmissionsspiralen und langer Metallstangen ist die Bewegung in der optischen Achse, die Bewegung horizontal quer und die Bewegung vertical quer zu ihr von der Mattscheibe aus bei jeder Auszugslänge regulirbar. Zwei von diesen Bewegungen, die die optische Achse rechtwinklig schneiden , sind ja die , vermöge deren der Einstellende das Bild stets wieder in die Mitte der Mattscheibe bringen kann, und die erste, die ihn in den Stand setzt, nach jeder mit dem Object vorgenommenen Manipulation die Schärfe des Bildes zu prüfen und sicher zu bestimmen, welche Lageveränderung die allgemeine oder specielle Schärfe verbessern würde. Ohne sich viel Mühe zu geben, oder ängstlich auf seine Lagerung zu achten, wird man das Object auf dem Glasrohr befestigen, sein Bild mitten auf die Mattscheibe bringen und nach Begutachtung seiner Schärfe mit den übrigen drei Bewegungen leicht und schnell das Optimum er- reichen. Freilich gehört ja auch dazu eine gewisse Liebling, die aber der an maximale Scharfeinstellung gewöhnte Mikrophotograph sich rasch aneignet. Bei den Objecten in verschiedener Vergrösserung, die ich ver- mittels dieses Tisches aufgenommen habe, diente mir als Objectiv ein ZEiss'sches Doppelprotar Ser. VII a Nr. 2 von 115 mm Brenn- weite, dessen engste Blende die relative Oeffnung von 1 : 36 giebt 6 Wandolleck: Ein neuer Objecthalter für Mikrophotographie. XVIII, 1. als Camera eine gewöhnlich mikrophotographische mit recht langem Auszug. Um dem Apparate eine etwas ausgedehntere Verwendung zu geben , sind an ihm noch Einrichtungen getroffen worden , in Folge deren er sowohl für Präparate mit durchfallendem Licht, als auch für kleine, in Flüssigkeit liegende Objecte, die eine Verwendung der senkrechten Camera bedingen, benützt werden kann. Die Hülse des (üassrohres lässt sich nämlich mit dem Stück, in dem sie in ihren Schildzapfen geht, durch eine leichte Manipulation entfernen ; es bleibt dadurch in dem Tische ein rundes Loch von der Grösse der Durch- bohrung eines Mikroskoptisches. Dieses Loch befindet sich eigent- lich nicht in dem Tische, sondern in dem Theile , der die verticale XVIII, 1. Wandolleck: Ein neuer Objecthalter für Mikrophotographie. 7 Bewegung vermittelt, während der Tisch selbst von einem länglichen Schlitz durchbrochen wird. An jenem Theil kann nun eine Object- trägerklammer eigenthümlicher Construction angebracht werden, die zwar das Präparat festhält, ihm aber erlaubt, die senkrecht zur op- tischen Achse gehende Bewegung mitzumachen. So können auch einem gröberen mikroskopischen Präparate vier verschiedene Be- wegungen gegeben werden. In das Loch des Theiles, der die vertical zur optischen Achse gehende Bewegung vermittelt, passt genau ein kleiner horizontaler Tisch, auf den eine Schale mit einem in Flüssigkeit liegenden Ob- ject gestellt werden kann. Bei senkrecht gerichteter Camera wird alsdann die frühere verticale Bewegung , die in der optischen 8 Wandolleck: Ein neuer Objecthalter für Mikrophotographie. XVIII, 1. Achse , wogegen die drei anderen zum Einrichten des Präparates dienen. Die Construction des Apparates ist im genaueren folgende (Figur 1, 2): Auf einem Hufeisen-Mikroskopfuss der gewöhnlichen Grösse und Form erhebt sich eine kurze Säule, die oben ein schwal- benschwanzförmiges Gleitstück trägt. Dies Gleitstück ist horizontal quer durchbohrt, und in der Bohrung dreht sich die Triebspindel für die erste Bewegung. Durch diesen Trieb werden zwei nach ent- gegengesetzter Seite offene, ins Kreuz gestellte und fest mit einander verbundene Schlitten bewegt. Der untere ist nach unten, der obere nach oben offen ; der erstere wird an den schrägen Kanten des schwalbenschwaiizförmigen Gleitstückes der Säule geführt und trägt unten die Zahnstange für den im Gleitstück liegenden Trieb , in dem letzteren bewegt sich umgekehrt das Gleitstück. Während die untere Bewegung durch schrägen Zahntrieb vermittelt wird , gleitet das obere Stück an einer Sciiraubenspindel , zwei feine Spiralfedern verbinden das Gleitstück mit einer Schmalseite des Kastens und bewirken dadurch einen möglichst weichen Gang. Fest mit diesem Gleitstück verbunden ist eine kreisförmige Scheibe , in deren centraler Bohrung das Lager für den Drehzapfen der Tisch- basalplatte eingelassen ist. Nach vorn trägt sie an einem kleinen Arm den Trieb und den Knopf für die Tischdrehung. Die Tisch- basalplatte ist eine grössere horizontale Kreisscheibe , deren vor- derer gezähnter Rand die Zahnstange für den Trieb repräsentirt. Durch diese Einrichtung wird die Drehung der Scheibe auf den senk- recht stehenden ; fest mit ihr verbundenen Tisch übertragen. Der Trieb gestattet eine Gesammtdrehung des Tisches um 90°. Der 112 zu 112 mm grosse Tisch, der, wie schon oben bemerkt, auf einer Sehne der Drehscheibe steht , hat in der Mitte einen Schlitz von 23 zu 68 mm Oeffnung, der Schlitz ist nicht scharfwinklig, sondern wird oben und unten durch einen halbkreisförmigen Bogen begrenzt. Durch diese Oeffnung ragen die Objecthalter hindurch und können dadurch eine Gesammtbewegung von 50 mm in der Verticalen machen. Der Tisch trägt an seiner hinteren Seite zwei parallele Leitschienen und den Trieb nebst Knopf für das Gleit- stück, an dem die verschiedenen Objecthalter befestigt werden. Dies Gleitstück ist eine viereckige , an den Rändern schwalbenschwanz- artig abgeschrägte Platte mit runder centraler Bohrung von 20 mm Durchmesser. Oben und unten befindet sich an der Platte je eine Schraube mit geriefeltem Knopf, die zum Befestigen der Objecthalter XVIII, 1. Wandolleck: Ein neuer Objecthalter für Mikrophotographie. 9 dienen. Vermöge dieser Halteschrauben und der eigenthümlichen Construetion der Objecthalter selbst sind diese sehr leicht und be- quem einzuhängen und auszuwechseln. Der Objecthalter besteht aus einer in der Mitte durchbrochenen Platte, die oben und unten in zwei flachen mit den Oeffnungen gegen einander gestellte, in der Ebene der Platte liegende Haken ausläuft. Durch eine Drehung der Platte greifen diese Haken hinter die beiden Schraubenköpfe und können dann leicht an das Gleitstück gepresst werden, wodurch der Objecthalter fest mit jenem verbunden ist. In der viereckigen Durch- bohrung der Platte bewegt sich an horizontalen Schildzapfen die Hülse für das Glasrohr und ist in jeder Lage durch eine seitlich an- gebrachte Schraube fixirbar. Es wird auch noch ein in einen Kugel- lager allseitig bewegliches Glasrohr hergestellt. Die Klammer für gewöhnliche mikroskopische Präparate, die mit durchfallendem Licht photographirt werden sollen, ist für die Grösse der englischen Objectträger eingerichtet. Sie besteht aus einem I-förmigen flachen Blech von 74 und 42 mm Seitenlänge. Die nach dem Anbringen der Klammer nach oben gerichteten Schenkel sind an ihrem Ende 1*5 mm weit rechtwinklig umgebogen, sodass sie zwei Haken bilden. An der inneren Längsseite des U sind zwei schmale S-förmige Federn angebracht, die einen auf sie mit seiner Kante gedrückten Objectträger gegen die Haken der Schenkel drängen. Das dichte Anliegen der ganzen Klammer an den Tisch bewirkt nun, dass ein Objectträger fest zwischen Haken, Tisch und Federn ein- geklemmt ist. Da die U-förmige Klammer mittels einer Schraube von vorn an dem Gleitstück, dass die verticale Bewegung verursacht, befestigt wird , so folgt sie und mit ihr das Präparat jeder Be- wegung dieses Theiles und der ihm vorangehenden beweglichen Theile. Der kleine Tisch für in Flüssigkeit liegende Objecte und senk- rechte Camera ist 45 zu 45 mm gross. Er trägt an seiner hinteren Kante einen runden Zapfen, der genau in das Loch des Gleitstückes der verticalen Bewegung hineinpasst. Mittels einer Schraube mit geriefeltem Knopf kann er dann fest an das Gleitstück angepresst werden, so dass auch er dessen Bewegungen mitmacht. Um auch bei schwereren Objecten mit grösserer Ausdehnung, z.B. Stücken von Krystalldrusen , die von der geringen Klebfläche des Glasrohres nicht gehalten werden würden, den Apparat mit Vor- theil benutzen zu können, wird noch eine kleine runde Metallplatte mit gefurchter Oberfläche hergestellt, die mittels einer kurzen Tülle auf das Glasrohr gesteckt wird. 10 Kreidl: Eine neue stereoskopische Lupe. XVIII, 1. Die Triebachsen der Bewegungen 1, 2, 3 sind 11 mm über die geriefelten Drehknöpfe hinaus fortgeführt und dort etwas dicker ge- halten, so dass die Hülsen der Transportspiralen leicht daraufgesteckt und mit Schräubchen festgezogen werden können. Der Apparat wurde von den Dresdener Feinmechanikern Herrn Gast u. Engelmann, Pillnitzerstr. 51, denen auch ein grosses Ver- dienst in der Uebersetzung ins Praktische zufällt, vortrefflich aus- geführt und wird von der Firma zu massigem Preise auf Lager gehalten. [Eingegangen am 29. Mai 1901.] Eine neue stereoskopische Lupe. Von Prof. Dr. Alois Kreidl, Assistenten am physiologischen Institut der k. k. Universität zu Wien. Hierzu ein Holzschnitt. Die an verschiedenen Orten erfolgten Veröffentlichungen Ber- ger's 1 über seine neue binoculare, stereoskopische Lupe veranlassen mich, über ein Instrument zu berichten, das dem gleichen Zwecke gewidmet ist, nämlich stereoskopisch zu wirken. Die Lupe, die von Herrn Karl Fritsch, Optiker in Wien 2 auf J ) Berger, E., Binoculare, stereoskopische, einfache Lupen und stereo- skopische Brillen (Deutsche Mechaniker-Zeitg. 1900, No. 6) ; ferner derselbe in Coinpt. Rend. de l'Acad. des Sc. Paris t, CXXIX, 1899; La Nature t. XXVIII, No. 1407; Arch. f. Anat. u. Physiol. (Physiol. Abth.) Supple- mentbd. 1900; Arch. f. Augenheilk. Bd. XLI, 1900, p. 235; Zeitschr. f. Psych, u. Physiol. d. Sinnesorgane Bd. XXV, 1901; Bull. Soc. Zool. de France t. XXV, 1900, no. 30, p. 70; vgl. diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, p. 29). 2 ) Auf Wunsch des Herrn Fritsch, der die Lupe in den Handel bringt, theile ich hier mit, dass derselbe gerne zu jeder Auskunft bereit ist, und dass man sich, um Verwechslungen zu vermeiden, an die Firma Karl Fritsch vorm. Prokesch, Wien VI, Gumpendorferstr. 31, wenden möge. Eine solche Lupe in einfachster Ausführung bei ömaliger Ver- grösserung kostet 60 Kronen, mit Stativ und Tisch, Beleuchtungslinse, Einstellung mit Zahn und Trieb 155 Kronen. XVIII, 1. Kr ei dl: Eine neue stereoskopische Lupe. 11 meine Anregung und Veranlassung zunächst für meine Zwecke ver- fertigt wurde, habe ich durch einige Zeit in Verwendung; dieselbe hat sich mir bewährt, und ich halte sie in allen jenen Fällen für empfehlenswert]! , wo ein Arbeiten mit stereoskopischem Effect be- absichtigt wird. Vor ungefähr zwei Jahren wandte ich mich nach einigen ver- geblichen Versuchen, selbst zum Ziele zu gelangen, mit einer rohen Skizze, die gewissermaassen bloss das Princip der neuen Lupe re- präsentirte, an Herrn Fritsch mit dem Ersuchen, mir für meine Zwecke eine binoculare Lupe zu construiren ; diese sollte sich von den bisher gebräuchlichen vor allem dadurch unterscheiden, dass die optischen Achsen nicht geneigt, sondern parallel gestellt wären, um jede Con- vergenz der Augen zu vermeiden, was bekanntlich weder bei der Lupe von Westien noch den neuen ZEiss'schen binocularen Lupen der Fall ist, so vortrefflich an und für sich diese Instrumente sonst sind. Herr Fritsch kam meinem Wunsche auf das freundlichste ent- gegen, und nach sehr mühevollen Versuchen ist es ihm gelungen, diesen meinen Anforderungen gerecht zu werden, wofür ich ihm zu Dank verpflichtet bin. Die Lupe stellt in ihrer jetzigen Form im Princip eine modi- ficirte BRücKE'sche Dissectionsbrille mit stereoskopischem Effect vor. Brücke war bekanntlich der Erste , dem es durch Combination von Convexlinsen mit Prismen gelang, binoculare Lupen herzustellen. Will man im allgemeinen bei einem optischen Instrument stereosko- pischen Effect erzielen, so ist es nothwendig, jedem Auge das ihm zukommende Netzhautbild eines gesehenen Objectes zu bieten ; dies kann in zweierlei Art erreicht werden : entweder man lässt den Gegen- stand durch je ein optisches System in derselben Weise ansehen, wie dies beim natürlichen Sehen in grösserer Nähe geschieht, also bei convergenter Blickrichtung, wobei dann die optischen Systeme den gleichen Winkel einschliessen müssen wie die Sehachsen, oder man bringt durch die optischen Einrichtungen zwei Bilder des Gegenstandes hervor, die man durch entsprechende Vorrichtungen der Art jedem Auge zuführt, dass beide in Parallelstellung sich befinden, als ob sie den Gegenstand in grösserer Entfernung sehen würden. Die erste Art ist realisirt bei den stereoskopischen Lupen von Westien -Zehender 1 , Zeiss 2 und auch bei der neuen BERGER'schen *) Vgl. diese Zeitschr. Bd. IV, 1887, p. 320 u. Bd. V, 1888, p. 217. 2 ) Vgl. Braus, H., u. Drüner, L., Das binoculare Präparir- und Hori- 12 Kr ei dl: Eine neue stereoskopische Lupe. XVIII, 1. Lupe. Bei der WESTiEN'schen Lupe sind zwei CiiEVALiER'sche Lupen, bei der von der Firma Zeiss gelieferten zwei Mikroskope , die einen Winkel mit einander einschliessen, der dem entspricht, unter welchem die Gegenstände dem unbewaffneten Auge bei grösserer Annäherung erscheinen würden. Bei der BERGER'schen Lupe sind es zwei gegen einander geneigte Convexlinsen, durch welche jedes Auge den Gegenstand beobachtet, wobei allerdings bis zu einem ge- wissen Grad eine prismatische Wirkung der decentrirten Linsen stattfindet. Bei jeder Naharbeit ist es in erster Linie die übermässige Accommodations- und Convergenz- Anstrengung, welche das Verlangen nach optischen Hilfsmitteln erweckt. Bei der monocularen Lupen- beobachtung wird wohl die Accommodation auf ein geringes Maass reducirt ; werden jedoch beiden Augen Lupen geboten und das Object mit diesen wie beim natürlichen Sehen in der Nähe beobachtet, so fällt damit nun die Accommodations -Anstrengung keineswegs beiderseits weg. Beide Augen bekommen wohl je ein vergrössertes Bild, wobei das Object auch stereoskopisch erscheint, da in Folge des vergrößerten Gesichtswinkels die Details der einzelnen Bilder sowohl wie die per- spectivische Verschiebung erhöht sind, allein, so wie beide Augen das Object unter einem bestimmten Winkel betrachten, tritt mit der Convergenz der Augen auch die physiologisch damit verknüpfte Accommodation ins »Spiel, und es muss sich sowohl im Accommodations- sowie in den Convergenzmuskeln das Gefühl der Anstrengung einstellen. Diese Erwägung veranlasste mich, eine Lupe zu construiren, bei welcher ausser der Aufhebung jeder Accommodations -Anstrengung auch die Convergenz wegfallen würde. Es war dazu nur nothwendig, die durch ein gegebenes optisches System für jedes Auge unter natürlichem Gesichtswinkel erzeugten Bilder durch Prismenwirkung der Art in jedes Auge gelangen zu lassen, dass die Blicklinien sich in unendlicher Entfernung schneiden, also so, wie Brücke bei seiner Dissectionsbrille durch Combination von Convexlinsen mit Prismen, deren brechender Winkel sich schläfenwärts befindet, die Convergenz- stellung aufgehoben hat. Auf beifolgender Figur, welche die Lupe in halber natürlicher Grösse im Schnitt darstellt, ist ersichtlich, wie dies erreicht ist: zontahnikroskop (Diese Zeitschr. Bd. XIV, 1897, p. 5; Jenaische Zeit- sclir. f. Naturw. Bd. XXIX, 1895, p. 434) ; ferner auch Czapski, S., u. Geb- hardt, W. , Das stereoskopische Mikroskop nach Greenough und seine Nebenapparate (Diese Zeitschr. l>d. XIV, 1897, p. 288). xvin, 1. Kreidl: Eine neue stereoskopische Lupe. 13 Die vier total reflectirenden Flächen m, ///', n, n' der vier Prismen P, P', p und p' wirken als Spiegel, durch welche die von dem Punkt o des Objectes kommenden Strahlen oc und oe', nach- dem sie die auf den Prismenflächen aufgekitteten achromatischen Vergrösserungsgläser abc und d bc passirt haben, gezwungen werden, nach zweimaliger Reflexion parallel oder nahezu parallel auszutreten. Ein Objeet, welches sich in o, dem Schnittpunkte der zwei Central- strahlen befindet, wird dem rechten Auge vergrössert in der Rich- tung Ä o' ', dem linken in der Richtung Ao" erscheinen. Der Winkel, den die beiden optischen Achsen der achromatischen Linsen ein- schliessen, ist annähernd gleich dem Winkel, den die Blicklinien normaler Augen beim Betrachten von Gegenständen in der deutlichen Sehweite (25 cm) einschliessen, also gleich dem Winkel, den auch die optischen Achsen bei den Lupen von Westien und Zeiss betreffs Erzielung einer natürlichen Plastik mit einander bilden. Einzelne der Vorrichtungen bei der Lupe, so insbesondere die Wahl von je zwei Prismen, welche durch zweimalige Spiegelung die Ablenkung der Strahlen bewirken, sind auch schon bei anderen Instrumenten in Anwendung (so bei den stereoskopischen Mikro- skopen) — das Wesentliche und Neue in der Lupe ist, dass zur Er- zeugung einer stereoskopischen Wirkung ohne Sehzwang zwei bei stereoskopischen Lupen (Mikroskopen) einzeln bekannte Vorrichtungen vereinigt sind , nämlich zu einander geneigte Linsen , welche derart 14 Friedioann: Einstellung von Celloidinobjecten im Mikrotom. XVIII, 1. angeordnet sind, dass das zu beobachtende Object in den Schnitt- punkt ihrer optischen Achsen zu liegen kommt, und zweitens zwei verstellbare Prismen, welche die von diesen Objecten ausgehenden Central strahlen nach zweimaliger Spiegelung parallel zu einander ge- sondert in die Augen eintreten lassen. Die Prismen lassen sich durch Verstellung (mit Hilfe der Schraube SS' in der Figur) in diejenige Entfernung bringen, die dem Pupillen- abstande des jeweiligen Beobachters entspricht, ein Umstand, der für die Erzielung eines guten stereoskopischen Bildes von besonderer Bedeutung ist. Wien, am 31. März 1901. [Eingegangen am 2. April 1901.] [Aus dem I. Anatomischen Institute in Wien.] Physikalisches Verfahren zur Einstellung von Celloidinobjecten im Mikrotom. Von Cand. med. Eugen Friedmaiin, Demonstrator. Hierzu zwei Holzschnitte. Ausgehend von der Thatsache, dass der Spiegel einer Flüssig- keit seine Lage beibehält, gleichgültig wie die Stellung des Gelasses sei, in dem sie sich befindet, begann ich zu versuchen, das übliche Verfahren, Celloidinobjecte im Mikrotome zum Schneiden in einer bestimmten Ebene nach dem Augenmaasse einzustellen, von diesem physikalischen Verhältnisse abhängig und somit exact zu gestalten. Dabei sollten die Ebene, in der das Präparat geschnitten werden soll (Objectebene), und die Messerebene dadurch in Febereinstimmung gebracht werden, dass sie nach dem Flüssigkeitsspiegel gerichtet würden. Nach mancherlei Experimenten in dieser Richtung, die XVIII, 1. Fried mann: Einstellung von Cell oi'dinobjecten im Mikrotom. 15 darauf abzielten, den Flüssigkeitsspiegel respective einen Schwimmer zur Einstellung zu benützen, die aber zu keinem befriedigenden Re- sultate führten, ersetzte ich diese durch eine Libelle und gelangte damit zu dem Verfahren, welches eine bequeme und exacte Ein- stellung innerhalb weniger Minuten ermöglicht. Der dabei erforderliche Apparat besteht aus Folgendem : 1) Einem kreisförmigen Ringe, der an drei in gleicher Distanz von einander liegenden Stellen von Schrauben durchbohrt wird, welche sich in der Ebene des Ringes bewegen lassen. Fieber diesen Stellen erheben sich drei Stützen von gleicher Länge, die einen platten Ring von gleichem Hohldurchmesser wie der vorige tragen. Auf seiner oR 1. Oberseite sind vier Marken entsprechend zwei senkrecht auf ein- ander stehenden Durchmessern angebracht. Bezüglich der genaueren Grössen- und Formverhältnisse yerweise ich auf die Abbildungen. 2) Einer kreisrunden planparallelen Scheibe aus Messingblech (Durchmesser 6 cm). Auf ihrer Oberseite sind zwei Durchmesser senkrecht zu einander eingeritzt, und mitten auf ihrer Fnterseite sind sechs Spitzen angebracht, welche 1 mm lang sind und in der Peripherie eines mit der Scheibe concentrischen Kreises von 6 mm Durchmesser in gleichen Abständen stehen. 3) Einer Stablibelle von grosser Leichtigkeit, am besten aus Aluminium angefertigt. Mein Instrument wiegt 19 g und hat in Uebereinstimmung mit der Grösse der übrigen Bestandtheile eine Länge von 5' 5 cm. 16 Frieclraann: Einstellung von Celloidinobjecten im Mikrotom. XVIII, 1. 4) Einem Stellbrett, wofern sich nicht Stellschrauben am Mikro- tom selbst befinden. Der Apparat, 1 den ich verwende, ist mit Rücksicht auf die Grössenverhältnisse der meisten Vogel- und kleiner Säugergehirne angefertigt. Die zur Einstellung damit tauglichen Objecte müssen noch über die Grenzen eines Kreises von 10 mm Durchmesser, dürfen aber nicht mehr über die eines Kreises von 30 mm Durch- messer hinausgehen. Für noch grössere oder noch kleinere Objecte, bis zu einer gewissen durch die Natur der Verhältnisse gegebenen Grenze, müssten die Dimensionen des Apparates entsprechend ge- ändert werden. Die zur Einstellung gelangenden Celloi'dinobjecte sind in der gewöhnlichen Weise auf einer Unterlage aufgeklebt. Es ist darauf zu sehen, dass das Object allseitig gut von Celloi'din umkleidet ist, um den Schrauben der Vorrichtung 1) Halt zu bieten, ohne dass dabei das Object beschädigt würde ; ferner muss über dem Objecte eine dicke Schichte Celloi'din liegen, welche das Anschneiden einer Ebene ermöglicht. 2 Die Einstellung erfolgt in zwei Etappen : der Horizontalstellung der Messerebene und der Horizontalstellung der Objectebene. Ist Beides besorgt, so muss das Messer durch die gewünschte Ebene gehen. I) Horizontalstellung des Messers: Das Mikrotom wird auf ein Stellbrett mit einem Schraubendreieck, dessen Basis dem Arbeitenden zugewendet ist, so gesetzt, dass es die gegen den Ar- beitenden gerichtete Höhe dieses Dreieckes einnimmt. Das Präparat wird in der Klammer befestigt und darauf im Celloi'din über dem Object eine Ebene zurechtgeschnitten. Sie entspricht der Messer- ebene. Auf sie wird die Messingplatte mit den Spitzen, welche zur Befestigung dienen, abwärts, mit leichtem Drucke aufgelegt. Die beiden sich kreuzenden Linien auf der Oberseite sollen gegen die rechte und linke Schraube gerichtet sein. Die Messingplatte dient J ) Der Apparat wurde von der Firma H. Dümler, Wien IX, 3 ange- fertigt und kann von ihr bezogen werden. 2 ) Es empfiehlt sich, dem Alkohol, in dem die Stücke aufbewahrt werden, etwas Formol zuzusetzen (vgl. Dermatohistologische Technik von Joseph u. Löwenbach); das Celloi'din wird dadurch knorpelhart und eignet sich in Folge dessen lür die ferneren Proceduren, Anlegung der Messer- ebene, Befestigung der unter 1) beschriebenen Vorrichtung in erhöhtem Maasse. Es wird dadurch zudem weit schnittfähiger. XVIII, 1. Friedmann: Einstellung von Celloidinobjecten im Mikrotom. 17 als Stativ für die Libelle, welche möglichst symmetrisch auf sie ge- setzt wird. Mit Hilfe dieses Instrumentes und der Stellschrauben wird die Messerebene in den zwei markirten Linien horizontal ge- richtet. II) Horizontal Stellung der Object ebene: Das Ob- ject wird aus der Klammer genommen und die unter 1) beschrie- bene Vorrichtung ihm so angelegt, wie es geschnitten werden soll. Die Schrauben werden angezogen , so dass sie mit ihren Spitzen ins Celloidin eindringen. Sitzt das Instrument gut, so spannt man das Präparat abermals in die Klammer ein , und verfährt nun mit Hilfe der Libelle, die auf den oberen Ring gesetzt wird, analog wie früher, nur dass man jetzt die Horizontalstellung mittels der Mikro- tomklammer vornimmt. Damit ist auch die Objectebene horizontal gelagert, Objectebene und Messerebene stimmen überein, und die Einstellung ist beendet. Das Mikrotom wird wieder auf seinen ge- wöhnlichen Platz gestellt. Schliesslich noch Folgendes : Für jede Einstellung kommen zwei Momente in Betracht. Die Wahl der Objectebene auf der Ober- fläche des Präparates und die Orientirung dieser Ebene nach der Messerebene. Das Zweite ist nach meinem Verfahren ein streng mechanischer und in Folge dessen exacter Vorgang, die Wahl der Objectebene aber muss naturgemäss mit einem individuell variiren- den Fehlercoefficienten versehen bleiben. Jedoch erleichtert meine Vorrichtung die Wahl der richtigen Schnittebene dadurch, dass man bloss mit drei Punkten operirt, durch welche eine Ebene aber ein- deutig bestimmt ist, ferner durch die Leichtigkeit, mit welcher man das Instrument in verschiedenen Richtungen anlegen, und wobei man sich des Ringes zur Abschätzung namentlich symmetrischer Verhält- nisse bedienen kann. Weist ein Object eine Verkrümmung aus der Richtung auf, in welcher es geschnitten werden soll, z. B. ein Gehirn entlang dem Contur der Symmetrieebene, nämlich dem grossen Hirnspalt und der Linie, die sich in seiner Verlängerung median -sagittal ziehen lässt, und können somit hier nicht alle Punkte gleichzeitig vom Messer getroffen werden, so hat man es mit Hilfe meiner Vorrichtung wenig- stens in der Hand, die Punkte wählen zu können, welche in einen Schnitt kommen sollen, was bei Einstellung mit freiem Auge schwer zu erreichen ist. Mein Verfahren eignet sich namentlich für die Einstellung von Gehirnen und zwar für solche Fälle, wo es auf besondere Genauig- Zeitschr. f. wisa. Mikroskopie. XVIII, 1. 2 18 v. Lendenfeld: Bemerkungen zur Paraffinschnittmethode. XVIII, 1. keit der Einstellung' ankommt. Specielle Fälle , in denen es Gutes leisten kann , erwarte ich als Ergebnisse der ferneren praktischen Verwendung. Ich erwähne nur einen, nämlich das »Schneiden von MARCHi-Gehirnen, die aus dünnen Platten bestehend, sehr exact ein- gestellt sein müssen, um nicht gestückelte Schnitte zu liefern. Das Verfahren wurde hier im Institute wiederholt erprobt und stets eine genaue Einstellung damit erzielt. In der Literatur, so weit sie mir zugänglich war, konnte ich weder eine derartige Vorrichtung zur Einstellung, noch auch einen ähnlichen Versuch, die Einstellung mit Hilfe einer von der Bewegung des Präparates unabhängigen Constanten vorzunehmen, finden. [Eingegangen am 6. April 1901.] Bemerkungen zur Paraffinschnittmethode. Von R. v. Leudenfeld in Prag. Die sonst vortreffliche Methode des Bestreichens der oberen Schnittfläche des Paraffinblocks mit geschmolzenem Paraffin nach jedem Schnitt , durch welche das Einrollen und Zusammenknittern der Schnitte in vollkommen befriedigender Weise verhindert wird, ist mit zwei Uebelständen verbunden. Erstens muss man immer eine , wenn auch kurze Zeit warten , bis die aufgetragene Paraffin- schicht hinreichend fest geworden ist, und zweitens wird durch das wiederholte Auftragen des geschmolzenen Paraffins der obere Theil des Blockes stark erwärmt und in Folge dessen zu weich. Um diesen Uebelständen zu begegnen, habe ich ein Mittel an- gewendet, das sich in Bezug hierauf, sowie auch in anderer Hinsicht gut bewährt hat. Ich habe nämlich von dem Wasserstrahlgebläse ein Rohr zu meinem Arbeitstische geführt und dieses durch einen Kautschukschlauch mit Quetschhahn mit einem, in eine feine Spitze auslaufenden Glasrohre verbunden. Das letztere wird so an einem beweglichen Ständer befestigt , dass der aus seinem spitzen , etwa XVIII, 1. v. Lendenfeld: Bemerkungen zur Paraffinschnittmethode. 19 2 cm über der Schnittfläche des Paraffinblockes liegenden Ende her- vortretende Luftstrahl senkrecht auf die Schnittfläche herabbläst. Mittels des Quetschhahnes wird die Stärke des Luftstrahls regulirt. Vor dein Kautschukschlauch ist eine WouLFf'sche Flasche ein- geschaltet, welche einestheils deshalb nöthig ist, weil sich in der Zuleitung zuweilen Wasser condensirt, das in ihr aufgefangen wird, und welche es durch Einlegen von Eisstücken oder gelindes Er- wärmen auf dem Sandbade möglich macht, die Temperatur des Luftstrahls selbst zu reguliren. Für den nächstliegenden Zweck, um die rasche Erstarrung des aufgetragenen, geschmolzenen Paraffins zu erreichen und die Er- wärmung des Blockes zu verhindern, ist es nur nöthig, einen kühlen, massig starkeii Luftstrahl zu haben, so dass hiebei das Einlegen von Eisstücken allein in Betracht kommt. Wenn man sich aber nicht der immerhin zeitraubenden Be- streichungsmethode mit geschmolzenem Paraffin bedienen , sondern direct, iu gewöhnlicher Weise , ein tadelloses Schnittserienband her- stellen will, so müssen, wie jeder Praktiker weiss, die Schnittdicke und die von der Zimmertemperatur und dem Schmelzpunkte des angewendeten Paraffins abhängige Härte des Blockes in einem be- stimmten Verhältnisse zu einander stehen. Da man nun häufig von Vornherein nicht bestimmen kann, welche Schnittdicke sich als die richtige erweisen wird , und es oft wünschenswerth erscheint , ver- schiedene Theile desselben Objectes in verschieden dicke Schnitte zu zerlegen, so ist es von grossem Nutzen, ein Mittel zu besitzen, die Härte des Paraffinblockes nach Belieben abzuändern. Ein solches Mittel ist die Anwendung eines Luftstrahls von verschiedener, dem jeweiligen Zwecke entsprechender Temperatur. Die Befürchtung, dass der Luftstrahl die Schnitte fortblasen könnte, hat sich als unbegründet erwiesen; es ist nämlich durchaus nicht nöthig, hierbei einen besonders starkeii Luftstrahl anzuwenden. [Eingegangen am 11. März 1901.] 20 Tellyesniczky: Zur Frage der Messerstellung. XVIII, 1. [Aus dem II. Anatomischen Institut (Prof. L. Thanhoffer) zu Budapest.] Zur Frage der Messerstellung' beim Schneiden der Paraffinobjecte. Von Docent Dr. K. Tellyesniczky, Adjunct am Institut. Im XIII. Bande des Anatomischen Anzeigers (Bemerkungen über Mikrotomsehneiden etc. p. 65) begründet Rawitz die Ansicht: „dass das Schneiden mit quergestelltem Messer eine ganz irrationelle Arbeits- methode ist, die man je eher je lieber ganz verlassen und nicht um der lieben Bequemlichkeit willen noch länger behalten sollte". Dem gegen- über glaube ich dennoch, dass in Wirklichkeit die quere Messerstellung weder irrationell noch in der Praxis entbehrlich sei , ohne indessen der schrägen Messerstellung den Vorrang absprechen zu wollen. Die im übrigen gründlichen und einleuchtenden Ausführungen Rawitz's lassen jedoch einen Factor, die Rigidität des in Paraffin eingebetteten Objectes und die hieraus folgende Brüchigkeit und Zerreissbarkeit des Materiales ausser Acht. In Folge dieser Rigidität kommt es häufig genug vor , dass beim Schneiden mit schräger Messerstellung das Messer in seinem Laufe das Object bald zerbröckelt, bald zer- bricht und eventuell in Stückchen mit sich dahinreisst ; überraschend wirkt oft der Gegensatz, wenn wir beim nachherigen Schneiden des- selben Objectes mit querer Messerstellung tadellose Schnitte erzielen. Gleichwohl widerspricht diese Thatsache nicht der Schlussfolgerung Rawitz's, dass die schräge Messerstellung die ideale sei, denn wenn man damit sehr dünne Schnitte, unter 5 p, anfertigt, schwindet mei- stens, eben in Folge der Dünne, auch die Rigidität des Schnittes, was sich schon in der überaus leichten Biegsamkeit äussert, dermaassen, dass auf diese Weise die Brüchigkeit und Zerreissbarkeit gänzlich vermieden erscheint. Anbetracht dessen aber, dass sehr viele Ob- jecte, besonders über 5 /*, unbedingt vorteilhafter oder überhaupt nur mit querer Messerstellung geschnitten werden können , drängt sich die Frage auf, welchem Umstände dies zuzuschreiben sei. XVIII, 1. Tellyesniczky: Zur Frage der Messerstellung. 21 Die Erklärung ist nun darin zu suchen , dass bei schräger Messerstellung das stets weiterziehende Messer eben in Folge des Weiterziehens die rigiden Schnitte zerreisst, während bei querer Messerstelluug nicht nur dieser Nachtheil ganz ausgeschlossen er- scheint, sondern im Gegentheil durch den in der Laufrichtung des Messers ausgeübten Druck die Cohärenz der Schnitte noch gesteigert wird. In vielen Fällen ist uns dieser gesteigerte Zusammen- hang der Schnitte thatsächlich sehr willkommen. Die Terminologie Rawitz's jedoch bezeichnet diesen gesteigerten Zusammenhang einfach als Quetschung, was allerdings abschreckend klingt. In Wirklichkeit aber ist dies ganz ungefährlich und zwar so sehr, dass selbst Born zum Zwecke der Plattenmodellirung immer die quere Messerstellung benutzte ; um so mehr also scheint sie in der gewöhnlichen alltäglichen Praxis überaus vortheilhaft zu sein, und sie von hier gänzlich zu verbannen, wäre eben irrationell. Es haben eben beide Methoden ihre Vortheile ; die schräge Messerstellung ist zweifellos auch beim Paraffinschneiden die ideale Methode, nach dem Vorstehenden hat aber auch die quere Messerstellung ihre Be- rechtigung. Ich weiss zwar nicht, wer zuerst von der queren Messer- stellung Gebrauch machte und was ihn auf diesen Gedanken führte, das steht jedoch fest, dass durch dieses Verfahren mit einem ein- zigen Griff nicht nur das Schneiden sich bequemer und einfacher gestaltet, sondern auch eine grössere Sicherheit des Schneidens er- zielt wurde ; wir haben es also eigentlich mit einer überaus geist- reichen Einrichtung zu thun, die sich auch in der Praxis so bewährt, dass selbe zu verwerfen geradezu als Sünde erschiene. Wenn schon etwas auf dem Gebiete des Paraffinschneidens verworfen werden soll, so sind es jene scheinbar geistreich construirten, sich der queren Messerstellung bedienenden Mikrotome, bei welchen, wie auf den Kopf gestellt , die Bewegungen nicht das hierzu berufene und leicht bewegliche Messer, sondern das Object schwerfällig und un- geschickt vollzieht. Das ausserordentlich einfache kleine Fromme'scIr' Mikrotom, wo sich das kurze feste Messer leicht thürenartig bewegt, lässt hinsichtlich geschickter Verwendbarkeit und geistreicher Ein- richtung — zumal mit dem BoRBr'schen Schnittstrecker combinirt — die genannten complicirten Mikrotome weit hinter sich zurück. [Eingegangen am 23. März 1901.] 22 Tandler : Mikroskopische Injectionen mit kaltflüssiger Gelatine. XVIII, 1. [Aus dem I. Anatomischen Institut der k. k. Universität in Wien.] Mikroskopische Injectionen mit kaltflüssiger Gelatine. Von Docent Dr. Julius Taudler, in Wien. Hierzu Tafel I. Es ist eine bekannte Thatsaehe, dass der Erstarrungspunkt der gewöhnlichen Gelatine durch Zusatz von verschiedenen Salzen her- untergesetzt werden kann, so dass diese Gelatine bei gewöhnlicher Zimmertemperatur flüssig bleibt. Diese Thatsaehe benützte ich, um bei den Injectionen von Amphibien vom Vorerwärmen der Objecte absehen zu können, indem ich der betreffenden Gelatine Jodkalium in grösserer Menge zusetzte. Die Menge des Salzes , das man der betreffenden Gelatine zufügen muss , hängt einerseits von der Qua- lität der Gelatine selbst, anderseits von bestimmten der Gelatine zu- gesetzten Körpern, wie Farbstoffen ab. Im Laufe der Zeit kam ich auf dem Wege des Experimentes zu der Ueberzeugung , dass beim Zusätze von etwa 6 g Jodkalium zu 100 g feiner, öprocentiger, in der gewöhnlichen Weise mit Berlinerblau gefärbter Gelatine diese so ge- wonnene Masse den an sie gestellten Anforderungen genüge. Ich verwende seitdem diese Masse mit ausgezeichnetem Erfolge für mikroskopische Injectionen der verschiedenen Organe und möchte deshalb sowohl das Verfahren selbst mittheilen, als auch Proben von Schnitten durch auf diese Weise injicirte Objecte vorlegen. Die Masse wird auf folgende Weise bereitet : 5 g möglichst salzfreier, feiner Gelatine werden in 100 g destillirten Wassers zum Quellen gebracht und hierauf leicht erwärmt. Der geschmolzenen Gelatine wird je nach dem Bedarf, ob man eine dunkler oder lichter gefärbte Gelatine haben will, Berlinerblau zugesetzt. Der so fertigen blauen Gelatinemasse fügt man nun langsam eintragend 5 bis 6 g Jodkalium zu. Unter gewöhnlichen Umständen bleibt dann die Injectionsmasse XVIII, 1. Tandler: Mikroskopische Inj ectionen mit kaltflüssiger Gelatine. 23 bis zu einer Temperatur von 17° C. dünnflüssig und injicirbar. Sollte die Masse schon bei höherer Temperatur erstarren , so genügt der einfache Zusatz von mehr Jodkalium, um sie bei tieferer Temperatur flüssig zu erhalten. Die so bereitete Masse kann mit einigen Thymolkrystallen ver- sehen in einem Stöpselglase monatelang für die Injection bereit aufbewahrt werden. Die Injection dieser Masse habe ich immer mit einer Teichmann 'sehen Spritze vorgenommen, die mit einer feinen Kanüle montirt ist. Die betreffenden Objecte wurden, gleichgültig ob sie Kalt- oder Warmblütern angehörten , sofort post mortem in- jicirt. Das injicirte Object wird gleich nach der Injection in der gewöhnlichen 5 procentigen Formollösung lixirt. Diese Fixation bietet den bedeutenden Vortheil, dass die Gelatine mit Formol fixirt absolut säure- und basenfest wird und auch sonst keine chemische Veränderung mehr eingeht. Dalier ist es möglich, solche Objecte einer beliebigen Entkalkung'sflüssigkeit auszusetzen, ohne dass es zu einer Veränderung des Farbstoffes käme. Man kann einen mit Berlinerblau oder Carmin gefärbten, in Formol fixirten Gelatineblock tagelang iii Salzsäure oder schwefliger Säure liegen lassen, ohne dass eine Veränderung er- kennbar wird. Die Masse bietet daher richtig angewendet folgende Vortheile : Sie kann lange Zeit vollkommen injeetionsbereit aufbewahrt werden, geht mikroskopisch fein, ohne zu diffundiren und füllt dabei auch die grossen Gefässstämme vollständig aus, fällt aus diesen Ge- fässstämmen bei der mikroskopischen Schnittbehandlung nicht aus, ist durchscheinend und gestattet die Anwendung jeglicher mikro- skopischer Färbetechnik. Irgend eine Schädigung .des Protoplas- mas durch den Zusatz von Jodkalium habe ich nicht bemerken können. Auf der beigegebenen Tafel I ist ein Stück aus einer mensch- lichen fötalen Lunge, von der Arteria pulmonalis mit kalter Berliner- blaugelatine injicirt, wiedergegeben. Am Schnitt ist gerade der Abgang einer stärkeren Arterie von einem mächtigen Aste der Arteria pulmonalis getroffen. In der noch luftleeren Lunge sind die Capillaren prallgefüllt. Durch diese natur- getreue Abbildung (Figur 1) möchte ich demonstriren , dass die Masse thatsächlich substantiell genug ist, grosse Gefässlumina aus- zufüllen und dabei doch capillar geht. Figur 2 stellt ein Stück aus einem Frontalschnitt durch einen ganzen Tritonsehädel dar. Man sieht die Glandula septi in ein mächtiges Gefässnetz eingebettet. Zu beiden Seiten liegt die me- 24 Tandler: Mikroskopische Injectionen mit kaltflüssiger Gelatine. XVIII, 1. diale Nasenhöhlenwand, deren Schleimhaut die Ausstrahlungen des Olfaktorius und reichliche Vascularisation zeigt. Unterhalb des Mund- höhlenepithels sieht man noch deutlich injicirte Capillaren. Das Object wurde mit schwefliger Säure entkalkt. Ich möchte auf diese Weise zeigen, dass die Formol-Gelatine thatsächlich die Entkalkung ohne den geringsten Farbenverlust oder eine sonstige Schädigung verträgt. Figurenerklärung. Figur 1. Schnitt durch eine fötale menschliche Lunge. Zeiss Obj. B. Oc. 1. Tub. 160. Kalte Berlinerblau-Gelatineinjection. Fixation in öprocentiger Formollösung. Schnittfärbung mit Hämatoxylin-Eosin. Figur 2. Frontalschnitt durch den Schädel von Triton ■cristatus. (Aus einer Serie.) Zeiss Obj. B. Oc. 2. Tub. 120. Kalte Ber- linerblau-Gelatineinjection. Fixation in öprocentiger Formollösung. Ent- kalkt in öprocentiger schwefliger Säure. Schnittfärbung mit Hämatoxylin- Eosin mittels Fliesspapiermethode (A Nasenhöhle, M Mundhöhle). [Eingegangen am 28. Februar 1901.] XVIII, 1. Referate. 25 Keferate. 1. Lehr- und Handbücher. Seut-Iler [Saint-Hilaire], K., Dessjatj praktitschesskich saniati po gisstologii dlja natschinajusch- t s c k i c h [Zehn praktische IT e b u n g e u in der Histologie für Anfänger]. St. Petersburg (Ewdo- kimoff) 1900, 62 pp. m. 35 Figg. Verf. hat, wie er in der Vorrede angiebt, die Absicht, mit diesem kurzen Leitfaden der histologischen Technik den Anfängern in der histologischen Praxis zu Hülfe zu kommen. Er hat, wie wir Alle, an sich selbst erfahren, wieviel Zeit mit dem Auseinandersetzen der Elementarbegriffe in der histologischen Praxis verloren geht, und daher in diesem Leitfaden versucht , die Antworten auf alle jene Fragen zu geben, welche bei praktischen Uebungen zuerst von den Anfängern gestellt zu werden pflegen. Zugleich versucht er, mög- lichst verschiedene und sichere Methoden auszuwählen, und in Bezug auf die zu untersuchenden Objecte möglichst typische. Diese Absicht ist ihm, wie mir scheint, durchaus gelungen. Es ist ein sehr brauch- bares Werkchen entstanden , und die zahlreichen in den Text ein- gedruckten Abbildungen werden dem Anfänger, wie beabsichtigt, die Orientirung erleichtern. Von einer Beschreibung ist bei den Ab- bildungen abgesehen, dagegen sind die einzelnen Theile derselben voll benannt. Es werden in den auf einander folgenden Abschnitten behandelt : das Mikroskop , Instrumente , Gefässe, Object- und Deck- 26 Referate. XVIII, 1. gläser, Behandlung des Mikroskops, Verunreinigungen der Präparate, Herstellung der Präparate , Bearbeitung der Gewebe , Reagentien ; sodann werden eine Anzahl von Präparaten angegeben, die der An- fänger zuerst machen soll, bevor er sich an die nun folgenden zehn praktischen Hebungen begiebt. Diese umfassen: 1) Zellbau, 2) Zell- theilung, 3) Cylinder- und Flimmerepithelien, 4) Pflaster- und Drüsen- epithelien, 5) glatte und quergestreifte Muskeln, .6) Nervenzellen und Nervenfasern, 7) Blut und Lymphe, 8) Bindegewebe (Embryonal-, Reticulär-, lockeres und Pigmentgewebe), 9) Bindegewebe (Fett- gewebe, Zellgewebe, Sehne, elastisches Gewebe), 10) Knorpel und Knochen. Schieffcrdecker (Bonn). Szymoiiowicz, L., Lehrbuch der Histologie und der mikroskopischen Anatomie mit besonderer Be- rücksichtigung des menschlichen Körpers ein- schliesslich der mikroskopischen Technik. Würzburg (Stuber) 1901; 445 pp. 8° m. 169 Figg. u. 52 Tfln. Am Schlüsse seines schön ausgestatteten, neuen Lehrbuches der Histologie, auf dessen Inhalt wir hier nicht näher einzugehen haben, giebt Verf. auf 45 Seiten auch eine allgemeine und specielle mikro- skopische Technik. In kurzer, klarer Weise werden im allgemeinen Theile die Hauptmethoden, welche für die Untersuchung der Gewebe zur Zeit angewendet werden, aus einander gesetzt. In dem speciellen Theile werden die hauptsächlichsten für die einzelnen Organe und Gewebe in Betracht kommenden Methoden angegeben , so dass der Leser des Buches in der Lage ist, das, was er in den beschreiben- den Kapiteln und auf deren Abbildungen gelernt und gesehen hat, auch selbst unter dem Mikroskop wenigstens der Hauptsache nach sich vor Augen führen können. Die schönen Abbildungen, mit denen das Buch versehen ist, werden das Verständniss der Präparate bei der Untersuchung erheblich zu fördern geeignet sein. Schiefferdecker (Bonn). Joseph, 31., u. Loewenbach , GL , Dermato-histologische Technik. Ein Leitfaden für Aerzte und Stu- diren de. 2. Aufl., Berlin (Marcus) 1900; 125 pp. 8°. Der 1899 erschienenen ersten Auflage ist sehr schnell die zweite gefolgt, wodurch allein schon nicht nur das Bedürfniss nach einem solchen Werke, sondern auch die praktische Verwendbarkeit des vor- XVIII, 1. Referate. 27 liegenden bekundet wird. Bei der jetzigen Ausdehnung der histolo- gischen Technik ist es in der That nur zu begrüssen, wenn neben den umfangreicheren allgemeineren Werken auch specielle, auf bestimmte Gebiete sich beziehende , herausgegeben werden , namentlich , wenn das in so praktischer und selbständiger Weise geschieht, wie bei dem vorliegenden Werke. Es ist allen Denen, die sich mit der feineren Anatomie der Haut beschäftigen wollen, zu empfehlen. Schiefferdecker (Bonn). 2. Mikroskop und mikroskopische Apparate. Engel mann, Th. W., lieber ein Mikrosp ectr al obj ecti v mit Normalspectrum (Arch. f. Anat. u. Physiol. Jhrg. 1900, Physiol. Abth., Supplementbd. p. 338). Das im Jahre 1881 vom Verf. angegebene und von Zeiss an- gefertigte Mikrospectralobjectiv lieferte , wie alle gebräuchlichen Spectralapparate , ein prismatisches Spectrum. Der Wunsch des Verf. , den diesem Apparate anhaftenden Uebelstand der ungleichen Dispersion durch Verwendung eines Beugungsspectrums zu beseitigen, stiess damals in der Ausführung auf Schwierigkeiten. Durch die Herren Schmidt u. Haensch wurde Verf. nun vor kurzem in den Besitz eines THORp'schen Gitters (durchsichtiger Abklatsch eines RowLANü'schen Metallgitters) gesetzt, welches ein relativ sehr licht- starkes erstes Beugungsspectrum liefert. Er veranlasste daraufhin die Werkstätte von Zeiss, die Herstellung dieses Mikrospectralobjee- tives mit Gitter wieder aufzunehmen. Die Sache war erfolgreich, und Verf. demonstrirt jetzt das erste nach dem neuen Princip angefertigte Instrument. Es liefert bei Anwendung von System E. von Zeiss zur Protection ein sehr reines Normalspectrum von 0*5 mm Länge. Es zeigt im Sonnenlicht bei 100- oder mehrfacher Vergrösserung zahl- reiche FßAUNHOPER'sche Linien und lässt bei Benutzung eines Auer- brenners oder einer Nernstlampe mikroskopische Beobachtungen bei sehr starken Vergrößerungen zu. Verf. stellt weitere Mittheilungen über ein nach demselben Princip construirtes Mikrospectralocular zur quantitativen Farbenanalyse kleiner Objecte in Aussicht. Seh iefferdeeker (Bonn) . 28 Referate. XVIII, 1. Malassez , L. , Nouveain m o d e 1 e s d ' o c ul ai r e s m i c r o - metriques (Arch. d'Anat. Microsc. t. III, 1900, fasc. 4, p. 429—435 av. 3 figg.). Malassez , L. , Diaphragmes oculaires mobiles, per- mettant de transformer tout oculaire ordi- nal r e de Huyghens e n oculaire indicateur, oculaire ä f i 1 , oculaire in i c r o in e t r i q u e o u q u a - drille (Arch. d'Anat. Microsc. t. III, 1900, fasc. 4, p. 436 — 456 av. 6 figg.). In diesen beiden Mittheilungen beschreibt Verf. interessante kleine Vorrichtungen , welche in die Oculare eingesetzt werden können , und es ermöglichen , ein jedes Ocular mit leichter Mühe umzuwandeln in ein solches mit einem Index , mit einem durch die Mitte gehenden Faden oder in ein solches mit einer Mikrometerplatte von beliebiger Eintheilung resp. Quadrirung. Wegen der Abbildungen und der Einzelheiten der Constructiön muss auf das Original ver- wiesen werden , doch möchte ich bemerken , dass , wenn sich diese Constructionen wirklich bewähren sollten , sie eine wesentliche Ver- besserung darstellen würden. Hergestellt sind die Vorrichtungen von den Herren Duvolet , man kann sie von ihnen beziehen oder auch von Herrn Cogit. Schiefferdecker (Bonn). Malassez, L. , Nouveain modeles de porte-loupes (Arch. d'Anat. Microsc. t. III, 1900, fasc. 4, p. 424—428 av. 2 figg.). Im Jahre 1889 hat Verf. einen Lupenhalter beschrieben, 1 welcher eine Verbesserung jener Lupenhalter mit horizontalem Arm, der an einer horizontalen Stange verschiebbar ist , darstellt. Verf. ist mit diesem Modell sehr zufrieden gewesen, doch kann man es schlecht transportiren, und der Preis ist ziemlich hoch. Um ein solches In- strument auch bequem auf die Reise mitnehmen zu können, hat Verf. jetzt zwei neue Modelle construirt, welche gleichzeitig nicht theuer sind. Bei diesen ist der einfache Arm des Lupenhalters durch ein Parallelogramm ersetzt, und es ist eine praktische Klemme angebracht, um beliebige Lupen befestigen zu können. Verf. empfiehlt dabei übrigens sehr , die im Handel befindlichen vierseitigen Lupen , da man bei ihnen beide Augen verwenden könne. Das eine dieser Mo- delle ist so eingerichtet, dass es direct an dem Mikroskopstativ be- *) Malassez, L., Arch. de Med. Experiui. 1889, no. 1, p. 449. XVIII, 1. Referate. 29 festigt werden kann, wobei die zur Festklemmung- dienende Schraube mit einem längeren, einen horizontalen Stab darstellenden Griff ver- sehen ist , auf welchem sich ein kugelförmiges Gewicht verschieben lässt, das als Gegengewicht gegen den Lupenarm mit der an diesem festsitzenden, verschieden schweren Lupe dient. Die Höhenverstel- lung der Lupe würde hierbei durch den Trieb oder die Mikrometer- schraube des Mikroskops erzeugt werden. Das andere Modell ist so eingerichtet, dass es an einem beliebigen, genügend schweren Gegenstand angebracht werden kann , z. B. an der Seite eines me- tallenen Kastens, in welchem die verschiedenen Lupen aufbewahrt werden. Hier wird die Höhenverschiebung durch eine senkrecht stehende Schraube ohne Ende bewirkt, welche auf ein Segment eines Metallrades wirkt, das wiederum mit dem parallelogrammförmigen Lupenarm in Verbindung steht. Betreffs der Abbildungen sowie des näheren muss auf das Original verwiesen werden. Soweit man sich aus der Arbeit ein Bild von den Apparaten machen kann, scheinen dieselben recht praktisch zu sein. Sie sind construirt worden von den Herren Duvolet und sind zu haben bei diesen und bei Herrn Cogit. Schieferdecker (Bonn). Thilo, 0., Lupenh alter und Präparathalter (Anat. Anz. Bd. XVIII, 1900, No. 17, p. 414). Im Hinblick auf das vor kurzem empfohlene Lupenstativ von Paula Günther erinnert Verf. an seinen Lupenhalter und Präparat- halter, die er auf der Naturforscherversammlung zu Braunschweig vorgelegt hat. 1 Er hebt hervor, dass bei seinem Präparatenhalter die Möglichkeit vorliegt, die Präparate bequem um drei Achsen zu drehen und trotzdem unbeweglich festzustellen, während die Lupen- halter von Paula Günther nur um zwei Achsen drehbar seien. Man könne seinen Halter ferner an jedem Stativ befestigen. Da sein Modell in keiner Weise geschützt sei, so könne es von jedem Metallarbeiter hergestellt werden. Schiejferdecker {Bonn). Berger, E., Ueber stereoskopische Lupen und Brillen (Arch. f. Anat. u. Physiol. Jhrg. 1900, Physiol. Abth., Supplementbd. p. 336 — 337). Verf. hat eine binoculäre Lupe construirt , welche aus zwei zu einander geneigten decentrirten Binconvexlinsen besteht. Solche x ) Vgl. Anat. Anz. Bd. XIV, 1897, No. 7, p. 191. 30 Referate. XVIII, 1. Linsen entwerfen von einem innerhalb der Brennweite befindlichen Gegenstand je ein aufrechtes , vergrössertes , weiter als der Gegen- stand entferntes, virtuelles Bild für jedes Auge. Da diese Bilder auf identische Netzhautstellen beider Augen projicirt werden, so werden dieselben im Gehirn als einem Gegenstand angehörend wahr- genommen. Beide Bilder sind um so mehr temporalwärts abgelenkt und desto mehr von einander verschieden, je kürzer die Brennweite der die binoculäre Lupe darstellenden Linsen ist. Erstere Erscheinung erklärt, warum langes Beobachten mit der neuen Lupe ohne erheb- liche Divergenzanstrengung möglich ist, letztere ist Ursache der starken stereoskopischen Wirkung der Lupe. Dieselbe ist bestimmt, die ein- fache Lupe in allen ihren bisherigen Anwendungen in der Wissen- schaft, Kunst und Industrie zu ersetzen. Sie behält die Brennweite, Yergrösserung und den Arbeitsabstand der bisherigen Lupe bei; ihr Gesichtsfeld ist grösser als das der letzteren. Sie ermöglicht die Untersuchung mit beiden Augen , mit Verfeinerung der Reliefwahr- nehmung. Sie gestattet eine lange andauernde Arbeit ohne An- strengung der die Convergenz bewirkenden Musculi recti interni. Die Ueberanstrengung des allein bisher verwandten Auges, sowie die Ermüdung des Schliessmuskels des anderen nicht arbeitenden Auges, die Schädigung des binoculären Sehactes durch lange anhaltende Nichtbenutzung eines Auges entfallen. Es tritt, wie schon erwähnt, eine verfeinerte Reliefwahrnehmung ein , doch macht sich dieselbe erst nach einiger Uebung geltend. — Solche Lupen und Brillen sind von Gebr. Koch in Stuttgart käuflich zu beziehen. Seh iefferdecker {Bonn) . Regaud, Cl., et Fouillard, ß., Bain de paraffine ä chauf- fage electrique (Journ. de l'Anat. et de la Physiol., t. XXXVI, 1900, no. 5, p. 574—579, av. 3 figg.). Die Verff. empfehlen warm ein neues , mittels Elektricität er- wärmtes Paraffinbad, von welchem sie Abbildungen geben. Es niuss wegen der Beschreibung und der Abbildungen auf das Original verwiesen werden. Die Präparate werden, um sie möglichst wenig zu beschädigen, in kleine Drahtkörbchen gelegt, welche an einem Draht hängen , und können so , ohne dass man sie irgendwie mit einer Pincette etc. berühren müsste, durch die verschiedenen Härtungs- flüssigkeiten und schliesslich in das Paraffin gelangen. Die Vortheile dieses elektrischen Bades vor den anderen fassen die Verff. in fol- genden Sätzen zusammen: 1) Man braucht weder Gas noch Petro- XVIII, 1. Referate. 31 leuin, deren Unannehmlichkeiten bei dem Gebrauch von solchen Bädern bekannt sind. 2) Man braucht keine schweren, Platz fortnehmenden Paraffinöfen, welche sich nur langsam erwärmen, und deren genaue Regulirung fast unmöglich ist. Der neue Apparat ist klein, leicht, bequem zu transportiren, sehr sauber und in kurzer Zeit auf die richtige Temperatur zu bringen. 3) Die Wärmeregulirung ist äusserst genau, ohne dass man erst herumprobiren müsste, absolut automatisch und beliebig modificirbar. 4) Der Apparat ist sehr billig , da er einmal an sich nicht theuer ist , und dann , weil er sehr sparsam fimctionirt. Da er so rasch die richtige Temperatur erreicht , so braucht man ihn nur für die Zeit, wo das Präparat eingebettet wer- den soll, in Gang zu setzen und hat doch eine genaue Wärmeregu- lirung; auch wird die Wärme bei ihm besser ausgenutzt. — Der Apparat wird hergestellt bei Maury in Lyon, Mecanicien-Electricien, Quai Claude-Bernard 5. Der Preis ist nicht angegeben. Schiefferdecker {Bonn). Walz, K., Ein einfacher Brütofen für den praktischen Arzt (Münchener Med. Wochenschr. 1900, No. 27, p. 933 —934). Walz hat das von v. Esmarch zuerst zu einfachen Thermo- staten benutzte essigsaure Natron in Gestalt eines Thermophorappa- rates zu gleichem Zweck verwendet. Der Apparat besteht aus einem Thermophorcylinder aus vernickeltem Blech, welcher im geschlossenen Raum das Salz enthält. Er besitzt bei einer Höhe von 19 cm, 12 cm Diameter, so dass 25 bis 30 Reagensgläser und 8 bis 16 Petrischalen darin Platz finden. Um directe Bestrahlung der Culturen zu vermeiden, ist der Innenraum zweckmässig mit Eilz ausgelegt. Gegen Abkühlung ist der Thermophorcylinder, welcher mit einem Deckel zu schliessen ist, von einem Wärmeschutzmantel umgeben. Jeder Apparat wird am besten durch ein Deckelthermometer und ein Maximalthcrmometer im Innern controlirt. Der Thermophorcylinder wird zur Hälfte seiner Höhe gewisse Zeit in siedendes Wasser ge- taucht. Bei 2 Minuten Eintauchen stieg die Temperatur in einer halben Stunde langsam auf 44°, bei 105 Secunden auf 39°, bei 90 Secunden auf 35°, hält sich so anderthalb bis 2 Stunden, 4 bis 5 Stunden über 30° bleibend. Culturen kann man in warmem Wasser hineinstellen. Der Apparat 1 (Preis in Weissblech 16 bis 18 M., in Deutsche Thermophor -Actiengesellsch. Berlin SW. 19. 32 Referate. XVIII, 1. Nickel plattirt 20 bis 23 M.) kann auch für Paraffineinbettimg, Ver- dauungsversuche , zu Gährungsproben etc. gebraucht werden. Er hat an Diphtheriebacillen etc. seine Feuerprobe bestanden. Ozapleiuslä {Köln). 3. Präparationsmethoden im allgemeinen. Unna, P. G. , Celloidinum inelasticum (Monatsh. f. prakt. Dermatol. Bd. XXX, 1900, p. 422 — 424). Unna , P. 0. , Cello i'dinum inelasticum und Collodium elasticuni (Ebenda, p. 476 — 478). Unna wendet sich in seiner ersten Schrift zuerst dagegen, dass so vielfach die Paraffineinbettung für sicherer und besser gehalten werde als die in Celloi'din. Die erstere ist ja sicher da berechtigt, wo es sich um die Herstellung allerfeinster Schnitte (5 /*) und Schnitt- serien in Bandform handelt. Bei der Untersuchung der meisten Haut- affectionen ist sie aber nicht angebracht. Die Sucht nach allerfeinsten Schnitten führt hier oft auf Abwege, da in solchen der Zusammen- hang pathologischer Producte oft unauffindbar geworden ist, während die verschiedenen Elemente auch innerhalb dickerer Schnitte (10 bis 15 fi) durch die Fortschritte der Färbetechnik längst sicher zu diffe- renziren sind. Gut gefärbte dickere Schnitte sind für die meisten pathologischen Fragen weit lehrreicher als extrem dünne. Man würde daher allgemein bei der Untersuchung von Hautkrankheiten zur Cel- loidineinbettung greifen, wenn nicht bestimmte Arten von Schnitt- material bei ihr Schwierigkeiten machten, die bisher nicht genügend hervorgehoben sind. Bei den Tumoren, den Granulomen, den chro- nischen und acuten Entzündungen, solchen Affectionen, bei denen ein zellreiches Material oder ein geronnenes Exsudat zwischen die kolla- genen Fasern sich ergossen hat, kommen diese Schwierigkeiten nicht zur Wahrnehmung. Sie werden dagegen bemerkbar, wo ein spär- liches protoplasmatisches Material die kollagenen Bündel trennt wie bei normaler, besonders seniler Haut und rein fibrösen Neubildungen, und treten geradezu störend hervor, wo, wie bei den meisten Haut- atrophieen das Schnittmaterial zum allergrössten Theile aus Kollagen und Elastin allein besteht. Bei diesem Material und oft genug bei normaler Haut weicht der Celloi'dinblock bei feinerer Einstellung der XVIII, 1. Referate. 33 Mikrotomschraube dem Messer aus , etwa so , wie dasselbe beim Schneiden einer gehärteten Gelatinecnltur zu geschehen pflegt. Die regelmässige Schnittdicke ist eben an einen gewissen Grad von Plasticität resp. Mangel an Elasticität gebunden. Verf. hat nun seit langem Versuche gemacht, dem Celloidinblock mehr Plasticität durch einen in Alkohol und Aether löslichen Zusatz zu geben und hat dazu zunächst das Stearin verwendet. Besser erwies sich später ein Zu- satz von Piicinusöl. Die chemische Fabrik a. A. in Berlin , vormals E. Schering hat auf Wunsch des Verf. fertige Celloidintafeln mit bestimmten Zusätzen in genauen Proceutverhältnissen hergestellt. So wurden durchprobirt : Cacaobutter 0*4 und 2 Procent , Terpentinöl ein und 2 Procent, Campher ein Procent, stearinsaures Natron ein und 2 Procent, Glycerin 4 Procent, Ricinusöl 0*5, ein und 2 Procent. Als brauchbar erwiesen sich : Terpentinöl 2 Procent , stearinsaures Natron 2 Procent und ganz besonders Ricinusöl 2 Procent. Auch Mischungen dieser Zusätze oder der mit diesen einfachen Zusätzen versehenen Celloidinlösungen sind empfehlenswerth. Es ist für den Verf. zweifellos, dass seine Verbesserung, die sich zunächst besonders für die protoplasmaarme und zugleich äusserst brüchige senile Haut bewährt hat, im allgemeinen von allen Präparaten feinere Schnitte herzustellen erlauben wird. Die genannte Fabrik wird in Zukunft ausser den bisherigen Celloidintafeln solche von relativ unelastischem Celloidin unter dem Namen: Celloidinum inelasticum (ricinatum, tere- binthinatum, saponatum) mit je 2 Procent der betreffenden Zusätze vorräthig halten. In seiner zweiten Arbeit theilt Unna mit, dass der Titel Celloi- dinum inelasticum sowohl Anfragen wie Erläuterungen veranlasste, welche namentlich an die allgemein gebräuchliche Bezeichnung des Collodium ricinatum als Collodium elasticum anknüpften. Verf. geht genauer auf die historische Entwickelung des Collodiums und des Collodium elasticum ein und theilt die verschiedenen Zusammen- setzungen des letzteren mit. Es muss dieserwegen auf das Original verwiesen werden. Er schlägt schliesslich vor, den unpassenden Namen in der nächsten Pharmakopoe fallen zu lassen und durch das genaue Beiwort Collodium ricinatum resp. terebinthinatum zu ersetzen. Schi e ff er decket {Bonn). Haemers, A. Ch., Modification de la methode de colo- ration par l'hematoxyline ä l'alun de fer [Heiden- hain] (Bibliogr. Anat. t. IX, 1901, fasc. 1, p. 1 — 3). Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 1. 3 34 Referate. XVIII, 1. Verf. hat versucht, die Heidenhain'scIic Eisenhämatoxylin- färbungsmethode bequemer und sicherer ausführbar zu machen. Während Heidenhain die Beize auf die Schnitte einwirken lässt, hat er sie anf das ganze Stück einwirken lassen. Dasselbe kommt für 2 bis 8 Tage in eine öprocentige Lösung des Eisenalauns. Nach schnellem Auswaschen in destillirtem Wasser wird das Stück in eine gereifte einprocentige Hämatoxylinlösung für 4 bis 8 Tage über- tragen. Während dieser Zeit schlägt sich der Farbstoff mitunter in reichlicher Menge auf dem Stück und auf dem Boden des Gefässes nieder. Es ist daher gut , die Färbeflüssigkeit zwei- bis dreimal nach vorherigem Abwaschen in Wasser zu erneuern. Die Stücke imprägniren sich im allgemeinen gut und werden vollkommen schwarz. Dann Abwaschen in destillirtem Wasser und Entwässern in steigen- dem Alkohol. Im Alkohol entstehen dunkelbraune Farbwolkeu. Zeigen sich diese nicht mehr, so bettet man in Paraffin oder Celloi'din ein. Nach der schliesslichen Behandlung in absolutem Alkohol soll das Stück eine tiefschwarze Farbe mit dunkelblauem Reflex zeigen. Die Schnitte sehen gleichmässig dunkelblau aus. Sie werden in ge- wöhnlicher Weise aufgeklebt und dann durch Xylol von dem Paraffin befreit. Zur Doppelfärbung kann man Lichtgrün oder Fuchsin ver- wenden , oder auch ohne diese Einschluss in Canadabalsam. Die Methode gelingt auch nach Fixirung in FLEMMiNö'scher Chrom-Osmium- Essigsäuremischung, HERMANN'scher Platin-Osmium-Essigsäuremischung und MüLLER'scher Flüssigkeit. In diesen Fällen sehen die Schnitte tiefschwarz aus. — Die Vortheile dieser Methode sind die grössere Einfachheit, grössere Sicherheit des Gelingens, namentlich bei Celloi- dinpräparaten. Ferner ist die Färbung sehr gleichmässig, und jeder Niederschlag auf dem Schnitte wird vermieden. Schiefferdecker {Bonn). Harris, H. F., On the rapid conversion of hsematoxylin i n t o h ae m a t e i n in s t a i n i n g Solutions (Journ. ap- plied Microsc. vol. III, 1900, no. 3, p. 777—780). Verf. hebt hervor, dass, obwohl das von Mayer empfohlene Hämatein besser färbt als die gewöhnlichen Hämatoxylinlösungen, sich dieser Farbstoff doch nicht so allgemein eingeführt hat als er eigentlich verdient, da er weit theuerer als das Hämatoxylin und zweitens nur schwer in guter Qualität käuflich zu erhalten ist. Er hat daher schon vor drei Jahren eine Reihe von Experimenten be- gonnen, um eine schnelle Reifung des Hämatoxylins zu Hämatein in XVIII, 1. Referate. 35 der Farblösung zu bewirken. Seine erste Mittheilung darüber stammt aus dem Jahre 1898. Die zuerst angefertigte Lösung 1 hat sich sehr gut gehalten und gut gefärbt. In einem fest verschlossenen Gefäss hält sie sich Jahre lang. Sie wird mit der Zeit röther, färbt dann aber eher noch schärfer. Man verwendet sie am besten stark ver- dünnt, und kann diese Verdünnung entweder schon während der Herstellung der Flüssigkeit ausführen oder später. Im ersteren Falle inuss man das Verhältniss der Alaunlösung grösser nehmen. Verf. hat die fertige starke Lösung gewöhnlich erst zum Gebrauch ver- dünnt. Der beste Grad der Verdünnung ist der, wenn das destillirte Wasser oder das Alaunwasser, zu welchem man die Flüssigkeit trö- pfelt, eine dunkele Purpurfärbung angenommen hat. Er schlägt vor, diese Lösung als „Hämalaun" zu bezeichnen, da sie mit dem Mayer- schen in der That identisch sei. — Nachdem dieser erste Versuch gelungen war, wurde es unternommen, auch die anderen von Mayer hergestellten Lösungen in dieser Weise nachzuahmen. 1) Mayer's saures Hämalaun (Ersatz für das EHRLicH'sche saure Hämatoxylin). Man setzt zu der eben angegebenen Lösung 4 Procent Eisessig oder 8 Procent der gewöhnlichen Essigsäure. Ist das Hämalaun mit einer grösseren Menge von Alaunlösung hergestellt, so muss der Essigsäurezusatz etwas geringer sein. Der so gewonnene Farbstoff kann entweder unverdünnt oder besser (wenn die Färbung auch länger dauert) verdünnt angewendet werden in der Weise, dass man ihn zu reinem Wasser oder zu einer wässerigen Alaunlösung zufügt. Wird die Farblösung concentrirt angewendet, so tritt die Färbung fast augenblicklich ein. Trotzdem kann man die Schnitte auch beliebig lange färben, ohne dass je Ueberfärbung eintritt. Die Zellkerne werden purpurroth, während das Protoplasma kaum gefärbt erscheint. Bringt mau die Schnitte, nachdem sie in der reinen Farb- lösung gefärbt worden sind, für 10 bis 30 Minuten in Wasser, so wird die Kernfärbung noch dunkler. In der verdünnten Lösung ist die Färbung der Kerne nicht so intensiv roth wie bei der concen- trirten. Das Protoplasma ist fast gar nicht gefärbt, falls die Lösung nicht zu lange eingewirkt hat. Während Mayer einige Schwierig- keiten hatte, um seine Hämalaunlösung haltbar zu machen, und her- vorhob, dass ein Glycerinzusatz hierfür sehr praktisch wäre, hat sich die Lösung des Verf. gut gehalten. Da das aber möglicher- weise von der Verschiedenheit des Klimas herrührt, so hat er auch J ) Beschrieben in dieser Zeitschr., Bd. XVI, 1899, p. 48."). 3* 36 Referate. XVIII, 1. einen Glycerinzusatz versucht. Es genügt nach ihm 30 cc Glycerin zu 70 cc seiner Harnalaunlösung zuzufügen. Er nennt die Farb- lösung dann entsprechend Mayer „Glychärnalaun". 2) Hänia calci um. Dem Hämacalcium von Mayer entspricht die folgende Mischung. Man bereitet zwei Lösungen: A) Hämatoxylin 05 g Aluminiumchlorid Oo „ Eisessig 2-5 cc Alkohol, TOprocentig 150-0 „ Man löse das Hämatoxylin und Aluminiumchlorid im Alkohol, bringe die Lösung zum Kochen und setze allmählich 1 g Quecksilber- oxyd zu. Die Lösung nimmt schnell eine dunkelpurpurrothe Farbe an. Sobald dies geschehen ist, Abnehmen von der Flamme und schnelles Abkühlen. Die Säure kann man vor oder nach dem Auf- kochen zusetzen. — Lösung B) Calciumchlorid 25'0 g Essigsäure 2"5 „ Alkohol, TOprocentig 150-0 cc Man löse das Calciumchlorid im Alkohol. Man kann beide Lösungen (A und B) mischen und dann aufbewahren. Besser ist es aber, sie zu gleichen Theilen erst kurz vor dem Gebrauch zu mischen. Diese Farblösung wirkt nicht so gut wie die vorhergehenden, ist aber dann zu empfehlen, wenn nur eine alkoholische Lösung verwendet werden soll. 3) Hämatoxylin nach üelafield. Zum Ersatz dieser Farbflüssigkeit dient die folgende Mischung: Man löse l - g Hämat- oxylin in 6*0 cc Alkohol und setze Alaun (gesättigte wässerige Lösung) lOO'O cc zu. Aufkochen und Zufügen von 0'5 g Quecksilberoxyd. Sobald die Färbung dunkelpurpurroth geworden ist, Abnehmen von der Flamme und schnelles Abkühlen. Nach dem Abkühlen füge man 25'0 cc Methylalkohol und ebensoviel Glycerin zu. Die Lösung ist sofort gebrauchsfähig. 4) Muchä matein (Mayer). Die Ersatzflüssigkeit hierfür ist die folgende : Aluminiumchlorid O'l g Hämatoxylin - 2 „ Alkohol, TOprocentig 100 - cc Man löse das Aluminiumchlorid und das Hämatoxylin, bringe die Lösung vorsichtig zum Kochen und setze allmählich 0*6 g Queck- XVIII, 1. Referate. 37 silberoxyd zu. Ist die Farbe dunkelpurpurroth geworden, so entferne man die Flüssigkeit von der Flamme und kühle sie ab ; vor oder nach dem Aufkochen gebe man noch einen Tropfen Salzsäure zu. — Will man nicht eine alkoholische Lösung verwenden, so kann man die eben angegebene Menge des TOprocentigen Alkohols auch durch gleiche Theile von Glycerin und "Wasser ersetzen. Die Farbflüssig- keit wird sonst in der gleichen Weise angefertigt, doch genügen in diesem Falle 0'2 g Quecksilberoxyd. Man kann auch hier einen Tropfen Salzsäure oder Salpetersäure zufügen, doch ist es nicht nöthig. — Bei der Zubereitung dieser Lösungen ist es übrigens nicht nothwendig, sich genau an die in den Formeln angegebenen Häma- teinmengen zu halten; man, darf im Gegentheil oft mit Vortheil hier eine Aenderung eintreten lassen , namentlich indem man weniger nimmt. Verf. hat sich im allgemeinen genau an die Angaben von Mayer gehalten. Schieferdecker (Bo?m). Saintoil, P. , Sur les causes d'erreur dans l'interpre- tation des resultats fournis par la m et ho de osmiocliroraique (p r o c e d e de Marchi) (Centralbl. f. Nervenheilk. u. Psychiatrie Bd. XIII, 1900, No. 130, p. 6G7). Nach Verf. ist es gerade für die MARCHi-Präparate sehr wichtig, sorgfältig auf das Material zu achten. Fäulniss der frischen oder in MüLLER'scher Flüssigkeit gehärteten Stücke bedingt positiven Ausfall der Osmiumsäurereaction. Schieferdecker {Bonn). Beiida, C. , Ueber neue Darstellungsmethoden der C ent ralkör per che n und die Verwandtschaft der B a s a 1 k ö r p e r der Zelle mit Centralkörper- chen (Arch. f. Anat. u. Physiol. , Physiol. Abth. , 1901, H. 1, 2, p. 147— 157). Verf. hebt hervor, dass ihm für seine Untersuchung die Auf- findung neuer Methoden zur Darstellung der Centralkörper die grösste Hülfe geleistet habe. Die souveräne Methode für die Darstellung dieser Theile ist zur Zeit diejenige von M. Heidenhain, die in einer Härtung mit Sublimat und Färbung mit Eisenhämatoxylinlack besteht. Dasselbe und ähnliche Färbeverfahren wurden zur Darstellung der Centralkörper auch nach Härtung mit FLEMMixo'scher oder Hermann- scher Flüssigkeit verwendet. Diese Härtungsverfahren besitzen den grossen Nachtheil, nur bei äusserst kleinen Gewebsstücken gleich- 38 Referate. XVIII, 1. massige Resultate zu liefern, und so ist es meistens nur der der ursprünglichen Oberfläche des Stückchens entsprechende Schnittrand, der scharfe Bilder von Centralkörperchen giebt. In einer früheren Mittheilung hat Verf. über eine neue Darstellungsmethode bei den Hypophysiszellen berichtet. 1 Diese Untersuchung ist der Ausgangs- punkt für eine ganze Gruppe neuer Darstellungsmethoden der Central- körperchen geworden. Benda hat sich zunächst durch zahlreiche Versuche überzeugt, dass man an Formalinmaterial durch geeignete Chromirungen Centralkörperchen, Gliafasern, Seeretgranula, Muskel- streifung zur Anschauung bringen kann. Diese Methoden sind sämmt- lich in ihren Resultaten mit der Gliamethode von Weigert verwandt, welche als die einfachste der Gruppe gelten kann. Statt der so- genannten Gliabeize Weigert's kann Chromsäure, statt der sogenannten Reduction Weigert's und Färbung mit Methylviolett etc. dasBENDA'sche Eisenalizarin -Methylenblau- (oder Toluidinblau-) Verfahren oder ein Hämatoxylinverfahren 2 eintreten. Neuerdings ist Verf. von der For- malinvorhärtuug abgegangen, weil sie durch ungleichmässiges Ein- dringen in fettreiche Gewebe, vielleicht auch bei verlängerter Ein- wirkung, einige Unzuverlässigkeiten bedingt, die besonders bei der Neurogliadarstellimg schon vielseitig empfunden wurden. Das sicherste Vorhärtungsmittel ist Alkohol von 90 bis 95 Procent, der noch bei über 2 cm dicken Stücken selbst von Centralnervensystem gleichmiissig eindringt und die genannten Struc- turen so gut erhält, dass Verf. noch an 5 Jahre altem Alkoholmaterial Alles zur Darstellung bringen konnte, nachdem er ein für dasselbe geeignetes Chromirungsverfahren gefunden hatte. Sowohl an Gefrier- schnitten wie an Paraffin- und Celloidinschnitten gelangen die Fär- bungen. Methode: 1) Härtung in 93procentigem Alkohol (minde- stens 2 Tage bis beliebig lange) ; 2) Verdrängung des Alkohols durch wässerige Lösung der officinellen Salpetersäure (25"7procentig 1 Th. , Wasser 10 Th. ; 24 Stunden). Hierzu schneidet man das Material in kleinere Scheiben, z. B. Centralnervensystem nicht über 0*5 cm dick; 3) Einlegen in wässerige Lösung von Kalium bichromat (etwa 24 Stunden) ; 4) Einlegen in eine einprocentige Lösung von Chromsäure (etwa 48 Stunden); 5) gründliches Auswässern, dann Gefrierschnitte, oder nach der Wässerung Härtung in steigendem r ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 383. 2 ) Müller, E., Studien über Neuroglia (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LV, 1899, p. 11 ; vgl. diese Zeitschr. Bd. XVI, 1899, p. 473). XVIII, 1. Referate. 39 Alkohol, Durchtränkung mit Paraffin (welches Verf. für dieses Ver- fahren Celloiidin entschieden vorzieht). Die Färbung der Schnitte wird entweder nach Analogie der WEiGERT'schen Glia- färbung vorgenommen; 6) Oxydiren mit O'öprocentiger Lösung von Kaliumpermanganat (etwa 5 Minuten); 7) Reduciren mit Pal'scImt Natriumnitrat - Oxalsäurelösung bis die Schnitte weiss sind; 8) Ab- spülen der abgetrockneten Schnitte mit Weigert's Methylviolett- Oxalsäurelösung (statt dessen eine von Benda angegebene haltbare alkoholische Krystallviolettlösung. 1 Aufgeklebte Paraffinschnitte sind einige Minuten bei leichtem Erwärmen zu färben) ; 9) Abtrocknen und Abspülen mit LuGOL'scher Lösung; 10) gründliches Abtrocknen und Differenziren mit Anilinöl und Xylol zu gleichen Theilen ; 11) Ab- trocknen, Abspülen mit Xylol, Balsam. Schöne Contrastf ärbungen giebt das Benda'scIic Eisen- alizarin-Toluidinblauverfahren und zwar die in dieser Zeitschrift be- reits früher referirte „Färbung A."* 2 Es gelingen auch m e h rere II ä m a t o x y 1 i n 1 a c k v e r - fahren, so ein von dem Verf. angegebenes, bei dem die Differen- zirung der Schnitte und gleichzeitige Nachfärbung durch van Gieson's Pikrinsäure-Säurefuchsingemisch erfolgt. Sehr scharfe Färbungen der Centralkörper sowie der anderen genannten Elemente erhält man auch an dem gechromten Alkoholmaterial, wenn man nach Eisen- hämatoxylinfärbung mit Weigert's Borax -Blutlaugensalzlösung, der- selben, die zur Markscheidendifferenzirung verwendet wird, differen- zirt. Dagegen gelang an dem Material die Differenzirung mit Eisen- alaunlösung nach Heidenhain nicht so gut wie am Sublimatmaterial. — Alle die genannten Methoden haben das gleichmässige Resultat, in erster Linie die Centralkörperchen und die Basalkörperchen zu färben; daneben sind in gleicher Weise Avie diese die Kerne der Zellen, einige Arten von Secretgranula (z. B. Hypophysis, Labdrüsen, Pankreas) sowie die eosinophilen Leukocytengranula gefärbt, endlich Gliafasern, Muskelquerstreifen, Kittlinien (Schlussleisten der Epithe- lien), und somit auch die Secretcapillaren vieler Drüsen (Gallen- capillaren etc.). Die Schärfe der Centralkörperchenfärbung erlaubt, diese auch an ziemlich dicken Schnitten zu erkennen. Sie sind von den Secretgranula stets durch ihre Lagerung in einem körnchenfreien Hof zu unterscheiden. Die mit den angegebenen Methoden her- ') Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 503. 2 ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 503. 40 Referate. XVIII, 1. gestellten Präparate zeigen fast in jeder Zelle die Centralkörperehen. So hat Verf. an menschlichem, nicht einmal übermässig frischem Material auch einige bisher noch nicht oder nur selten gefundene Centralkörperehen gesehen, so in Gliazellen, Leberzellen, Epidermis- zellen etc. Schieferdecker {Bonn). Reddingius, R. A., Feher die Kernkörperchen (Virchow's Arch. Bd. CLXII, 1900, H. 2, p. 206 — 221). Verf. hebt hervor, dass die Kernkörperchen mit Ausnahme von einigen gelegentlichen Bemerkungen in Specialarbeiten durchschnitt- lich sehr kümmerlich behandelt werden. Die Cytologie dreht sich hauptsächlich um den Kern. An dieser stiefmütterlichen Behandlung seien einigermaassen die üblichen Methoden der Conservirung und Färbung der Präparate Schuld. Die Kernkörperchen färben sich bei den bekannten Methoden nur schwach oder so intensiv , dass man keine Besonderheiten an ihnen zu unterscheiden vermag. Zu inten- sive Färbung ist ein ebenso grosser Fehler wie gar keine Färbung, da in beiden Fällen das betreffende Element keine Gelegenheit hat, durch seine Structur die Aufmerksamkeit auf sich zu lenken. Verf. hat nach vielen Versuchen die folgende Färbemethode ausfindig ge- macht, um die Kernkörperchen gut darzustellen: Härtung in 96pro- centigem Alkohol; sowohl frisches wie der Leiche entnommenes Ma- terial ist brauchbar. Wie weit das Resultat in Einzelheiten von der Zeit, welche seit dem Gewebstode vergangen ist, abhängt, hat Verf. nicht in systematischer Weise untersucht. Frisches Gewebe wird den Vorzug verdienen. Dünne Scheiben des in Alkohol gehärteten Materiales werden abgetrennt , in Wasser von Alkohol befreit und mit dem Gefriermikrotom geschnitten. Oft hat Verf. auch das frische Gewebe mit dem Gefriermikrotom geschnitten und die Schnitte Schrumpfung vermeidend in Alkohol fixirt. Dieses Verfahren er- möglicht, in wenigen Minuten Schnitte für die weitere Untersuchung fertig zu haben. Lose gefügtes Gewebe wird am besten in Celloi'din eingebettet. Hat man keine Eile , so ist es in jedem Falle besser, Celloi'din zu verwenden , da dieses nichts schadet. Ueber Paraffin hat Verf. keine Erfahrung. Formalin , MüLLEii'sche Flüssigkeit, FLEMMiNG'sche Lösung sind zu widerrathen. Aus dem 96procentigen Alkohol kommen die Schnitte 1) in Löffler's Methylenblau für einige Secunden bis zu 3 Minuten, 2) Abspülen in ausgiebiger Menge von Leitungswasser, 3) gesättigte alkoholische (96procentig) Lösung von Pikrinsäure. In dieser Flüssigkeit (grosses Uhrglas) verbleiben die fe XVIII, 1. Referate. 41 Schnitte so lange , bis erwartet werden kann , dass sie wasserfrei geworden sind ; 4) Origannmöl, bis die Präparate durchscheinend ge- worden sind ; 5) die Schnitte werden aus dem Oel auf den Object- träger übertragen und mit einigen Schichten von Filtrirpapier ab- gedrückt um das Origanumöl so vollständig wie möglich zu entfernen. 6) Einschluss in Canadabalsam. Der blau gefärbte Schnitt nimmt in Pikrinsäure eine rothbraune Farbe an. In Origanumöl wird er olivengrün, bisweilen grasgrün. Die Farbe ist beständig. Das Oel muss nach Verf. die Differenzirung zu Stande bringen; es spielt bei der Methode eine wesentliche Rolle. Er empfiehlt Origanumöl von Grübler (Leipzig). Zuerst hatte er ein Oel, welches schon lange Zeit im Laboratorium aufbewahrt worden war. Es leistete, obgleich es eine ganz dunkelbraune Farbe angenommen hatte, ausgezeichnete Dienste. Der kleine Vorrath war bald verbraucht und Verf. bezog neues Oel aus einer anderen Quelle; dieses differenzirte aber schlecht. Er suchte nach einem Mittel um nachzuhelfen und fand , dass das geeignetste Anilinöl war, von welchem 10 bis 25 Procent zugesetzt wurden. Die Differenzirung gelang wieder wie zuvor; die Präparate wurden aber braun, ohne ganz verdorben zu sein. Als er später wieder Origanumöl von Grübler erhielt, war der Zusatz überflüssig. Nelkenöl hat eine zu stark entfärbende Wirkung, kann aber zu- weilen von Nutzen sein, da es vorkommt, dass mit Origanumöl die Differenzirung sehr langsam vor sich geht (Knorpel). (Verf. be- merkt am Ende der Arbeit aber, dass ein neuer Vorrath von Grübler bezogenes Origanumöl die grössten Schwierigkeiten für die Färbung brachte; kein Präparat gelang. Die beschriebenen Gebilde wurden alle gleichmässig grün; von Differenzirung war keine Spur zu sehen. Ausserdem sahen die sonst so scharfen Strueturbilder wie geschrumpft aus. Zusatz von Anilinöl ist immer ein Behelf, sodass ein Mittel, welches das Origanumöl ersetzen könnte oder seine Wirkung mehr constant machen würde, sehr erwünscht bleibt.) Es besteht ein ge- wisses Verhältniss zwischen den Phasen 1 und 4, welches nach dem Material verschieden ist. Man muss die Methode eben kennen lernen, doch handelt es sich nur um mehr oder weniger schöne Präparate; ein völliges Misslingen tritt nicht ein. Von normalem Gewebe em- pfiehlt Verf. die grossen Ganglienzellen aus den Vorderhörnern des Rückenmarks. Stücke von 4 bis 5 mm Dicke in Alkohol gehärtet. mit scharfem Messer von der Pia mater und der Arachnoidea befreit, können mit dem Rasirmesser und dem Gefriermikrotom geschnitten werden. — Für S p e r m a wandte Verf. die folgende Methode an : 42 Referate. XVIII, 1. Es wurde den sauber präparirten Samenbläschen entnommen, wo- möglich frei von Blut und Gewebebestandtheilen. Vorher war eine Anzahl von Deckgläschen (gerade Zahl) mit Alkohol und Aether ge- reinigt worden. Es wurde ein kleines Tröpfchen der Samenfiüssig- keit auf je ein Deckgläschen gebracht , dann wurden je zwei der Deckgläschen so zusammengelegt , dass die Tröpfchen einander be- rührten. Die schleimige Flüssigkeit breitet sich gleichmässig zwischen den Gläschen aus. Man lässt die von einander abgezogenen Deck- gläschen an der Luft liegen und fixirt sie nachher in einem Alko- hol-Aethergemisch (1 : 1). Die Zeitdauer kann Verf. nicht genau an- geben, doch erscheint es nicht vortheilhaft, die Fixirung über andert- halb Stunde währen zu lassen. Die so erhaltenen Präparate werden wie Schnitte behandelt. — Blutkörperchen: Durch aseptische Punction wird der Finger verwundet und das herabtropfende Blut auf vorher bereitgelegten Objectträgern aufgefangen. Nachdem man einen Tropfen erhalten hat , wird er durch eine kräftige Schleuder- bewegung mit dem Objectträger zu einer dünnen Schicht ausgebreitet. Man lässt ihn an der Luft trocknen und stellt die Objectträger für eine bis 2 Stunden in eine Alkohol-Aethermischung. Schiefferdecker {Bonn). Arnold, J., üeber „Fettkörnchenzellen"; ein weiterer Beitrag zur „Granulalehre" ( Virchow's Arch. Bd . CLXIII, 1900, H. 1, p. 1 — 20 m. 1 Tfl.). Nachdem es Verf. gelungen war, an lebenden und überlebenden Zellen durch vitale Färbung das Vorkommen von Plasmosomen und deren Uebergang in Granula, sowie bei der Isolirung der Zellbestand- theile an nicht fixirten Objecten die Beziehung der Plasmosomen und Granula zu einander und zu anderen Structurelementen nachzuweisen, hoffte er bei der Anwendung dieser Methode auch bezüglich der Lage der Fettkörner und deren Verhalten zu den Plasmosomen wich- tigere Thatsaehen zu erhalten. Er stellte zu diesem Zwecke Ver- suche mit Milch, Oelsäure, Hammeltalg, Nervenmark an und unter- suchte auch Körnchenzellen in Erweichungsheerden des Gehirns. Die Versuche wurden bei Fröschen ausgeführt. Bei den Versuchen mit Milch wurden feine Schnittchen von Hollundermark über ein- ander geschichtet in Milch getaucht und in den Rückenlymphsack von Rana fusca (Lymphe reich an eosinophilen Zellen) eingeschoben, in welchem sie einen bis 6 Tage liegen blieben. Man muss asep- tisch verfahren, die Versuche nur an nicht inficirten Thieren vor- XVIII, 1. Referate. 43 nehmen und darf daher auch keine Frühjahrsfrösche verwenden. Nach 24, 48 etc. Stunden nimmt man die Platten heraus und löst feine Lamellen ab, an denen die Beobachtung der Zellen in lebendem und überlebendem Zustande ausgeführt wird, nachdem sie in eine feuchte Kammer mit und ohne Zusatz von Farbstorfen in Substanz (Neutralroth und Methylenblau) eingeschlossen worden sind. Die übrigen Plättchen kamen in Formol. Nach 24 Stunden wurden die isolirten dünnen Lamellen einer secundären Osmirung in O'öprocen- tiger Osmiumsäure oder FLEMMiNG'scher Lösung unterzogen. Die FLEMMiNG'sche Lösung conservirt, wie Verf. hervorhebt, manche Granula schlecht und ändert deren tinctorielle Eigenschaften. Zum Theil erklärt sich hieraus der hartnäckige Widerspruch vieler Histo- logen gegen die Existenz der Granula. Andere wurden mit Sudan III gefärbt. Verf. verfuhr dabei so, dass er die Plättchen aus Wasser in dünnen Alkohol und von da in eine gesättigte Sudanlösung (in 96procentigeni Alkohol) brachte. Nach einer bis 2 Minuten Abspülens in verdünntem Alkohol, Auswaschen in Wasser, Einlegen in Glycerin (im wesentlichen in Uebereinstimmung mit Rosenthal). Die osmirten Präparate wurden nachträglich mit Safranin oder Hämatoxylin- Eosin, die Sudanpräparate mit Hämatoxylin gefärbt. Von den osmirten Objecten wurden nach Einbettung in Celloidin auch Schnitte angefer- tigt. — Versuche mit Oelsäure. Möglichst dünne, zu einem Satz aufgeschichtete Hollunderplättchen wurden mit einem kleinen Tröpfchen reiner Oelsäure beschickt und blieben im Rückenlymph- sacke von Fröschen verschieden lange liegen. Es wurde auch hier mit Neutralroth, mit Osmiumsäure und Sudan gefärbt. Die eosino- philen Zellen zeigten ein sehr bemerkenswerthes Verhalten. An den osmirten Präparaten waren die Granula schwarz , roth oder in Uebergängen zwischen beiden Farben gefärbt. — Hammeltalg. Tropft man geschmolzenen Hammeltalg auf Wasser, dem etwas Alkohol zugefügt ist, so bilden sich kleine Scheibchen, die man zwischen zwei Hollunderplättchen verpackt in den Rückenlymphsack einschieben kann. Nach einigen Tagen finden sich auch nach dieser Versuchsanordnung Leukocyten, welche spärliche oder zahlreiche Fett- granula führen. — ■ Nervenmark. Das Rückenmark vom Frosch wurde in einprocentiger Kochsalzlösung zerkleinert und ein Theil dieser breiigen Masse zwischen Hollundermarkplättchen eingeschlossen in den Lympbsack eingeschoben. Nach 4 bis 5 Tagen trifft man an osmirten Objecten zahlreiche Körnchenzellen. — Wie Verf. in einer Nachschrift bemerkt, ist ein sehr geeignetes Object für den 44 Referate. XVIII, 1. Nachweis von Fettkörnchenzellen die seröse Platte des Rückenlymph- sackes, welche die hintere Fläche des Kreuz- und Darmbeins über- zieht. Dieselbe lässt sich vom unteren Ende her bis beinahe zur Mitte des Rückens als zusammenhängende Membran ablösen. Hat man Fette in den Lymphsack eingeführt, so linden sich schon nach 6 bis 8 Stunden zahlreiche Fettkörnchenzellen in den Saftspalten und Lymphräumen derselben. Er erwähnt diesen Befund, um dem Einwurf zu begegnen, dass nur die in den Hollunderplättchen ent- haltenen Leukocyten in Fettkornchenzellen sich verwandeln. Seh ieffe relecker {Bonn). Arnold, J., „Fettkörnchen zellen" und „Granula lehre" (Anat. Anz. Bd. XVIII, 1900, No. 17, p. 385 — 391). Verf. hat in dieser Arbeit das Verhalten der Plasmosomen und Granula bei der Aufnahme und dem Umsatz von Fett geprüft. Er nahm zu diesem Zwecke Versuche mit Milch, Oelsäure, Talg und Nervenmark vor, indem er Hollunderplättchen mit diesen Substanzen beschickt in den Rückenlymphsack von Fröschen einschob und ver- schieden lange liegen liess. Die Plättchen wurden dann in eine feuchte Kammer eingeschlossen und die Zellen im lebenden und über- lebenden Zustande mit und ohne Zusatz von Neutralroth und Methylen- blau beobachtet. Andere kamen in Formol und wurden nachträglich mit O'Tprocentiger Osmiumsäure oder FLEMMiNG'scher Lösung behan- delt oder auch mit Sudan III gefärbt. Die FiiEMMiNG'sche Lösung hat hierbei den Nachtheil , dass sie die färberischen Eigenschaften mancher Granulaarten verändert. Sehr schöne Bilder liefert bei richtiger Anwendung die Sudanmethode combinirt mit Hämatoxylin- färbung. Von den osmirten Objecten wurden theils Flächenpräparate, theils Schnitte untersucht, welche bald mit Safranin, bald mit Hämat- oxylin und Eosinglycerin gefärbt wurden. — Verf. hebt hervor, wie wichtig die Untersuchung am lebenden Object und namentlich die vitale Färbung der Gewebe an sich und besonders für die Beobach- tung der Plasmosomen sei. Doch ist für die Untersuchung dieser letzteren auch die Anwendung anderer Methoden erforderlich , so namentlich die Conservirung in Formol, die Herstellung von Trocken- präparaten etc. Wer sich auf die Bearbeitung von Objecten, welche in FLEMMixa'scher Lösung oder verwandten Flüssigkeiten „fixirt" wurden, beschränkt, darf sich nach Verf. über die schlechten Erfolge . nicht wundern. Benda gegenüber, welcher eine Identität der Meta- chondrien und Plasmosomen vermuthet, hat Meves hervorgehoben, dass XVIII, 1. Referate. 45 erst das Verhalten der ersteren gegen Jodkalium geprüft werden müsse. Wie Verf. hervorhebt, könnte durch diese Bemerkung die missverständliche Auffassung veranlasst werden, als ob Jodkalium ein specifisches Reagens für die Plasmosomen sei, während mit seiner Hilfe nur eine isolirte Darstellung mancher Arten erzielt werden sollte. Sckiefferdecker ( Bonn). 4. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A. Niedere T hieve. Schüffner , Beitrag zur Kenntniss der Malaria (Deutsches Arch. für klin. Med. Bd. LXIX, 1899, p. 428 — 449 m. 1 Tri.). Schüffner berichtet über seine Erfahrungen bei Malariaunter- suchungen. Von der Untersuchung des Malariablutes frisch im un- gefärbten Zustande hält er nicht viel. Diese Methode genüge zwar bei den grossen Parasiten der Quartana und Tertiana meist, wird beschwerlich, wenn diese in geringer Zahl vorhanden sind, und noch schlimmer sei es mit den kleinen Parasiten der tropischen Malaria. Er empfiehlt daher, „die Untersuchung des nativen Präparates auf den Zweck zu beschränken, für den es unerlässlich ist, die Lebens- vorgänge der Parasiten zu verfolgen, zum Zwecke der Diagnose aber sich nicht lange damit aufzuhalten". Auch die Färbung in vivo mit Ascitesinethylenblau nach Celli und Guarnieri gebe unsichere Resul- tate. Es bleibe noch drittens der Weg der Färbung von Trocken- präparaten. Bei hohem Feuchtigkeitsgehalt der Luft wie in den Tropen morgens dauert das Lufttrocknen sehr lange , so dass die Erythroeyten leicht Degenerationsformen annehmen können. Auch nach dem Lufttrocknen kann das Präparat in ähnlicher Weise ge- schädigt werden und zwar wesentlich in Folge der Transspiration der Haut, zumal in den Tropen wegen der gesteigerten Sehweisssecretion. Während eine gut trockne Blutschicht dem Glase ein mattirtes Aus- sehen verleiht, mache der Niederschlag von Wasserdampf die Schicht sofort durchsichtig, er sieht aus, als sei das Glas mit einem feinen gelben Lack überzogen. „Mikroskopisch zeigt sich alles gequollen und zum Theil ganz unkenntlich geworden." Es sind also fast genau die gleichen Veränderungen wie von flüssigem Blut bei Wasserzusatz. 46 Referate. XVIII, 1. Von der Geschwindigkeit, mit der das Blut trocknet, scheine es auch abzuhängen, welche Gestalt der Parasit im Trockenpräparat einnimmt. Bei den meisten Methoden der Fixirung behalten die rothen Blut- körperchen ihre färbende Substanz und diese verdeckt durch ihre Färbung kleine mattgefärbte Parasiten. Mit der Methode Manna- berg's, welcher das Hämoglobin vor der Fixirung aus den rothen Blutkörperchen auswäscht, erreichte Verf. bei der Nachprüfung keine guten Resultate. Er fand dabei, dass das von Mannaberg zum Aus- ziehen des Hämoglobin vorgeschriebene destillirte Wasser auch auf die lufttrockne Schicht ganz besonders destruirend wirkt. Fixirung der Schicht mit nachfolgender Hämoglobinentfernung nach Günther 1 liess sich für Malariaplasmodien weniger gut verwerthen als für Ba- cterien. Man musste , da das Hämoglobin sich aus gehärteten Prä- paraten nur mit Säuren extrahiren lässt, wohl in zu starker Härtung den Fehler suchen, also eine unvollständige Härtung verlangen, um noch indifferente Mittel zur Extraction beibehalten zu können. Diese unvollständige Härtung erreichte Verf. durch längeres Ver- weilen des lufttrocknen Präparates an der Luft. Nach 2 bis 3 Tagen bleiben beim Wässern schon Spuren von Hämoglobin zurück, und nach 2 bis 3 Wochen geht fast nichts mehr davon in Lösung; die Schicht ist gehärtet, das Eiweiss hat seine Quellbarkeit, das Hämoglobin seine Löslichkeit verloren. Durch das Austrocknen an sich ist diese Lufthärtung nicht bedingt, da sich das Hämoglobin im Exsiccator Monate lang fast unverändert hält. Sie vollzieht sich umgekehrt in feuchter Luft rascher, an trocknen Tagen langsamer als an feuchten. Es muss sich also um eine chemische Umsetzung handeln. Die Blut- schicht kann auch zu lange härten. Diese überhärteten Präparate sind zu gewöhnlichen Färbungen nicht mehr brauchbar. Man schützt sich davor durch Luftabschluss und Trocknen über Schwefelsäure oder Chlorcalcium. Eine solche Ueberhärtung trete z. B. bei den aus fremden Gegenden nach Europa geschickten Präparaten ein. Gut ist es, wenn man nach der Lufthärtung, welche bei dem Klima von Sumatra zwischen der 6. und 36. Stunde nach der Blutentnahme eintritt, noch eine Nachhärtung entweder mit der MANNABERa'schen Pikrinsäurelösung oder Alkohol, Sublimat nachfolgen lässt. Verf. verbindet der Einfachheit halber die Nachhärtung mit der Extraction des Blutfarbstoffes durch einprocentige Formalinlösung mit 5 bis 10 Procent Glycerin (um das zarte Eiweisshäutchen besser vor Verletzung r ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 559. XVIII, 1. Referate. 47 zu schützen). Er nimmt statt Deckgläschen Objectträger (Empfehlung von Neisser, Teichmann). Zum Ausbreiten der Blutschicht benutzt Verf. den ausgezeichneten Handgriff von Jancso und Rosenberger. 1 Ein schräg gehaltener Objectträger berührt mit seiner unteren Kante oben den auf einem horizontalen Objectträger befindlichen Blutstropfen, welcher bei der Berührung ohne Hilfe von selbst längs der Kante ausfliegst. Durch Vorwärtsgleiten von der schräggehaltenen auf dem horizontalen Objectträger wird das Blut nachgeschleppt, und in eine gleichmässige Schicht ausgezogen. Manche Präparate verderben schon beim Trocknen durch Ausdünstung der Haut, Ammoniak (!) bei Kranken, die unter sich lassen, Trocknen u. A. m. Nach dem Lufttrocknen schütze man die Präparate vor Wasserdampf und starker Sonnenbeleuchtung. Die Methode des Verf.'s gestaltet sich danach wie folgt: 1) Ausziehen des Blutstropfens auf einem Objectträger. Namen oder Nummer in die Schicht schreiben (noch besser sind nach Verf. Objectträger, welche an einem Ende der Grösse des Etiquetts entsprechend mat- tirt sind). 2) Lufthärtung an einem etwas vor Licht geschützten Orte etwa 6 bis 80 Stunden lang. 3) Vorsichtiges Einlegen, Schicht n a c h unten, in eine flache Schale , mit einprocentiger Formalin- lösung und öprocentigem Glycerin. Die eine Kante des Objectträgers auf den Rand der Schale auflegen, 5 bis 10 Minuten lang. 4) Eben solches Einlegen in Brunnenwasser 15 bis GO Secuuden. 5) Färben mit Hämatoxylin je nach dessen Färbekraft in einer bis 10 Minuten. 6) Auswässern. 7) Trocknen, Canadabalsam. 8) Besichtigung, zuerst mit schwächeren Systemen. — Bei eiligen Untersuchungen könne man die Lufthärtung schon nach einer halben bis einer Stunde unterbrechen. In so gefärbten Präparaten wird der Untergrund durch die ganz zart blauen, eben nur sichtbaren, rothen Blutscheiben gebildet, aus deren regelmässigem Muster sich die übrigen Bestandteile des Blutes scharf hervorheben, dem Auge förmlich aufdrängen, wobei selbst die kleinsten Ringformen kaum übersehen werden können. Die Erhaltung der Form sei hier viel besser als in den Manna- BERG'schen Präparaten. Cxaplewski {Köln). Maurer, G., Die T üp f e lung derWirthszelle des Tertiana- parasiten (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Bd. XXVIII, 1900, No. 4, 5, p. 114—125). l ) Deutsches Aren. f. klin. Med. Bd. CVII, p. 449. 48 Referate. XVIII, 1. Maurer giebt ein Verfahren an, welches erlaubt, die von Schüffner 1 beschriebene Tüpfelung der von den Tertianaparasiten befallenen rothen Blutkörperchen auch mit der RoMANOWSKY'schen Methode darzustellen. Und zwar kam er bei seinen Versuchen zum überraschenden Resultat, dass die bis jetzt mit der Romanow sky' sehen Methode erreichten und beschriebenen Resultate nur einen mittleren Grad des Erreichbaren darstellen, dass man noch intensivere Fär- bungen damit zu erzielen vermag , dass man dann aber genaue Mischungsverhältnisse von Methylenblau und Eosin einhalten und sich das Eosin erst auf das Methylenblau richtig „einstellen" müsse. Die Blutpräparate stellt Verf. ausschliesslich nach Jancso und Rosenberger her. Absolute Reinheit des Objectträgers und gleichmässige Blut- schicht sind Grundbedingungen jeder exaeten Färbung. Trocknen des Präparates an der Luft 5 Minuten bis einen Tag (längere Luft- härtung ungünstig — Schüffner). Nicht gleich zu behandelnde Prä- parate kann man im Exsiccator über Schwefelsäure unbegrenzt lange aufbewahren. Ungefärbt zu versendende Präparate werden in Pulver- flasche mit lose aufgelegtem Glasstöpsel verpackt in den Exsiccator gestellt, dann gelegentlich der Stöpsel gut eingedichtet und paraffinirt. Härtung der Präparate in Alkohol -Aether ää oder absolutem Alkohol, auch nach Schüffner oder im Trockenschrank. Vor der Färbung werden die in Alkohol -Aether oder Alkohol gehärteten an der Luft oder in gelinder Wärme oder zwischen Fliesspapier getrocknet, die nach Schüffner behandelten in destillirtem Wasser abgespült, aber n i c h t getrocknet. Die Färbung soll sich der Härtung sofort an- schliessen , da sonst unreine Präparate erhalten werden , die nicht den höchsten Intensitätsgrad der Färbung geben. Als Färbstoffe dienen Methylenblau mit Roth und Eosin. Da nicht jedes Methylen- blau durch Alkalizusatz das erforderliche Roth bildet, muss man sich geeigneter Marken bedienen. Als solche empfiehlt Verf. „Methylenblau medicinale Höchst" und „Anilinblau Merk". Einprocentige Me- thylenblaulösungen mit 0'5 Procent Soda reift Verf. nicht wie Nocht im Paraffinofen sondern in der Sonne [2 bis 3 Tage ; Verf. hatte für sich die tropische Sonne von Medan in Sumatra , Ref.] oder in etwa 8 Tagen bei der dortigen Zimmertemperatur. Durch Zusatz von 0*25 Procent Formalin werden die Lösungen nach der Angabe des Verf. fast unbegrenzt haltbar. Von Esoin probirte er drei von Grübler bezogene Sorten : E I (rein für Blutfärbung) E II (w. bläul.) l ) Vgl. voriges Referat. XVIII, 1. Referate. 49 E III (w. g«) in Lösungen 1 : 1000. Alle verhalten sich verschieden, mussten also besonders auf das Methylenblau eingestellt werden : 1 Th. Methylenblaulösung erforderte 0"5 Th. von einpromillig E I, 1 Th. von E III und 10 bis 20 Th. von E II. Namentlich in älteren Trockenpräparaten und bei starkern Formalinzusatz behalten die rothen Blutkörperchen noch einen mehr oder weniger blauen Farben- ton. Man beseitigt ihn durch Abwaschen mit destillirtem Wasser oder durch Trocknen und Eintauchen in destillirtes Wasser, im Noth- fall durch Differenziren in dünnem Essigsäure -Methylenblau nach Zettnow mit rasch folgendem Abspülen , wobei aber stets einzelne Feinheiten verloren gehen. Angenehm fand Verf. einen leicht grün- lichen Farbenton der rothen Blutkörperchen. Gefärbte Präparate werden am besten trocken , nicht in Canadabalsam , aufbewahrt, da sie in letzterem bald die Farbe verlieren sollen [Widerspruch gegen- über Zettnow's Beobachtungen, Ref.]. Sein angestrebtes Ziel erreichte Verf. auf zweierlei Weise : 1) Durch rasches Mischen bestimmter Quantitäten der beiden Farb- lösungen und schnelles Aufgiessen auf das Präparat. 2) Durch längere Färbung in stark verdünnten , genau zusammengestimmten Lösungen. Hierbei benutzte Verf. eine über 30 Tage alte einprocen- tige Lösung von Methylenblau medicinale Höchst mit 0'5 Procent Soda und eine einpromillige Lösung von Eosin III = Eosin w. g. Grüblrr. Im Falle der raschen Färbung 1) wird der Objectträger mit der Schichtseite nach unten auf eine Glasplatte gelegt, dass das eine Ende etwas höher steht. In den entstehenden keilförmigen Raum giesst man durch einen Trichter die abgemessenen und im Becherglase im Augenblick vor dem Aufgiessen zusammengemischten Farblösungen. Die Färbung erfolgt in Minuten, ja Secunden. Diese starken Concentrationen wirken im Reactionsmoment am stärksten ; es muss daher dieser ausgenutzt werden. Es ergaben dabei auf 2 Th. Methylenblau 20 bis 12 Th. Eosin den ersten, 10 bis 4 Th. den zweiten, 3 bis 2 Th. den dritten und 2 bis 1 Th. den vierten Färbungs- grad. In letztem Falle dauert der Reactionsmoment nur Secunden. Versäumt man ihn, so erhält man keine RoMANOwsKY'sche Färbung. Bei diesem Verfahren sind ungenügende Färbungen und Nieder- schläge sehr häufig. Viel bessere Resultate giebt dagegen die zweite Methode mit verdünnten Farblösungen. In einem kleinen, cylindrischen Becherglase von etwa 80 cc Inhalt werden 15 Tropfen (= 1 cc) der Methylenblaulösung mit 25 cc Wasser gemischt, in einem zweiten Becher 15 Tropfen (= 1 cc) der Eosinlösung ebenfalls mit 25 cc Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 1. 4 50 Keferate. XVIII, 1. Wasser ; diese dünne Eosinlosung wird hierauf rasch zu der Methylen- blaulösung gegossen und das gehärtete Präparat sofort in die Mischung eingestellt. Um ja eine innige Mischung beider Farblösungen zu er- zielen , thut man gut , die Flüssigkeit mit dem Objectträger noch etwas umzurühren , bevor man ihn , mit der Blutschicht nach unten, an die Wand des Bechers anlehnt. Durch stetige Controle des Präparates unter dem Mikroskop kann man nun beobachten, dass je nach der Zeit, welche das Blutpräparat in der Far- benmischung zubringt, die verschiedenen Grade der RoMANOwsKY'schen Färbung nach einander erschei- nen: während der ersten 10 Minuten wird man nur den ersten Grad finden ; von da ab bis zu etwa 20 Minuten den zweiten Grad ; um den dritten und vierten Grad mit Sicherheit zu erreichen, muss man mindestens eine halbe bis längstens eine Stunde färben. Um letztere Zeit tritt in der Mischung ein Stadium ein , wo sich Eosin und Methylenblau vollständig „neutralisirt" haben; die Färbung kann nun nicht mehr intensiver werden, sie leidet im Gegentheil Schaden ; indem schon gefärbte Gebilde theilweise wieder ausgewaschen werden. Verf. rühmt an den so hergestellten Präparaten prächtig leuchtende Farben und Freibleiben von Niederschlägen. Das Präparat soll am besten so rasch als möglich nach Mischung der Lösungen hineingestellt werden ; beim Umrühren mit dem Objectträger vollzieht sich die Färbung rascher, aber mit Niederschlägen. Noch schneller erfolgt die Färbung bei tropfenweisem Zusatz von Eosin, bis auf der Ober- fläche ein metallisches Häutchen erscheint und der Objectträger stark roth gefärbt aussieht. Das richtige Verhältniss zwischen Eosin und Methylenblau muss ausprobirt werden. Verf. mischte zu diesem Zwecke mehrere Becher, welche je 25 cc der obigen Methylenblau- lösung enthielten, mit dem Inhalt von Bechern, welchen er auf 25 cc Wasser 1 bis x Tropfen der Eosinlosung zusetzte. Als das ge- suchte betrachtete er das Mischungsverhältniss , welches bei ein- stündiger Färbedauer den dritten und vierten Färbegrad am besten und reinsten ergab. Es erübrigt die Beschreibung dieser vier Grade des Verf. zu geben: Der erste Grad ist ausgezeichnet durch das Auftreten von rothen Körnern im Protoplasma des polynucleären Leukocyten und im Innern der Blutplättchen , während eine chara- kteristische Kernfärbung nur die Malariaparasiten zeigen. Der zweite Grad ist hauptsächlich charakterisirt durch Rothfärbung aller Kern- substanzen. Der dritte Grad erhält sein Gepräge durch das Er- scheinen der ScHÜFFNER'schen Tüpfelung in den von Tertianaparasiten XVIII, 1. Referate. 51 bewohnten Blutkörperchen. Vierter Grad : Erst mit diesem Grade, wenn die Färbekraft der Mischung ihre höchste Wirksamkeit ent- faltet hat , tritt uns in den Erythrozyten der „Kernrest" entgegen. — Bei der ScmüFFNER'schen Tiipfelung sind die so veränderten rothen Blutkörperchen schon mit schwacher Vergrösserung bequem zu sehen, durch ihre dichte röthere Färbung auffallend. Vor Ver- wechslungen mit eosinophilen Zellen, welchen grössere Parasiten mit ihrer auf das 2- bis Sfache geschwellten Wirthszelle täuschend ähn- lich sehen können, schützt die stufenweise Entwicklung, das Pigment im blauen Plasmaleibe des Parasiten und der Umstand , dass die Körnung eosinophiler Zellen bei der RoMANOwsKY'schen Färbung schmutzigblau erscheint. Als Kernrest bezeichnet Verf. ein roth- gefärbtes Gebilde , welches in der Mitte der rothen Blutscheiben, manchmal mehr excentrisch, im allgemeinen an der Stelle der Delle liegt und aus feinen und groben Körnern besteht. Der Kernrest nimmt den Raum der Delle ein und ist je nach Gestalt des rothen Blutkörperchens bald langgestreckt, bald rundlich. Er zeigt sich in einer Anzahl Erythrocyten bereits bei Sichtbarwerden der Schüffner- schen Tiipfelung, doch muss, bis alle Erythrocyten ihn aufweisen, die Färbung den dritten Grad überstiegen haben (am besten an frischen Präparaten aus Alkohol-Aether). Beim vierten Grade zeigt sich noch um das compacte rubinrothe Korn des Tertianaparasiten herumgelagert ein blasserer rother Hof, der das Kernkörperchen um das 4- bis Gfache vergrössert. Das dadurch gegebene Bild gleicht etwa einer Zeile mit Kern und Protoplasma. Gleichzeitig zeigt sich oft auch das Plasma des Blutpräparates eigenartig rothgefärbt, was, wie Verf. nieint, keine Verunreinigung, sondern der Ausdruck einer Färbung der durch Härtung geronnenen Eiweisssubstanzen ist. Ferner stellen die zu Haufen zusammenliegenden Blutplättchen jetzt eine fast compacte Masse dar, und es hat den Anschein, als ob bei den schwächeren Graden nur der Kern , hier aber noch eine äussere Hülle , diffus mitgefärbt sei. Verf. bezeichnet ausser dem Auftreten des Kernrestes die Erscheinungen an den Kernen der Tertianapara- siten und an den Blutplättchen als Kriterien für den höchsten erreichbaren Grad der RoMANOwsKY'schen Färbung. Am besten werden alle Bilder bei in Alkohol-Aether gehärteten Präparaten. Die Färbung lässt sich auch an nach Schüffner gehärteten Präparaten darstellen, verläuft hier aber rascher und mit Besonderheiten, welche Verf. genauer aus einander setzt, auf die hier aber nicht näher ein- gegangen werden kann. Cxaplewski [Köln). 4* 52 Referate. XVIII, 1. Borgert , A. , Untersuchungen über die Fortpflanzung der t r i p y 1 e n Radiolarien, speciell von A u 1 a - cantha scobymantha H. (Zool. Jahrb.; Abth. f. Anat. u. Ontogen. Bd. XIV, 1900, p. 203—276 in. 33 Figg. u. 5 Tfln.). Die Beobachtung lebender Aulacanthen ist wegen der Undurch- sichtigkeit der Centralkapsel fast ausgeschlossen. Ein rasches Fixiren des Materials nach Entleeren des Fangnetzes ist unbedingt geboten. Da ein Herausfischen der einzelnen Exemplare sehr umständlich und zeitraubend , auch wegen der unvermeidlichen starken Verdünnung der Fixirungsflüssigkeiten durch das hinzukommende Seewasser nicht rationell schien, wurde in der Weise verfahren, dass der ganze In- halt des am unteren Netzende angebrachten Glasgefässes durch ein Stück Gaze filtrirt und die gesammten, auf dem Filter zurückbleiben- den Organismen in die Fixirungsflüssigkeit übertragen wurden. Zur Aufnahme der letzteren wählt man am zweckmässigsten Gefässe von nicht zu engem Durchmesser , da sich in diesen die Planktonmassen schneller und gründlicher vertheilen lassen. Am wenigsten brauchbar zur Fixation erwiesen sieh Pikrinschwefelsäure und Gemische von Sublimatlösung und Osmiumsäure. Bessere Resultate lieferte die von Karawaiew empfohlene Mischung von starker Flemming' scher Flüssig- keit und Eisessig sowie das Pikrinosmium-Platinchloridessigsäure-Ge- misch, wie es vom Rath angegeben hat. So brauchbar sich auch diese beiden Flüssigkeiten im allgemeinen sowohl hinsichtlich der Fixirung des Kernes wie des intracapsularen Protoplasmas zeigten, erwiesen sie sich doch für gewisse Zustände nicht als die geeigneten Mittel. Es traten nämlich nicht selten starke Schrumpfungen der äusseren Form , in anderen Fällen Verklebungen der chromatischen Substanz ein. Von diesen Mängeln frei und überhaupt als sehr gutes Fixi- rungsmittel erwies sich ein Gemisch von concentrirter Sublimatlösung und Eisessig im Verhältniss 10 zu 2 bis 3. Die Centralkapseln behielten vollständig ihre pralle Form, und die Kernbestandtheile wurden immer ganz vorzüglich fixirt. Betreffs der Erhaltung der intracapsularen Protoplasmamassen sind die beiden erstgenannten Fixirungsrlüssi^keiten vorzuziehen. Behufs Bestimmung der für die weitere Untersuchung geeigneten Individuen wurden die Aulacanthen zunächst etwa 48 Stunden in stark verdünntem Salzsäurecarmin gefärbt, dann durch absoluten Alkohol in Nelkenöl übergeführt. Unter dem Mikroskop wurde dann eine Sichtung des Materials vorgenommen, wobei die für die weitere XVIII, 1. Referate. 53 Untersuchung bestimmten Exemplare isolirt wurden. Bei den letz- teren wurde dann die Centralkapsel mittels feiner Nadeln heraus- präparirt und entweder als Ganzes in Canadabalsam eingeschlossen oder für das Mikrotomiren vorbereitet. Die Einbettung in Paraffin geschah im Uhrschälchen. 1 Die Orientirung erfolgte unter dein Mikro- skop, indem durch Bewegen des Schälchens dem Object die ge- wünschte Lage gegeben wurde. Durch Niederlassen des Glases auf den Objecttisch wird die untere Paraffinschicht zum Erstarren ge- bracht und die Centralkapsel in ihrer Lage tixirt. Selbstverständlich ist zur Ermöglichung der Orientirung für jede Centralkapsel ein be- sonderes Uhrschälchen erforderlich. Die mit Wasser aufgeklebten Schnitte wurden in verschiedener Weise gefärbt. Nach Anwendung von FLEMMiNG'scher und vom RATn'scher Flüssigkeit, bei denen keine Färbung vor dem Einbetten stattgefunden hatte, lieferten Kleixex- berg's Hämatoxylin und Mayer's Paracarmin recht gute Resultate. Bei den mit Sublimat -Eisessig fixirten Exemplaren wurde fast aus- schliesslich und zwar mit bestem Erfolge die Heideniiain'scIic Eisen- hämatoxylinfärbung angewandt. Hierbei wurde , ebenso wie bei den Hämatoxylintinctionen in den meisten Fällen mit Eosin nach- S efärbt - E. Schoebel {Neapel). Kassianow, N. , Studien über das Nervensystem der L u c e r n a r i d e n , nebst sonstigen histolologi- sehen Beobachtungen über diese Gruppe (Zeit- schr. f. wiss. Zool. Bd. LXIX , 1901, p. 289—377 m. 11 Figg. u. 4 Tfln.). Ausser Macerationspräparaten (Maceriren in einem Gemisch von 1 Th. O'Oöprocentiger Osmiumsäure und 1 Th. 0*2procentiger Essig- säure) kamen hauptsächlich Schnittserien zur Untersuchung. Zur Fixirung diente Chromessigsäure, Pikrinschwefelsäure , ein Gemisch aus concentrirter Sublimatlösung und 70procentigem Alkohol , ferner Sublimatlösung allein. Alle gaben gute Resultate , die besten aber Pikrinschwefelsäure allein oder mit Zusatz von Osmiumsäure. Platinchlorid ist nicht zu empfehlen. Zur Färbung benutzte Verf. meist Delafield's Hämatoxylin , combinirt mit Eosin. Ausserdem wurde noch die vitale Methylenblaumethode, allerdings erfolglos, P robirt - E. Schoebel {Neapel). x ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIV, 1897, p. 472. 54 Referate. XVIII, 1. Dawydoff, C, Beiträge zur Kenntniss der Regeneration bei den Ophiuren (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXIX, 1901, p. 202—234 m. 3 Figg. u. 2 Tfin.). Als Fixirungsmittel sind zu empfehlen : Mischung von Sublimat und Kupfervitriol, LANo'sche Mischung, Pikrinessigsäure nach Boveri, ferner FLEMMiNG'sche und HERMANN'sche Lösung. Die Perenyi'scIic Flüssigkeit ist weniger zu empfehlen. Das beste Mittel zum Ent- kalken der Arme ist eine 5- bis Gprocentige Lösung von Essigsäure. Schwächere Lösungen wirken überaus langsam, ohne dass dabei ein besonderer Nutzen für die Erhaltung der Gewebe zu bemerken wäre. Sehr gute Resultate erhält man auch bei der Anwendung von Pikrin- säure. Zur Färbung der Schnitte kam Boraxcarmin , Carmalaun, Delafield's Hämatoxylin mit Nachfärbung in Aurantia und Pikrin- säure zur Verwendung. E. Schoebel (NeajJel). Bossliard, H., Zur Kenntniss der Verbindungsweise der S k e 1 1 e 1 1 s t ü c k e der Arme und Ranken von A n - tedon rosacea Linck [Comatula mediterranea Lam.] (Jenaische Zeitschr. f. Naturwiss. Bd. XXXIV, 1900, p. 65—112 m. 6 Tfln.). Zur Beobachtung kam lebendes und conservirtes Material. So- weit möglich , wurde letzteres nicht bloss an Schnitten und Zupf- präparaten , sondern auch in toto und zwar vor und nach erfolgter Entkalkung und Färbung untersucht. Als Fixirungsmittel haben sich concentrirte wässerige Sublimatlösung und 4procentige Lösung von Kaliumbichromat gut bewährt. Für die Herstellung der Skelettprä- parate wurde eine etwa 25procentige Kalilauge benutzt. Die zu ent- kalkenden Ranken und Armstücke wurden in relativ grosse Mengen 70procentigen Alkohols gelegt, dem nur wenige Tropfen Salpetersäure zugesetzt waren. Häufige Erneuerung der Entkalkungsflüssigkeit und wochen-, ja monatelanges Ausdehnen der Entkalkungsprocedur ist für die Herstellung genügender Schnittpräparate unbedingtes Erforderniss. Eingebettet wurde in Paraffin, aufgeklebt mit Wasser. Die Object- träger mit den Schnitten sollten aber mindestens eine Woche [?] an einem trocknen massig warmen Orte aufbewahrt werden, ehe sie einer weiteren Behandlung unterworfen werden, da sonst beim Färben, besonders in wässerigen Farbstofflösungen leicht Ablösen der Schnitte erfolgt. Zur Tinction wurden die verschiedensten Farben verwandt. Ausser den einfachen Färbungen mit Hämalaun, Carmin, Goldchlorid- Ameisensäure und Eisenhämatoxylin kamen als Doppelfärbung zur XVIII, 1. Referate. 55 Anwendung Pikrocarmin und Hamatoxylin combinirt mit Eosin, oder Orange, oder Säurefuchsin oder Pikrinsäure. Die besten Resultate gab aber entschieden die van GiESON'sche Methode. E. Schoebel {Neapel). Redikorzew, W., Untersuchungen über den Bau der cell en der Insecten (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXVIII, 1900, p. 581—624 rn. 7 Figg. u. 2 Tfln.). Die gesammelten Insecten wurden decapitirt und in frischem Zustande fixirt. Als gute Fixirungsflüssigkeiten sind zu empfehlen Pikrinschwefelsäure, Pikrinessigsäure, concentrirte Sublimatlösung und concentrirte Sublimatlösung mit 2 Procent Essigsäure. Nicht zu empfehlen sind Chromessigsäure und Platinchloridchromsäure. Nach dem Auswaschen des Fixativs wurden die Objecte in 70procentigem Alkohol aufbewahrt. Bei Bedarf wurde in gewöhnlicher Weise in Paraffin eingebettet und geschnitten. Von den verschiedenen brauch- baren Färbungen ist besonders eine Combination von Boraxcarmin und Bleu de Lyon zu empfehlen (nach Maurice und Schulgin). Das Object kommt 24 Stunden in toto in Boraxcarmin (auf dem Wärmeschrank bei 45° C.) und wird dann eine bis 2 Stunden mit einprocentiger Salzsäure ausgezogen. Hierauf folgt Einbetten und Schneiden. Die mit Wasser aufgeklebten Schnitte werden dann eine bis 2 Minuten in einer viertel- procentigen Lösung von Bleu de Lyon in TOprocentigem Alkohol gut nachgefärbt. Man erhält so Präparate , in denen die Kerne reine Carmintinction zeigen ; die Nervenfasern und Stäbchen sind intensiv blau, das Plasma ist hellblau, die Cuticula ist in ihren älteren Parthien roth, in jung abgelagerten dagegen blau gefärbt. — Behufs Isolation der Ocellen wurden folgende Macerationsflüssigkeiten verwendet: Kochsalzlösung mit 0"2 Procent Essigsäure (auf dem Wärmschrank von 45° C.) ; O'OOöprocentige Chromsäure (immer nur in geringer Menge angewendet, so dass das Object mit der Flüssigkeit nur be- deckt war); ganz schwacher Alkohol (lOprocentig) , sehr stark ver- dünnte Eau de Javelle. — Zur Entfernung des Pigmentes wurde mit gutem Erfolg 25procentige Salpetersäure und Chromsalpetersäure nach Jander angewandt. 1 Letztere Flüssigkeit wirkt sehr langsam aber ganz sicher. — Zur Erweichung der Cuticula für Schnitte ist Eau de Javelle zu empfehlen, erfordert aber äusserste Vorsicht ; das betreffende Object darf der Flüssigkeit keinen Zutritt ins Innere ge- !) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XV, 1898, p. 163. 56 Referate. XVIII, 1. statten, da sonst alle Weichtheile rasch zerstört werden. Man ver- schliesst also Mund und Halsöffnung des vom Körper abgetrennten Kopfes immer sehr sorgfältig mit Paraffin. E. Schoebel {Neapel). Gross, J., Untersuchungen über dasOvarium der Hemi- p t e r e n , zugleich ein Beitrag zur Amitosenfrage (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXIX, 1901, p. 139—202 m. 4 Figg. u. 3 Ttln.). Den gefangenen Thieren wurden die Ovarien herauspräparirt und diese möglichst schnell in die Fixirungsflüssigkeit gebracht. Als solche wurde nach einigen Versuchen mit concentrirter wässeriger Subliruatlösung , die starke Quellungen in den Geweben hervorrief, und FLEMMiNG'scher Chromosmiumessigsäure , welche den Dotter und gewisse Theile der Endkammer sehr stark schwärzte, durchgängig die vom RATH'sche Pikrin- Platinchlorid -Essigsäure angewendet. Die Objecte wurden weiter in gewöhnlicher Weise behandelt und dann mikrotomirt. Alle Versuche , das Chitin mit Eau de Javelle oder Eau de Labarraque aufzuweichen, misslangen vollständig. Zur Schnitt- färbung diente Hämatoxylin, combinirt mit Eosin. Der Dotter färbte sich hellroth, das Zellplasma mehr violett, das Kernplasma hell- blau, das Chromatin dunkelblau. Aehnliche Resultate gab Doppel- färbung mit Hämatoxylin und Safranin, nur färbte sich bei dieser Methode das Chromatin sehr intensiv dunkelroth. Bei Anwendung des HEiDENHAiN'schen Eisenhämatoxylins tringirte sich der Dotter recht stark , während das Zellplasma heller, das Kernplasma farblos blieb, das Chromatin dagegen fast schwarz wurde. Sehr intensiv schwarz färbte sich das Chromatin auch mit Kernschwarz, das den übrigen Zellbestandtheilen einen gelblichgrauen bis braunen Ton ver- lieh. Als am wenigsten geeignet erwies sich im allgemeinen eine Combination von Kernschwarz mit Safranin ; doch hatte diese Färbung den Vorzug, dass sie die Zellgrenzen sehr deutlich hervorhob. E. Schoebel {Neapel). Paul inier, F. C, The spermatogenesis of Anasa tristis (Journ. of Morphol. vol. XV, Suppl. 1899, p. 223 — 272 w. 2 pltes.). Die Hoden wurden unter physiologischer Kochsalzlösung heraus- präparirt und so schnell als möglich in das Fixativ übertragen. Hierzu empfieldt sich am meisten Hermann's und Flemming's Mischung bei einer Einwirkungsdauer von 15 bis 30 Minuten. Nach gutem Aus- XVIII, 1. Referate. 57 waschen in fliessendem Wasser wurde das Material mit Alkohol steigender Concentration behandelt und in 90procentigem Alkohol bis zur Weiterverarbeitung aufgehoben. Die Paraffineinbettung wurde nach Möglichkeit abgekürzt und gewöhnlich nicht über 15 Minuten ausgedehnt. Zur Färbung der Schnitte empfiehlt sich am meisten Heidenhain's Eisenhämatoxylin. E. Sclioebel (Neapel). Preiiant, A., Notes cytologiques. Cellules tracheales des cestres (Arch. d'Anat. Microsc. t. III, 1900, fasc. 4, p. 298—336 av. 2 plches.). Verf. hat an Oestridenlarven untersucht und zwar speciell an denen von Gastrophilus equi (es könnte möglicher Weise auch Gastrophilus pecorum sein). Die Larven von Hypoderma bovis L. und Cephalomyia ovis L. besitzen keine Trachealzellen und waren daher für diese Untersuchung' nicht verwendbar. Es konnten leider "b nur vollständig oder fast vollständig entwickelte Larven untersucht werden, von denen die kleinsten etwa 5 mm lang waren. Die Thiere wurden einmal frisch untersucht und dann auf Schnitten verschiedener Richtung. Fixirungsflüssigkeiten: Starke FEEMMiNG'sche Lö- sung, MANN'sche Lösung (gesättigte Lösung von Pikrinsäure 10 Th. ; gesättigte Sublimatlösung 10 Th. ; Formol 5 Th.) , Formol -Pikrin- säuremischung von Bouin (gesättigte Pikrinsäurelösung 75 Th., For- mol 25 Th. , Eisessig 5 Th.), Platinmischung von Bouin (I. Phitin- chlorür, einprocentige Lösung, 10 Th. ; gesättigte Pikrinsäurelösung 20 Th. ; Formol 10 Th. ; oder IL Platinchlorür, einprocentige Lösung 20 Th. ; gesättigte Sublimatlösung 20 Th. ; Formol 10 Th. ; Essig- säure oder Ameisensäure 2 bis 5 Th.), WEiGERT'sche Fixirungs- flüssigkeit für Neuroglia, x concentrirte Lösung von Sublimat in Koch- salzlösung, endlich die GoLGi'sche Flüssigkeit. Von diesen ergaben die Formol -Pikrinsäuremischung, die WEiGERT'sche und die Flemming- sche Flüssigkeit die besten Resultate. — Färbungsmittel: Sa- franin und Lichtgrün nach Benda, Safranin -Gentianaviolett- Orange nach Flem.ming, Toluidinblau - Eosin nach Mann und besonders die Eisenhämatoxylinfärbung von M. Heidenhain, welche bei weitem die schärfsten Bilder ergab, die einzige, die wirklich für das Zellstudium brauchbar war, und zwar besonders nach Fixirung in Formol -Pikrin- säure. Die WEiGERT'sche Neurogliafärbung ergab nichts, wie auch die GoLGi'sche Chromsilbermethode die gewünschte specilische Fär- v ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIII, 1896, p. 81. 58 Referate. XVIII, 1. bung nicht lieferte. — Die Schnitte wurden nach Paraffineinbettimg hergestellt. Schiefferdecker (Bonn). Pauldke, W. , Ueber die Diff er enzimng der Zellele- mente im Ovarium der Bienenkönigin [Apis mellifica q] (Zool. Jahrb.; Abth. f. Anat. u. Ontog. Bd. XIV, 1900, p. 177—202 m. 1 Fig. u. 4 Tim.). Als Fixirungsmittel dienten heisser Sublimatalkohol und Eisessig- Sublimat- Alkohol. Um ein rasches Eindringen zu ermöglichen, wurde das Abdomen vom Thorax getrennt und der erste Unterleibsring vor- sichtig entfernt. Vor der Einbettung in Paraffin wurden dann sämmt- liche Chitinringe , mit Ausnahme der zum Legeapparat entwickelten wegpräparirt, wobei die Organe des Abdomens völlig in situ zusammen- hängend bleiben. Die Schnitte wurden mit Böhmer's Hämatoxylin gefärbt, zum Theil combinirt mit Eosin. E. Schoebel (Neapel). Deegener, P., Entwicklung d e r M u n d w e r k z e u g e und des Darmkanals von Ilydrophilus (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXVIII, 1900, p. 111—168 m. 3 Tfln.). Das Untersuchungsmaterial bestand in Eiern von Hydrophilus und Dytiseus. Zur Fixirung erwies sich für die jungen Stadien besonders günstig halbprocentige Chromsäure und Pikrinschvvefelsäure. Dabei ist es gleichgültig, ob die Eier zuvor in 80 bis 90° warmen Wasser ab- getödtet oder sofort in die Fixirungsflüssigkeit von derselben Tem- peratur gebracht werden. Nach 2 bis 3 Minuten langem Verweilen in der heissen Flüssigkeit wurden sie für 12 Stunden in die kalte Fixirungsflüssigkeit übergeführt . dann in Wasser (Chromsäure) be- ziehungsweise 63procentigem Alkohol (Pikrinschwefelsäure) 2 bis 6 Stunden ausgewaschen und in 93procentigem Alkohol aufbewahrt. Für Hydrophilus giebt auch Fixirung in schwach (bis 30° C.) er- wärmtem Alkohol gute Präparate. Für die älteren Eier ergab Subli- mat in gesättigter wässeriger Lösung, auf '80 bis 90° erwärmt, bei einer Einwirkung von 2 bis 3 Minuten , sowie kalte gesättigte Lösung in 63procentigem Alkohol die brauchbarsten Resultate. Ob die Eier vor der Fixirung nach dem Abtödten angestochen oder geschält wurden, oder dies zeitraubende Verfahren nicht in Anwen- dung kam , blieb ohne Einfluss auf den Conservirungszustand. Für Totalfärbung muss aber unbedingt geschältes Material verwandt werden. Die Larven und Puppen von Hydrophilus wurden zunächst in einer 52° C. warmen concentrirten Sublimatlösung abgetödtet, dann vor- XVIII, 1. Referate. 59 sichtig aufgeschnitten und 24 Stunden lang- unter mehrfacher Er- neuerung der Flüssigkeit [?] weiter fixirt. Nach 24stündigem Aus- waschen in Jodalkohol wurde der Darm möglichst mit allen um- gebenden Theilen herausgelöst. Die Schnitte wurden mit Alaun- carmin , Boraxcarmin oder Hämatoxylin gefärbt. Für die Total- präparate zum Studium der Mundwerkzeuge wurde Alauncarmin be- nutzt. Die Aufhellung geschah durch Nelkenöl. E. Schoebel (Neapel). Hesse, R., Untersuchungen über die Organe der Licht- emp findung bei niederen T h i e r e n. VI. Die Augen einiger Mollusken (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXVIII, 1900, p. 379—477 m. 1 Fig. u. 8 Tfln.). Zur Untersuchung der Augen von Area Noae diente Material, das theils in Pikrinschwefelsäure, theils in Sublimat-Eisessig (5 Pro- cent Eisessig) fixirt war. Zur Färbung diente vor allem die Heiden- HAra'sche Eisenhämatoxylinmethode ; daneben wurden Doppelfärbungen mit Eosin und ÜELAFiELD'schem Hämatoxylin augewendet. Das Pig- ment wurde in der von Jander 1 angegebenen Weise durch Chrom- salpetersäure entfernt. Es war dazu eine 4tägige Einwirkung des Gemisches nöthig; die histologische Beschaffenheit der Präparate blieb aber, wie Vergleich mit ungebleichtem Material zeigte, völlig unverändert. Von Lima squamosa wurden die Mantelränder in Kleinenberg's Pikrinschwefelsäure , in Sublimat mit 5 Procent Essigsäure und in Formol fixirt. Zur Färbung diente theils Hämalaun, eventuell mit Eosin combinirt, theils Hämatoxylin nach Vorbehandlung der Schnitte mit Eisenalaun. Auch Totalfärbung der Mantelränder mit Hä matein IA nach Apathy gab gute Präparate. Das Untersuchungsmaterial zum Studium der Augen von Pecten und Spondylus wurde auf die verschiedenste Weise fixirt. Es kam zur Verwendung concentrirte Sublimatlösung einfach und mit 5 Pro- cent Essigsäure oder mit Zusatz von gleichen Theilen 95procentigem Alkohol; ferner Zenker's Flüssigkeit und Hermann's Gemisch. Eine Anzahl Augen wurde in Sublimat oder Pikrinsäure fixirt, nachdem sie zuvor 5 Minuten mit lOprocentigem Formol behandelt wurden. Endlich verwandte Verf. die von Cox angegebenen Gemische von 30 Th. Sublimat und 10 Th. Formol, beziehungsweise ebensoviel 1 ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XV, 1898, p. 163. 60 Referate. XVIII, 1. einprocentiger Osmiumsäure und 5 Th. Essigsäure. Es zeigte sich ein auffallender Unterschied zwischen den Präparaten, die mit Subli- mat- und denen, die mit Osmiumsäure-haltigen Gemischen fixirt waren; die ersteren waren etwas geschrumpft, die letzteren etwas gequollen. Eür die vorliegenden Zwecke sind erstere aber entschieden vorzu- ziehen. Zur Färbung diente vorzugsweise Heidenhain's Eisenhämat- oxylin, und daneben Hämalaun und Delafield's Hämatoxylin. Das Material zur Untersuchung der Augen der Heteropoden wurde theils frisch , theils conservirt untersucht. Die meisten Fixi- rungsmittel bewirken eine beträchtliche Schrumpfung dieser Augen und damit eine wesentliche Schädigung der histologischen Elemente ; dies gilt besonders auch von Subbmatlösungen in den verschiedenen Modifikationen , mit und ohne Zusatz von Essigsäure oder Alkohol und von den Pikrinsäuregemischen. Schwache FLEMMiNG'sche Lösung bewährt sich besser, auch MüLLER'sche Flüssigkeit. Die besten Re- sultate gab hier aber entschieden Formol in verschiedener Concen- tration. Das Auge behält seine Gestalt fast ganz unverändert und schrumpft nur ganz wenig bei vorsichtiger Ueberführung zunächst in eine Mischung von gleichen Theilen der betreffenden Formolver- dünnung mit 30procentigem Alkohol , dann in 30-, 50- etc.-procen- tigen Alkohol. Auch die histologische Erhaltung war bei dieser Be- handlung eine vorzügliche. Eine wesentliche Schwierigkeit bei Her- stellung der Präparate bietet die Eigenschaft des Glaskörpers, bei Behandlung mit Wasser aufzuquellen; dadurch wird das Strecken und Aufkleben der Präparate mit Wasser fast unmöglich gemacht. Durch Formol jedoch wird die Substanz des Glaskörpers derart ver- ändert, dass dieses Aufquellen nicht mehr eintritt. Im übrigen giebt aber gerade diese Eigenschaft des Glaskörpers ein bequemes Ver- fahren an die Hand, denselben aus Augen, die mit anderen Mitteln als Formol fixirt waren, zu entfernen. Legt man die fixirten Objecte in Wasser, so wird die vordere Augenwand gesprengt, und man kann leicht Linse und Glaskörper entfernen, ohne Retina, Deckmembran und die übrige Augenwand zu schädigen. Zur Färbung wurde fast ausschliesslich Hämatoxylin in verschiedener Form verwandt, so Häm- alaun, Delafield's Hämatoxylin besonders nach Vorfärbung mit Orange G und vor allem Heidenhain's Eisenhämatoxylin. Zur Untersuchung der Retina der Cephalopoden wurde das Material meist mit Sublimat und dessen Gemischen mit Essigsäure und mit Formol und Essigsäure verwendet. Die Pigmententfernung geschah nach Grenacher (2 bis 3 Procent Salzsäure zu einem Ge- XVIII, 1. Referate. 61 o misch von Alkohol und Glycerin) oder Jander (s. o.). Zur Färbung bewährte sich auch hier das Heidenhain' sehe Eisenhämatoxylin am besten - E. Schoebel {Neapel). Meves, F., Ueber den von v. la Valette St. George entdeckten Nebenkern [Mitochondrien-Körper der Samenzellen] (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LVI, 1900, p. 553—606 m. 2 Figg. u. 2 Tfln.). Zur Untersuchung diente Paludina und Pygaera. Die Hoden wurden mit Sublimat- Eisessig fixirt. Zur Tinction wurde Eisenhäma- toxylinmethode nach Heidenhain (mit Bordeaux -Verfärbung) verwandt. Für das Gelingen einer guten Färbung ist es besonders wichtig, den richtigen Ausziehungsgrad bei der Differenzirung zu treffen. E. Schoebel (Neapel). Meisenlieimer, J., Entwicklungsgeschichte von Dreis- sena polymorpha (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXIX, 1901, p. 1 — 137 m. 18 Figg. u. 13 Tfln.). Für die Furchungsstadien genügt Sublimat und Pikrinschwefel- säure vollständig, zum Studium der Organbildung liefert aber Her- MAxx'sche Flüssigkeit weitaus die besten Resultate. Für die ältesten Stadien giebt auch die ZENKER'sche Lösung gleich gute Erfolge. Als grosse Schwierigkeit macht sich geltend , dass die junge Larve, sobald sie Schale und Schalenmuschel entwickelt hat, äusserst con- tractu ist; sie zieht sich bei dem geringsten Reize auf einen Klumpen innerhalb der Schale zurück und ist so dem Studium nur schwer zugänglich. Durch vorsichtigen Zusatz von Cocain gelingt es, die Larven zu lähmen und in ausgestrecktem Zustande zu fixiren. Schwierig ist dabei , die Zeit genau abzupassen , wo die Lähmung gerade vollendet ist, und eine Auflösung der histologischen Elemente noch nicht einzutreten beginnt. So kommt es, dass eine ganz tadel- lose Fixirung nur verhältnissmässig selten zu erreichen ist, und es muss deshalb eine grosse Menge von Material verwendet werden. E. Schoebel (Neapel). 62 Referate. XVIII, 1. B. Wirb eltliiere. Marsclialko, Th. v., Die Plasmazellen im Rhino sklerom- gewebe; insbesondere über die hyaline Dege- neration derselben auch bei einigen anderen pathologischen Processen. Ein Beitrag zur Kenntniss der sogenannten Rüssel' sehen Kör- perchen (Ar eh. f. Dermatol. u. Syphilis Bd. LIV, 1900, H. 2 u. 3, p. 255 — 284 m. 1 Tfl.). Verf. fand bei seinen mit der ApAraVschen Dreifachfärbung tingirten Rhinosklerompräparaten, dass inmitten wohlerhaltener oder auf verschiedene Weise degenerirter Plasmazellen einzelne ein be- sonders Aussehen darboten. Sie stimmten morphologisch genau mit den um sie herumliegenden typischen Plasmazellen überein, nur war der Zellleib etwas vergrössert. Dieser zeigte eine deutliche Körnung; er war ganz voll von kleinen Granula. Bei diesen Zellen färbte sich nun die Körnung nicht violett, sondern deutlich gelb mit einem Stich ins Orange, der Kern deutlich violett wie derjenige der typi- schen Plasmazellen. Diese kleinen Granula nehmen also von der AplTHY'schen Färbemischung die sauren Farbstoffe , hauptsächlich das Ammoniumpikrat an. Aus der basophilen Plasmazelle war eine aeidophile geworden. Aus diesen kleinen Granula sollen dann durch Zusammenfliessen grössere, bei der Färbung gelbe Kugeln entstehen, welche bisweilen auch frei liegen. Sowohl die intracellulären wie die freiliegenden haben eine besondere Affinität zu sauren Anilin- farbstoffen. So färben sie sich mit der van GiESON'schen Methode (Säurefuchsin -Pikrinsäure) orange, mit Hämatoxylin- Eosin hellrosa oder kirschroth. Mit alkalischen Farbstoffen (Methylenblau, Safranin) färben sie sich weit schlechter, blassblau oder grünlichblau resp. roth, mit Carbolfuchsin ziemlich intensiv roth. Bei Präparaten, die nur mit Hämateiu gefärbt sind, sind sie nicht sichtbar. Mittels der GRAM'schen oder GiiAM-WEiGERT'schen Methode färben sie sich ganz dunkel schwarzviolett und leisten jedem Entfärbungsversuche energisch Widerstund. Vor diesen Färbungen hat aber die ApATHY'sche Drei- fachfärbung den Vortheil, dass damit sowohl Zellkern als Proto- plasma in Contrastfarbe gefärbt erscheinen. Schiefferdecker (Bonn) . XVIII, 1. Referate. 63 Gardner, 31., K woprossu o gisstogenese i sstroenii elasstitschesskoi tkani [Zur Frage der Histo- genese und des Baues des elastischen Ge- webes] (Inaug. Diss. Moskau 1898, 239 pp. m. 1 Tfl.). Gardner , 31. , De l'histogenese du t i s s u e elastique (Le Physiologiste Russe vol. I, 1898 — 99, p. 3 — 14, av. 2 plckes.). Verf. hat von vorn herein erkannt, dass er vor allern nach neuen Untersuchungsobjecten und neuen Methoden suchen müsse, um Neues über das schon oft bearbeitete Thema zu finden. Der Netz- knorpel und das Ligamentum nuchae , welche gewöhnlich benutzt worden sind , haben den Nachtheil , dass ihre Elemente zu nahe an einander liegen. Aus diesem Grunde musste die Zerzupfungsmethode angewendet werden, welche stark zerstörend auf das Gewebe wirkte und die Lage der einzelnen Elemente zu einander nicht genau er- kennen liess. Auch sind die zelligen Elemente dieser Organe so klein , dass Details ihrer Structur an der Grenze der Sichtbarkeit liegen. Als ein sehr günstiges Untersuchungsobject erschien das Amnion verschiedener Thiere , in welchem Verf. das elastische Ge- webe sehr verbreitet fand. Das Amnion hat die folgenden Vortheile: 1) Die Membranen, welche das Ainuion zusammensetzen, sind sehr dünn und durchsichtig, sie lassen sich leicht von einander trennen und können fast im lebenden Zustande mikroskopisch untersucht werden, olme vorherige besondere Behandlung. 2) Bei Benutzung passender Fixirungsmittel kann man nicht nur das Chorion leicht vom Amnion trennen, sondern auch dieses letztere in Membranen, welche nur aus einer einzigen Zelllage gebildet sind, zerlegen. Das hat wieder den grossen V ortheil , dass man bei der Untersuchung nicht die über einander liegenden Schichten verwechseln kann. 3) Die Zellelemente, welche die isolirten aus einer einzigen Zelllage bestehen- den Membranen bilden, liegen in einer bestimmten Zeit ihrer Ent- wicklung so weit von einander, dass man sich eine klare Vorstellung von den morphologischen Beziehungen zwischen den Zellen und der Intercellularsubstanz bilden kann. 4) Das Amnion ist ein Organ, dessen Entwicklung rasch beendigt ist, es zeigt ferner fortwährend die Charaktere einer activen Entwicklung, sodass man nicht zu fürchten braucht, auf irgendwelche degenerirenden Elemente zu stossen. Findet man zu Grunde gehende Zellen, so sind diese mit einer solchen Klarheit zu erkennen, und lassen die Degeneration so scharf hervor- treten , dass sie der Beobachtung nicht nur nicht schaden, sondern g4 Referate. XVIII, 1. im Gegentheil sie vervollständigen. 5) Endlich kann man bei der starken Entwicklung', die vorhanden ist, in den verschiedenen Schichten fast alle Entwicklungsstadien des Gewebes beobachten. - — Es wurde benutzt das Amnion von Schwein-, Schaf-, Kaninchen- und Meer- schweinchenembryonen in verschiedenen Entwicklungsstadien. Am günstigsten erwies sich das des Schweines gegen die Mitte der Trächtigkeitsperiode (Fötus von 10 bis 15 cm Länge). — Verf. hat ausserordentlich verschiedene üntersuchungs- und Färbungsmethoden angewendet. Zur Fixirung der Amnionmembran erwies sich die Mül- LER'sche Flüssigkeit als die beste, zur Darstellung der elastischen Fasern die Fuchsinfärbung nach Taenzer (modificirte UxNA'sche Methode). Die meisten sonstigen Fixirungsflüssigkeiten mit Einschluss der Osmiumsäure und des Sublimats lassen die Membran stark schrumpfen. Die anderen Färbungsmethoden geben weniger scharfe Milder. Die eigentliche TAENZER'sche Methode ist auf die Anwen- dung von Alkohol oder FLEMMiNG'scher Flüssigkeit berechnet. Da diese in Folge ihrer schrumpfenden Einwirkungen hier nicht anwend- bar waren, so hat er die Methode in folgender Weise modiiicirt: Fixirung in MüELRR'scher Flüssigkeit 2 bis 3 Tage, schnelles Aus- waschen in destillirtem Wasser, Ausziehen der Chromsalze durch Alkohol von G0° in der Dunkelheit, dann Uebertragen der Membran in Alkohol von 75°. Sie hält sich hier ziemlich lange ohne irgend eine der Eigenschaften des frischen Objectes zu verlieren. Will man ein Stück untersuchen, so wäscht man in destillirtem Wasser aus und entfernt die Epithelschichten entweder durch sanftes Schütteln in destillirtem Wasser oder mit Hülfe einer Pincette und zerlegt die Haut mit einer Pincette in möglichst feine Lamellen. Dann Färbung mit Vesuvin. Auswaschen des Farbüberschusses in Wasser, Einlegen für 24 Stunden oder noch besser länger in folgende Fuchsin- lösung : Fuchsin 05 g Alkohol 25-0 „ Wasser, destillirt 25"0 „ Salpetersäure, 25procentig 10-0 „ Dann Uebertragen für eine Secunde in eine 25procentige Lösung vod Kaliumhydroxyd, Auswaschen in einer Reihe von mit Wasser gefüllten Schalen. Dieses Auswaschen muss sehr schnell vor sich gehen, um so schnell als möglich die Einwirkung des kaustischen Kali zu beseitigen. Darauf breitet man die Lamellen in einem Tropfen Wassers oder sehr verdünnten Glycerins mit Zusatz von .-> XVIII, 1. Referate. 65 etwas Thymol auf dem Objectträger aus. Es erscheinen jetzt die Zellkerne dunkelrotli , das Protoplasma rosa , die elastischen Fasern dunkelblau auf dem im allgemeinen weissen oder leicht röthlichen Grunde. Dieser Gegensatz von roth und blau erleichtert die mikro- skopische Untersuchung sehr, auch in den Fällen, wo sich die ela- stische Substanz in Form von äusserst feinen Fibrillen oder von kaum wahrnehmbaren Körnchen vorfindet. Bei dieser modificirten Methode kann die Differenzirung auch mittels 25procentiger Salpeter- säure statt des kaustischen Kali ausgeführt werden. Man erhält sehr elegante und lehrreiche Präparate, welche aber etwas weniger stark gefärbt sind. — Um zu controlliren , dass die hier blau ge- färbten Elemente auch wirklich elastische seien, hat Verf. die Me- thode bei bekannten Organen von erwachsenen Thieren geprüft und vollkommen identische Bilder erhalten. Leider ist die Färbung da- bei nicht immer gelungen. Als Ursachen hierfür sieht Verf. an, einmal , dass die Qualität des Fuchsins nicht immer die gleiche ist, obgleich es derselben Fabrik entnommen wird , und dann, dass die Salpetersäure mitunter nicht rein genug war. Letztere muss chemisch rein sein oder wenigstens keine salpetrige Säure enthalten. — So vollkommen diese Methode auch war, so ist sie doch nicht genügend, um alle Fragen aufzuklären. Er hat aus diesem Grunde auch andere Metboden angewendet, z. B. die von Wolters (Vanadium- chlorid und essigsaure Thonerde; Färbung mit Hämatoxylin nach Kultschitzky, Differenzirung mittels Eisenchlorid und WEiGERT'scher Borax-Blutlaugensalzlösung). Er fand diese Methode für bestimmte Zwecke sehr brauchbar, weniger zur electiven Faserfärbung als zur Demonstration des Zusammenhanges , der zwischen den elastischen Fasern und den Bindegewebsfasern existirt , da die letzteren bei dieser Methode sehr gut hervortreten. Brauchbar ist sie ferner zum Studium der Zellelemente und aller bei diesen sich vorfindenden Veränderungen'. Für diese letztere Untersuchung kann man auch die Amnionmembran mit der folgenden, frisch bereiteten Mischung fixiren : Kupferacetat, gesättigte wässerige Lösung . . 4 Th. Osmiuimäure, einprocentige Lösung 1 „ Fixirungsdauer 3 bis 4 Stunden ; dann Behandlung des Gewebes mit Gallussäure. Diese Fixirungsmethode erhält einmal die Gewebs- structur intact und dient zugleich als eine gute Beize, ohne die Mem- bran schrumpfen zu lassen (was bei anderen osmiumhaltigen Fixirungsflüssigkeiten der Fall ist). Schiefferdecker (Bonn . Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 1. 5 66 Referate. XVIII, 1. Sclioonlieid, P. H., Zur Histopathologie des Lupus ery- thematodes und der elastischen Fasern (Arch. f. Dermatol. u. Syphilis Bd. LIV, H. 23, 1900, p. 163 — 192 m. 2 Tflu.). Aus der vorliegenden Arbeit ist für unsere Zwecke das Folgende zu entnehmen: In einer Bemerkung sagt Verf., dass man bei der WEiGERT'schen Färbung der elastischen Fasern nicht nur, wie Weigert angiebt, Carminfarbstoffe zur Contrastfärbung verwenden kann, son- dern dass auch Methylenblau oder polychromes Methylenblau dazu ausgezeichnet brauchbar sei. Wie er bemerkt, habe er bei solchen deutlichen Bildern nicht selten elastische Fasern mit ihren feinsten Ausläufern auch zwischen die Epithelzellen der Epidermis eindringen gesehen. Ferner macht er die Angabe, dass in den Präparaten nach FLEMMixo'scher Mischung Fasern durch Safranin roth gefärbt wurden, welche man in Analogie zu Stücken, die nach anderen Methoden tingirt waren, als elastische Fasern deuten musste. Eine Färbung von elastischen Fasern mit Safranin ist von Martinotti angegeben, doch fixirt dieser das Gewebe vorher in einer - 2procentigen Chrom- säurelösung und färbt 48 Stunden lang in Safranin. Verf. hat die gewöhnliche Methode der Kernfärbung mit Safranin angewendet. Es wird hinzugefügt, dass bei den Präparaten von Lupus erythematodes das Stratum granulosum der Epidermis besonders bei Färbung mit polychromem Methylenblau oder mit Kresyl - Echtviolett sehr schön hervortrat. Schiefferdecker (Bomn. Kickenbacher, 0., Untersuchungen über die embryonale Membrana tectoria des Meerschweinchens ( Anat. Hefte, H. 51, 1901, p. 383—413 m. 8 Tfln.). Die Untersuchung wurde an Meerschweinchenembryonen , neu- geborenen und ausgewachsenen Meerschweinchen ausgeführt. Zur Fixirung wurde die ZenkerscIic Flüssigkeit verwendet. Die Köpfe der Embryonen wurden in diese in toto gebracht, während bei den Neugeborenen und Erwachsenen die Schnecke freipräparirt wurde. Noch besser ist es , die Schnecke in physiologischer Kochsalzlösung sorgfältig an ihrer Spitze zu öffnen. Das Verfahren bei der Fixirung war das Folgende: Die Objccte kamen noch lebenswarm in das mindestens 20fache Volumen ZENKER'scher Lösung und verblieben darin bis zu 48 Stunden. Dann 2tägiges Auswaschen in fliessendem Wasser, darauf je ein Tag in 50-, 70-, 96procentigem Alkohol. Prä- parate, bei denen schon Verknöcherung aufgetreten war, wurden, XVIII, 1. Referate. 67 bevor Verf. sie in Alkohol brachte, in Öprocentiger wässeriger Sal- petersäure entkalkt. Es folgte Auswaschen in fliessendem Wasser, bis blaues Lakmuspapier nicht mehr gerottet wird , und wieder steigender Alkohol. Dem Alkohol von 50 Procent wurden bisweilen einige Tropfen Jodtinctur zugefügt, um das spätere Auftreten von Quecksilberniederschlägen zu vermeiden. Aus dem absoluten Alkohol kamen die Objecte für einen Tag in ein Gemisch von gleichen Theilen von Alkohol und Aether , 2 bis 3 Tage in dünnes, und ebenso lange in dickes Celloi'din. Gefärbt wurde mit Hämatoxylin und Eosin. Schiefferdeeker (Bonn). Sata, A. , Ueber das Vorkommen von Fett in patho- logischem Gewebe. Eine Untersuchung mit Sudan III (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXVIII, 1900, H. 3, p. 461 — 478 m. 1 TA.). Unsere bisherigen Methoden der Fettuntersuchung sind mehr- fach unzuverlässig. Sudan III ist auch noch kein vollkommenes Reagens für den Nachweis des gesammten Gewebsfettes, doch ist es bis jetzt das beste Mittel unter den diesbezüglichen Reagentien. Wie Riedek und Handwerk gezeigt haben , färbt Sudan III nur Olein und Oelsäure, nicht aber Palmitin- und Stearinsäure. Anderseits ist aber nicht zu befürchten , dass das Reagens andere Bestandteile ausser Fett färben könnte, wie es bei Osmiumsäure vorzukommen scheint. Ausserdem ist die Färbung sehr einfach und in kurzer Zeit ausführbar. Sudan III wird in gesättigter Lösung in 96procentigem Alkohol verwendet. Wasser darf man dieser Lösung nicht zusetzen, weil sonst der Farbstoff sich niederschlägt und Krystalle bildet. Das Gewebsstück wurde stets in Formollösung üxirt und nach der Abspülung in Wasser direct auf dem Gefriermikrotom geschnitten, um der Alkohol- und Aetheranwendung möglichst auszuweichen. Die Schnitte wurden zunächst einige Minuten in Alkohol gelegt, um das Wasser zu entfernen, dann direct in Sudanlösung. Trotzdem bilden sich mit der Zeit Krystalle, welche sich auf den einzelnen Schnitten anhäufen, weil das mit dem Schnitt übertragene Wasser durch die genannte Behandlung nicht immer absolut entfernt werden kann. Man muss daher die Lösung oft frisch herstellen und wechseln. Das Hervortreten des durch Sudan gefärbten Fettes hängt oft von der Dicke der Schnitte ab, wie man das deutlich bei den auf das Deckglas gestrichenen Fettschichten beobachten kann. Bei dünneren Schnitten sieht man feine Fettkörnchen im Zellprotoplasma nur be' gg Referate. XVIII, 1. Anwendung starker Linsen, während bei etwas dickeren Schnitten solche Körnchen schon bei schwacher mikroskopischer Vergrösserung auffallen. In Folge dessen kann man sehr leicht das in massiger Menge vorhandene Fett übersehen, wenn man nur die dünnen Schnitte untersucht. Man muss daher bei Sudanfärbung dünne und dicke Schnitte anfertigen und beide mit einander vergleichen. Zur Kern- färbung kann man am besten eine Hämatoxylinfärbung mit der von Sudan verbinden. Man färbt die Schnitte erst mit Hämatoxylin, legt sie in Wasser und wendet dann die eben angegebene Methode an. Es wird indessen das durch Sudan gefärbte Fett durch das Hämatoxylin mehr oder weniger verdeckt, so dass nur in geringer Menge vorhandenes Fett an solchen Schnitten schwer bemerkt wird. Verf. hat daher die Schnitte immer theils mit Hämatoxylin und Su- dan III, theils nur mit dem letzteren gefärbt und dann die beiden Präparate verglichen. Eingeschlossen wurde in Glycerin. Um die sonstigen histologischen Veränderungen zu beobachten, wurde mit Hämatoxylin- Eosin gefärbt. Schiefferdccker {Bonn). Poljakoff, P. , Biologie der Zelle. Zur Frage von der Entstehung, dem Bau und der Lebensthätig- keit des Blutes (Arch. f. Anat. u. Physiol., Anat. Abth., 1901, H. 1, p. 1—46 m. 2 Tfln.). Verf. theilt mit, dass er bei seinen Forschungen nach dem Entstehungsvorgang des Bindegewebes, die er 1894 nach der von ihm veränderten ZiEGLER'schen Methode in künstlichen Glaskammern ausführte, 1 zufällig auf Erscheinungen gestossen sei, die ihm Vieles in Bezug auf die Frage über die Entstehung, den Bau und die Lebensthätigkeit des Blutes erklärten. Die Untersuchung wurde in folgender Weise ausgeführt : Vorher gereinigte und erhitzte Deck- gläschen wurden paarweise an den Ecken mit Siegellack zusammen- gekittet, sodass sich zwischen ihnen ein capillärer Spaltraum bildete. Diese Deckgläser wurden mit sterilisirter physiologischer Kochsalz- lösung gefüllt und dann entweder unter die Haut oder in die Bauch- höhle von Meerschweinchen eingeführt. Die Operation wurde streng aseptisch und ohne Blutung ausgeführt. Die Gläschen wurden nach 12 Stunden bis .3 Wochen entfernt und sofort in eine 3procentige Osmiumsäurelösung gebracht. In dieser wurden die paarigen Gläschen schnell mittels Nadeln von einander getrennt, damit die Osmiumsäure J ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XIII, 1896, p. 07. XVIII, 1. Referate. 69 gleichmässig auf alle darin befindlichen Elemente einwirken konnte. Nach einer halben bis 2 Minuten kamen die Präparate in eine ein- procentige Pikrocarminlösung (zubereitet nach der Methode des Verf.). In anderen Fällen wurden die Glaskammern nach der Entfernung aus 'den Thieren in eine Mischung von gleichen Theilen O'öpro- centiger Osmiumsäurelösung und einprocentiger Pikrocarminlösung für 24 Stunden gebracht. Dann rasches Abwaschen der Gläschen in destillirtem Wasser, Entfernung von etwaigen Ablagerungen neuer Gewebe von der äusseren Oberfläche , Auflegen mit der inneren Seite, an der die gewünschten Gewebselemente hafteten , auf einen auf dem Objectträger befindlichen , zum dritten Theil mit leicht an- gesäuertem Wasser verdünnten Glycerintropfen. Jetzt kann das Präparat untersucht werden , bleibt aber , um deutlichere Bilder zu geben, am besten 24 Stunden liegen. Verf. räth nach seinen Er- fahrungen entschieden, die Objecte weder auf kaltem, noch auf heissem Wege zu verkitten, da Wärme und Alkohol eine Veränderung der Gewebszellen hervorrufen. Schiefferdecker (Bonn). Willebrand , E. A. V. , Eine Methode für gleichzeitige Combinationsfärbung von B l u 1 1 r o c k e n p r ä p a - raten mit Eosin und Methylenblau (Deutsche Med. Wochenschr. 1901, No. 4, p. 57—58). v. Willebrand hat , von der Beobachtung ausgehend , dass in einem Eosin-Methylenblaugemisch durch Zusatz von Alkali die blaue, durch Zusatz von Säure die rothe Farbe die Oberhand gewinnt, fol- gendes Verfahren ausgearbeitet. Zu einer Mischung von 0'5 Procent Eosin in verdünntem Alkohol (TOprocentig) mit concentrirter wässe- riger Lösung von Methylenblau a~ä, welche für gewöhnlich diffus blau färbt, wird solange einprocentige Essigsäure tropfenweise zugesetzt, bis sich das Eosin genügend geltend macht (meist 10 bis 15 Tropfen auf 50 cc Flüssigkeit). Blutpräparate werden in trockener Hitze, in ab- solutem Alkohol oder einprocentigem Formolalkohol fixirt und mit der filtrirten Farblösung 5 bis 10 Minuten unter Erwärmung bis zur Dampfbildung gefärbt, mit Wasser abgespült ohne Entfärbung. Es sind dann Erythrocyten roth , Kerne scharf dunkelblau, neutrophile Granula violett, acidophile roth, Granula der Mastzellen intensiv blau. [Wohl auch für Bacterienpräparate verwendbar. Ref.] Cxaplewski (Köln). 7() Referate. XVIII, 1. Edingtoii, A. , Eine einfache Methode zur Fixirung von Blutpräparaten (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Bd. XXVIII, 1900, No. 10, 11, p. 316). Edington fixirt Blutpräparate in folgender Weise. Dünne aus- gestrichene Blutpräparate, welche ganz trocken sein müssen, werden auf eine Glasplatte gelegt ; darüber wird eine Glocke gestülpt, welche aus einer Flasche besteht, deren Boden abgeschnitten ist (Durch- messer 135 mm; Höhe bis zum Flaschenhals 150 mm). Die Flasche ist mit einem Gummistöpsel verschlossen, auf dessen unteres Ende ein gewöhnliches Deckgläschen gekittet ist, auf welches zum Versuch ein Tropfen Formalin kommt. Die Deckgläschen bleiben in den so entwickelten Formalindämpfen 15 Minuten oder länger. Czaplewski {Köln). Grüliberg, C, Beiträge zur vergleichenden Morpho- logie der Leukocyten (Virchow's Arch. Bd. CLXIII, H. 2, 1901, p. 303—342 m. 1 TU.). Es kam dem Verf. bei seinen Untersuchungen darauf an , eine allgemeine Uebersicht zu gewinnen über das Vorkommen, die Ver- breitung und die morphologische Beschaffenheit der sogenannten speei- fischen Granulationen im Blute der verschiedenen grossen Klassen der Wirbelthiere. Für die Darstellung der Granula liefert nach Verf. die EHiiLicii'sche Deckglasmethode die besten Resultate. Wo es sich um genaue Darstellung anderer morphologischer Details, Form, Grösse , feinere Kernstructur der Zelle handelt , ist sie allerdings nicht zuverlässig. Selbst bei noch so sorgfältigem Ausstreichen des Blutes sind Zerrungen und damit künstliche Formveränderungen namentlich bei den sehr grossen und leichtveränderlichen Leukocyten mancher Amphibien nicht immer zu vermeiden. Auch breiten sich die Zellen je nach ihrem Flüssigkeitsgehalt, nach der Schichtdicke des ausgestrichenen Blutes verschieden weit auf dem Deckglase aus, und es können leicht Täuschungen über ihre Grössenverhältnisse ent- stehen. Verf. hat daher auch keine absoluten Grössenmaasse an- gegeben, sondern sich auf relative beschränkt, indem er stets mög- lichst gleich beschaffene Stellen desselben Präparats zum Vergleich benutzte. Da auf die Färbung der Granula weniger die Dauer als der Grad der Erhitzung von Einfluss ist, so hat er, um möglichst übereinstimmende Resultate zu erhalten, stets den gleichen Hitzegrad angewandt und im allgemeinen eine bis 2 Stunden lang auf etwa 1 10° erwärmt. Was die Färbung anlangt, so verweist Verf. einmal XVIII, 1. Referate. 71 auf eine Arbeit von Hirschfeld. 1 Ferner bat er sehr häufig die von L. Michaelis angegebene Methode mit Eosin - Methylenblau- gemisch benutzt. Der speeifischen Granulafärbung hat er meist eine einfache Doppelfärbung mit sauerem Hämatoxylin (Ehrlich) und Eosin vorausgeschickt, die sich besonders gut zum Studium der Leukocyten und ihrer Kerne eignet. Schiefferdecker (Bonn). Beard, J., T b e source o f leucocytes and t h e true f u u c - tion of the thymus (Anat, Anz. Bd. XVIII, 1900, No. 22, 23, p. 550— 5G0). Verf. bat an Scyllium und Raja untersucht. Zu den neuesten Untersuchungen wurden Embryonen des letzteren Thieres von 18 bis (3 mm Länge verwendet. Die besten Präparate ergab Härtung der Embryonen mit Rabl's Pikrinsäure -Platinchloridmischung oder mit Sublimat. Osmiumsäure erwies sich in keiner Form als brauch- bar, weder für die Thymusentwicklung noch für das Studium der Leukocyten. Die beste Färbung lieferte Pikrocarmin. Auch Hämat- oxylin ergab recht gute Bilder, doch war diese Methode nicht pra- ktisch, um die Leukocyten zu erkennen. Bei Pikrocarminfärbung er- scheinen die rothen Blutkörperchen gelb, und an Pikrinsäure- Platin- chloridpräparaten sind ihre Kerne ungefärbt. Die Leukocyten treten überall, wo sie sich auch befinden mögen, sehr deutlich und charakte- ristisch gefärbt hervor , die Kerne glänzend roth und der kleine Protoplasmakörper braungelb. In Präparaten von embryonalem Blute, welche mit Pikrocarmin gefärbt sind, ist es sehr leicht, die Leuko- cyten aufzufinden, selbst mit schwachen Vergrösserungen. Auch im Mesoderm ist es schwer, sie zu übersehen. Schiefferdecker {Bonn). Retterer, E., Evolution du cartilage transitoire (Journ. de l'Anat. et de la Physiol. t. XXXVI, 1900, no. 5, av. 3 plches.). Bei Untersuchungen über die Entwicklung der Skeletttheile und über die Gelenkhöhlen ist es dem Verf. zufällig geglückt, ganz neu- gebildete Knochenlamellen mit dem Rasirmesser zu schneiden, ohne dass die Präparate vorher entkalkt waren. Diese Beobachtung hat ihn bewogen, junge Skeletttheile, welche im Ossificationsprocess be- x ) Hirschfeld, H., Beiträge zur vergleichenden Morphologie der Leuko- cyten (Inaug.-Diss., Berlin 1887 u. Virchow's Aren. Bd. CXL1X, p. 22). 72 Referate. XVIII, 1. griffen waren , mit denjenigen Fixirungs- und Färbungsmethoden zu behandeln , die fdr weiche Gewebe gute Bilder ergeben haben. Er hat diese Methode angewandt auf Skeletttheile der Extremi- täten von Kaninchenenibryonen von 5 bis 7 cm Länge , von Meer- schweinclienenibryonen von 4*5 und 6 cm und von Pferdeembryonen von 15 bis 20 cm Länge. Fixirt wurde in FLEMMiNG'scher Mischung, in concentrirter wässeriger Sublimatlösung oder ZENKER'scher Flüssig- keit. Nachdem die Stücke ausgewaschen und mit steigendem Alko- hol behandelt sind, werden sie aufgehellt, in Paraffin eingeschlossen, geschnitten etc. Wenn man solche Präparate mit den nach den bisherigen klassischen Methoden erhaltenen vergleicht (also nach längerer Maceration in MüLLER'scher Flüssigkeit, in Pikrinsäure oder Chromsäurelösungen) , so ist man überrascht durch das ganz andere Aussehen, welches die Zellelemente der verschiedenen Knorpelzonen darbieten. Die länger dauernde Maceration in den genannten Flüs- sigkeiten oder in Salzsäure , Pikrinsäure etc. verändert den Kern und einen Theil des Zellprotoplasmas. Man hat es nicht mit einer in Folge der Weiterentwicklung eintretenden Degeneration , sondern mit Veränderungen zu thun, welche durch die angewandten Flüssig- keiten herbeigeführt sind. Um zu untersuchen, ob die enchondrale Ossifikation nach der Geburt sich in derselben Weise vollzieht wie vor der Geburt , hat Verf. seine Versuche auch auf junge Säuge- thiere ausgedehnt. Die besten Studienobjecte hierfür sind die Rip- pen und die Scapula junger Meerschweinchen , Kaninchen , Hunde und Katzen. Er hat die Rippen dieser Thiere ohne vorhergehende Entkalkung von der Geburt an bis zum 20. oder 30. Tage schneiden können. Ausser den schon angeführten Fixationsflüssigkeiten em- pfiehlt er eine wässerige Lösung von Platinchlorid 1 : 300 und be- sonders die folgenden Mischungen : Mischung A: Chromsäure, 3procentige Lösung. . . 6G Voll. Formol 33 „ Essigsäure 8 „ Mischung B: Platinchlorid, öprocentige Lösung . . 50 Voll. Forniol 50 „ Essigsäure 3 „ Verf. bringt die frischen Objecto (Rippenknorpel von jungen Meerschweinchen, Kaninchen oder Katzen) in die eine oder andere dieser beiden Mischungen, in der sie nicht länger als 6 bis 12 Stun- den verbleiben , um eine längere Maceration zu vermeiden. Nach dieser Zeit werden sie ausgewaschen , in Alkohol entwässert und XVIII, 1. Referate. 73 dann aufgehellt, Serienschnitte in Paraffin, Färbung mit Eisenhämat- oxylin, darauf Säurefuchsin und durch Pikrinsäure schwach gefärbter Alkohol. Statt des Säurefuchsins kann man auch Bordeauxroth R verwenden. Verf. empfiehlt, Schnitte senkrecht zur Achse oder leicht schräg zur Achse anzufertigen. Sckiefferdecker {Bonn). Sclimoii, G., Darstellung feinerer Knochenstructuren (Centralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. X, 1899, No. 19, 20, p. 745 — 749). Verf. hebt hervor , dass ein Verfahren , nach welchem die Knochenkörperchen und ihre Ausläufer mit möglichster Schonung der zelligen Elemente an Schnitten entkalkten Knochens durch Färbung darzustellen seien, bisher nicht bekannt ist. Er theilt zu diesem Zweck die folgenden Methoden mit : 1 ) Darstellung der Knochenlacunen und ihrer Ausläufer mittels T h i o n i n - P i k r i n f ä r b u n g. Keine eigent- liche Färbung , sondern Bildung eines sehr feinkörnigen Farbstoff- niederschlages. Das Verfahren gelingt bei fast sämmtlichen Härtungs- und Fixirungsmethoden mit Ausnahme von Sublimat. Besonders gute Resultate nach MüLLEit'scher Flüssigkeit oder Formalin oder MüL- LER'scher Flüssigkeit -Formol nach Orth. Entkalkung nach einer der gebräuchlichen Methoden, am besten nach der v. EBXER'schen (alkoholische Salzsäure -Kochsalzlösung), wenn dieselbe bei Präpa- raten, die in Forniol- Müller fixirt und längere Zeit in MüLLER'scher Flüssigkeit gehärtet waren , angewandt wird , sonst auch bei der Entkalkung nach Thoma oder in Formalin -Salpetersäure (Formalin 100 cc, Salpetersäure 20 cc) oder in MüLLER'scher Flüssigkeit -Sal- petersäure (100:3); Einbettung nur in Celloidin. Gefärbt wird mit einer wässerigen Thioninlösung (von einer concentrirten Lösung in ÖOprocentigem Alkohol werden 2 cc zu 10 cc Wasser gesetzt). To- luidinblau vermag das Thionin nicht zu ersetzen ; oder auch die länger haltbare NicOLLE'sche Carbol - Thioninlösung (Carbolwasser, einprocentig 90, concentrirte Thioninlösung in öOprocentigem Alko- hol 10). Die Schnitte kommen zunächst aus dem Alkohol in Wasser (mindestens 10 Minuten), dann Farblösung. (Sie müssen gut aus- gebreitet werden und dürfen auch nirgends auf einander liegen.) In der Farblösung können die Präparate beliebig lange bleiben ohne überfärbt zu werden. Genügende Färbung schon nach 5 bis 10 Minuten. Abspülen der tiefblau gefärbten Schnitte in Wasser, dann Uebertragen in eine heiss gesättigte nach dem Erkalten liltrirte w ; 's 74 Referate. XVIII, 1. serige Lösung von Pikrinsäure (30 bis 60 Secunden). Längeres Verweilen schadet nicht , wirkt aber insofern mitunter störend , als eine zu intensive Färbung der Knochengrundsubstanz herbeigeführt wird, die sich allerdings durch Auswaschen in Alkohol leicht be- seitigen lässt. Abspülen der Schnitte in Wasser, Uebertragen in TOprocentigen Alkohol (hierin so lange , bis beim Hin- und Her- bewegen der Schnitte keine gröberen, blaugrünen Farbstoffwolken mehr abgehen. Meist genügen 5 bis 10 Minuten , doch wird durch längere Einwirkung das Bild häufig reiner und klarer). Dann 96pro- centiger Alkohol, in dem sich meist wieder stärkere Farbstoffwolken ablösen. Origanumöl oder Carbol-Xylol, Balsam. Es erscheinen: Knochensubstanz gelb bis gelbbraun, Knochenhöhlen mit Ausläufern dunkelbraun bis schwarz, Zellen roth , Fettzellen (nach Härtung in MttLLER'scher Flüssigkeit) rothviolett. Differenzirung der kalkhaltigen und kalklosen Knochensubstanz , erstere intensiver gelb als letztere. Während ferner in der ersteren die Knochenhöhlen mit ihren Aus- läufern scharf gefärbt hervortreten, sind sie in letzterer ungefärbt. Nur bei Verwendung alkalischer Thioninlösung kann man sie auch in den kalklosen Parthien darstellen. Mit dieser Methode hat Verf. in den meisten von ihm untersuchten Knochen die Knochenhöhlen und ihre Ausläufer gut und sicher darstellen können. Bei einigen Misserfolgen ist er dadurch zum Ziel gekommen, dass er die Thionin- lösung alkalisch machte, indem er zu 10 cc Farblösung einen bis 2 Tropfen Ammoniak setzte. Diese alkalische Farblösung hat aber manche Uebelstände, daher empfiehlt Verf. sie nicht zur allgemeinen Anwendung. Da es sich bei der Methode um einen feinen Farb- stoffniederschlag handelt, so werden die Bilder oft auch an anderen Theilen durch einen solchen unklar, ähnlich wie bei der Golgi- schen. Es gelingt zwar, die Bildung dieser Niederschläge am un- rechten Orte einzuschränken, doch leidet dabei stets die Färbung der Primitivröhrehen mehr oder weniger. Am schonendsten ist noch das folgende Verfahren, wodurch freilich nur ein Theil des Nieder- schlages beseitigt wird : Die Schnitte kommen, nachdem sie nach der Thionin - Pikrinbehandlung differenzirt sind , in Wasser zurück und bleiben hier etwa eine halbe Stunde liegen. Dadurch wird die Pikrin- säure fast ganz ausgezogen, wobei zugleich ein Theil der Nieder- schläge entfernt wird. Dann starker Alkohol, Balsam. Die Knochen- höhlen mit ihren Ausläufern sind jetzt braunroth bis roth und heben sich von der Knochengrundsubstanz, die je nach der angewandten Härtungs- und Entkalkungsmethode himmelblau bis graublau (bei XVIII, 1. Referate. 75 Härtung- in MüLLER'scher Flüssigkeit) oder farblos (Formalinhärtnng, Entkalkung in Salpetersäure) ist, scharf ab. Da in solchen Präpa- raten die zelligen Elemente oft wenig scharf hervortreten, empfiehlt es sich, mit der Thionin-Pikrinfärbung eine Kernfärbimg zu combiniren; am geeignetsten ist Hämatoxylin nach Delafield, nach oder vor Thio- nin-Pikrinsäurebehandlung. (Da die Pikrinsäure entfärbend auf das Hämatoxylin wirkt, rnuss man in letzterem Falle etwas überfärben.) Diese Methode eignet sich auch zur Darstellung der Zahnbeinkanälehen. 2) Färbemethode zur Darstellung der Grenz- scheide der Kno ch enlacunen und ihrer Ausläufer. Färbung mit Thionin , Differenziren mit Phosphorwolframsäure oder Phosphormolybdänsäure. Härtung in MüLLER'scher Flüssigkeit oder in Formol -Müller mit längerer Nachhärtung in MüLLER'scher Flüssig- keit. Man darf nur dünne Knochenscheiben zur Fixirung verwenden. Gute Resultate wurden nur bei Kinderknochen erzielt, aber auch hier versagte die Methode mitunter, ohne dass Verf. einen Grund dafür finden konnte. Die Kuochenscheiben blieben meistens 6 bis 8 Wochen in MüLLER'scher Flüssigkeit. Im Brütapparat genügen 3 bis 4 Wochen, dann Abspülen der Präparate in Wasser, Entkalkung in der alkoho- lischen Salzsäure -Kochsalzlösung nach von Ebner, Auswaschen in fliessendem Wasser. Nachhärtung in Alkohol, Celloidin. Die Schnitte müssen möglichst dünn sein. Man kann die NicoLLE'sche Carbol- Thioninlösung verwenden (10 Minuten) , doch sind die Resultate sicherer bei der oben angegebenen alkalischen Thioninlösung (3 Mi- nuten). Bei dieser tritt allerdings leicht eine Ueberfärbung der Grund Substanz des Knochens ein. Differenzirung in concentrirter wässeriger Lösung von Phosphorwolframsäure oder Phosphormolybdän- säure, in welche man die Schnitte mit Glasnadeln überträgt. Es tritt ziemlich rasch ein blaugrauer oder blaugrüner Farbenton auf. Die Differenzirung ist in wenigen Secunden vollendet, doch schadet längeres Verweilen in der Lösung nichts. Dann üebertragen im AVasser bis die Schnitte eine himmelblaue Farbe angenommen haben (ungefähr 5 bis 10 Minutenj. Die Grenzscheiden sind blau bis schwarz gefärbt und heben sich scharf von der farblosen oder blassblau ge- färbten Knochengrundsubstanz ab; Zellen blau. Um die Färbung der Grenzscheiden (empfindlich gegen Alkohol; zu fixiren , kommen die Schnitte in eine verdünnte wässerige Lösung von Ammoniak (1 : 10 für 3 bis 5 Minuten), dann direct in 90procentigen Alkohol, den man zur gründlichen Entfernung des Ammoniaks mehrfach wechselt, 96procentiger Alkohol, Carbol - Xylol, Balsam. Sollte die Grundsub- 70 Referate. XVIII, 1. stanz des Knochens zu intensiv gefärbt sein, so behandelt man die Schnitte vor der Entwässerung mit Salzsäurealkohol (5 Minuten) und wäscht in Wasser aus. Die Grenzscheiden sind schwarzblau, die Grundsubstanz des Knochens hellblau oder grünlichblau, Zellen diffus blau. Bei rhachitischen Knochen sind die Grenzscheiden nur bei den- jenigen Knochenparthien gefärbt, die vor der Entkalkung kalkhaltig waren. Schiefferdecker (Bonn). Kurpjuweit, Ent zun Jungs versuche am Knochen (Vir- chow's Arch. Bd. CLXIII , H. 2, 1901, p. 287—802 m. 1 Tfl.). Um die active oder passive Rolle , welche die Knochenzellen bei der Entzündung spielen , selbständig zu prüfen , hat Verf. Ent- zündungsvprsuche am Knochen gemacht. Die Experimente wurden an 27 Ratten- und Kaninchenknochen in der Weise ausgeführt, dass nach Spaltung der Hautdecke das Periost von Tibia oder Humerus bei Seite geschoben und der freigelegte Knochen mit dem Paquelin oder dem Höllensteinstift verschorft wurde. Die Cauterisation mit dem Paquelin erwies sich als zu intensiv und wurde alsbald aufgegeben. Die aseptische Wunde wurde mit Nähten geschlossen, nach ver- schiedenen Zeiten die Thiere getödtet, die Wunde freigelegt und der angeätzte Knochen, welcher für das blosse Auge oft keine Verände- rungen zeigte, in FLEMMiNG'sche Lösung gebracht (2- bis 3mal 24 Stunden), und 24 Stunden entwässert. Entkalkung mit v. Ebner- scher Flüssigkeit, bei der der Säuregehalt auf 5 bis 10 Procent gesteigert wurde unter entsprechender Vermehrung des Kochsalz- gehaltes. Nach Auswässerung und nach Härtung in 96procentigem Alkohol Einbettung in Celloidin. Sublimat wurde zur Fixirung nur in geringerem Umfange verwendet, da es keine so guten Resultate ergab wie die FLEMMixo'sche Flüssigkeit. Zur Färbung der Flem- Mi\<;-Pr:i parate diente Safranin. Die Schnitte blieben in der unver- dünnten, einprocentigen Lösung 24 Stunden , dann Differenzirung in O'öprocentigem Salzsäurealkohol, Einschluss in (Janadabalsam. Die Sublimatpräparate wurden mit Hämatoxylin- Eosin gefärbt. Mittels dieses letzteren Verfahrens gelang es, gute Uebersichtsbilder über die Neubildung von Knochen zu erhalten. Der alte Knochen war bläulich, der neugebildete röthlich gefärbt und stets durch eine scharfe, blaue Grenzlinie von jenem getrennt. Auch die Kerne der Zellen im alten Knochen sind intensiv blau, die des neuen blass- röthlich. Schiefferdecker (Bonn). XVIII, 1. Referate. 77 Reerillk , H. , Experimente über Transplantation am Magen (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXVIII, 1900, H. 3, p. 524 — 540 m. 1 Tfl. u. 3 Figg.). Nachdem der Hund die Operation 4 Wochen überlebt hatte, wurde er getödtet , der Magen herausgenommen , am Duodenum ab- gebunden, mit 4procentiger Pormollösung gefüllt, dann auch oben abgebunden und in toto in Formol gelegt. Nach 24 Stunden wird das Formol durch Alkohol ersetzt. Schiefferdecker (Bonn). Srdiiiko, 0. V., Bau und Entwicklung der Nebenniere bei Ann reu (Anat, Anz. Bd. XVIII, 1900, No. 20, 21, p. 500—509). Verf. hat untersucht an Rana temporaria, R. esculenta, Bom- binator igneus, Bufo vulgaris und Hyla arborea. Er giebt die folgen- den verschiedenen Methoden an: 1) Die Nebenniere wird 3 Stunden lang in der Mischung von van Gehuchten fixirt. Dann steigender Alkohol bis zu absolutem. Färbung der Schnitte in folgender Mischung: Hämatoxylin (krystallisirt), öprocentige Lösung . . . 100 Th. Kaliumhypermanganat, einprocentige Lösung ... 5 „ während 2 Stunden. Entfärbung in einproeentiger Eisenalaunlösung. Die so erhaltenen Präparate zeigen die verschiedenen Zellen der Nebenniere deutlich verschieden gefärbt. 2) Die Nebennieren kom- men für 4 bis 7 Tage in MüLLEß'sche Flüssigkeit, Weiterhärtung in Alkohol. An den Präparaten sieht man braungefärbte Zellen (Kalium- bichromat), welche keinen anderen Farbstoff aufnehmen, und andere nicht braun gefärbte, welche sich färben lassen. Verf. bemerkt hierzu , dass auch die Erythrocyten sich nach Kaliumbichromat in ähnlicher Weise wie die Markelemente der Nebenniere verhalten. 3) Fixirung in halbprocentiger FLEMMiNG'scher Lösung für 2 bis 6 Stunden. Die Präparate zeigen zweierlei Zellen, von denen die einen sich in Folge der Osmiumsäurewirkung schwarz gefärbt haben, da sie fetthaltig sind, während die anderen fettfreien ungefärbt bleiben. 4) Von der in Sublimat oder in Alkohol fixirten Nebenniere angefer- tigte Schnitte werden in der von Merkel angegebenen Mischung x gefärbt und in einer öprocentigen Lösung von Salpetersäure entfärbt. Dann Auswachsen der Schnitte in absolutem Alkohol , Einschluss in Canadabalsam. Statt der Salpetersäure kann auch wässerige Oxal- J ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. II, 1885, p. 350. 78 Referate. XVIII, 1. säurelösung benutzt werden. Es zeigt sich eine Differenz zwischen den Zellelemeuten : die Mehrzahl der Zellen ist blau gefärbt (Proto- plasma deutlich blau, der Kern blau oder blauroth), eine geringere Anzahl von Zellen erscheint im ganzen (Protoplasma und Kern) roth- gefärbt. Bei allen diesen Färbungen finden sich Uebergangsformen. Schiefferdecker {Bonn). Nicolas, Recherches sur l'embryologie des Reptile s. I. C o n t r i b u t i o n ä 1' e t u d e de 1 a fecondation chez l'orvet (Arch. d'Anat. Microsc. t. III, 1900, fasc. 4, p. 457 — 489 av. 1 piche,). Die Eier wurden durch Zerreissung der Wand des Eileiters mittels Pincetten aus diesem genommen und zum Theil mit Formol- Pikrinsäure-Essigsäure (nacli Bouin) zum Theil in alkoholischer Subli- matlösung mit Zusatz von Essigsäure (nach Lenhossek) fixirt. Leider wirkte die letztere Flüssigkeit nicht so günstig, wie es zu erwarten gewesen wäre. Weder der Kern noch die Protoplasmastructuren waren gut erhalten, da Schrumpfungen und in Folge dessen theil- weise sehr ausgedehnte Deformation eingetreten waren. Dagegen er- gab das Formol-Pikrinsäure-Essigsäuregemisch sehr gute Resultate. Diese Flüssigkeit und die bekannte wässerige Sublimat-Eisessiglösung sind nach der Ansicht des Verf. am meisten zur Fixirung von um- fangreichen Eiern wie die der Blindschleiche geeignet. Nach hin- reichender Fixirung kamen die Eier in steigenden Alkohol bis zu 80°. In diesem wurde die Dotterhaut, welche das Ei umgiebt, vorsichtig zerrissen und mit einem Rasirmesser der animale Pol abgetragen. Wartet man hiermit zu lange, so kann namentlich bei Sublimatpräpa- raten zwischen dem Ei und seiner Umhüllungsmembran ein Coagulum sich bilden. Dieses ist zuerst locker und zerfällt von selbst, wenn man die Membran möglichst früh einreisst ; allmählich aber wird es härter und haftet der Oberfläche des Eies an. Liegt dies Coagulum gerade auf dem Keimhof, so verdeckt es natürlich in mehr oder weniger grosser Ausdehnung die hier vorhandenen Details, und man kann dann nur mit Hülfe eines Pinsels oder in ähnlicher Weise, was ja immer etwas gefährlich ist, diese verdeckende Masse ent- fernen. Dann wurde in toto in Boraxcarmin gefärbt und in Paraffin eingeschlossen, wobei Verf. sich nach den von Carnoy und Lebrun 1 *) Carnoy, J. B., et Lebrun, H., La vesicule gerininntive chez les Ba- traciens (La Cellule t. XII, fasc. 2, 1897, p. 213). XVIII, 1. Referate. 79 gegebenen Vorschriften gerichtet hat. Nach vorsichtiger Einbettimg lassen sich diese Eisegmente sehr gut schneiden. Nachdem Verf. die in solcher Weise hergestellten Schnitte untersucht hatte, hat er sich schliesslich noch dazu entschlossen, die Präparate wieder freizulegen und sie von neuem mit dem Eisenhämatoxylin von M. Heidenhain zu färben. Er war mit dem Erfolge dieser Färbung sehr zufrieden. Schieferdecker {Bonn). MaxilllOW, A. , Die ersten Entwicklungsstadien der Kan inch enp lac ent a (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LVI, 1900, p. 699—740 m. 2 Tibi.). Bei einem Theil der Eikammern unterband Verf. zunächst nach Eröffnung der Bauchhöhle das Mesometrium mit den darin verlaufen- den Gefässen, um die natürliche Füllung der Bluträume in der Pla- centa unverändert zu erhalten. Dann wurde noch von beiden Seiten der Eikammer das Uterushorn unterbunden, darauf die so abgebundene Eikammer herausgeschnitten und in die Fixirungsflüssigkeit gelegt. Nach 5 Minuten wurde mit dem Rasirmesser in den antimesometralen der Obplacenta entsprechenden Theil der Uteruswand ein Einschnitt gemacht , das angeschnittene Stück aufgebogen , um der Flüssigkeit freien Eintritt zu schaffen, und das ganze Stück wieder in die Fixi- rungsflüssigkeit zurückgelegt. Bei einem anderen Theile der Ei- kammern wurde nur das Mesometrium unterbunden, die Uteruswand an der antimesometralen Seite der Länge nach gespalten und das Präparat dann fixirt. Als Fixirungsflüssigkeit kam hauptsächlich warme (37° C.) ZENKER'sche Flüssigkeit zur Anwendung, ausserdem noch PoDWYSSOTZKY'sche Flüssigkeit (FLEMMiNG'sches Gemisch mit Zusatz von Sublimat). Im Alkohol wurden von den Präparaten alle beim Mikrotomiren störenden Theile, insbesondere die Muscularis, vor- sichtig entfernt. Die nach Paraffineinbettung hergestellten Schnitte wurden mit Safranin-Lichtgrün gefärbt. E. Schoebel (Neapel). Burckhard, G. , Die Implantation des Eies der Maus in die Uterusschleimhaut u n d die U m b i 1 d u n g der- selben zur Decidua (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LVII, 1901, p. 528—569 m. 4 Figg. u. 3 Tfln.). Unmittelbar nachdem das Thier getödtet war, wurde das Ab- domen geöffnet , die beiden Uterushörner demselben entnommen und lebenswarm in die Fixationsnüssigkeit gebracht. Als solche diente Pikrin- Sublimatlösung, Zenker'scIic Flüssigkeit und FLEMMiNG'sches 80 Referate. XVIII, 1. wie HERMANN'sches Gemisch. Nach einer 24stündigen Einwirkung des Fixativs wurden die Präparate mit Pikrinsublimat ohne vorheriges Auswässern , bei den übrigen nach gründlichem Auswaschen mit Al- kohol nachbehandelt und in Paraffin in gewöhnlicher Weise ein- gebettet. Gefärbt wurde mit Hämatoxylin und Eosin , nur das in Flemming's oder Hermann's Gemisch fixirte Material wurde mit Safranin oder Eisenhämatoxylin tingirt. Einige Objecte wurden auch vor der Einbettung in toto mit Boraxcarmin gefärbt. Die Färbung mit Hämatoxylin - Eosin hat vor der reinen Carmintinction den Vor- zug, die Unterschiede in den Geweben deutlicher hervorzuheben, vor allem lassen sich die Blutkörperchen besonders gut erkennen , da sich dieselben nach Fixation in Pikrinsublimat oder ZENKER'scher Flüssigkeit mit Eosin intensiv roth färben. Auch für andere Unter- scheidungen ist das Eosin von Vortheil, insofern als das Epithel einen anderen Farbton annimmt als die Decidua und man also im Stande ist, schon durch die Färbung auch kleinste R,este von Epithel, wie z. B. bei sich abschnürenden Drüsen leicht zu erkennen. E. Schoebel (Neapel). Aigner, A., Ueber das Epithel im Nebenhoden einiger S ä u g e t h i e r e und seine secretorische T h ä t i g - keit (Sitzber. d. k. k. Acad. d. Wiss. in Wien, Mathem. natwiss. Kl. Bd. CIX, Abth. 3, 1900). Es wurden die Nebenhoden von Affe , Pferd , Stier , Hund, Katze , Schafbock , Kaninchen , Ratte und Maus benutzt. Die von Stier , Pferd und Schafbock wurden aus dem Schlachthause lebens- warm mittels Thermophor bei constanter Temperatur von 37 ° C. befördert und gelangten etwa 3 / 4 Stunden nachher zur Untersuchung, während bei allen übrigen Thieren höchstens eine Zeit von 4 bis 5 Minuten bis zur Untersuchung verging. Es handelte sich darum, die Flimmerbewegung zu sehen. (Als indifferente Zusatzflüssigkeit zu den Zupfpräparaten wurde eine O"75procentige Kochsalzlösung oder Hühnereiweiss verwendet.) In einigen Fällen wurde auch der heizbare Objecttisch von M. Schultze benutzt. Fixirt wurde in ver- schiedenen Flüssigkeiten, in Sublimatgemischen, FLEMMiNG'scher Flüs- sigkeit, MüLLER'scher und ERLiTZKY'scher Flüssigkeit. Der letzteren wurde nach Empfehlung von Schaffer ein Procent Eisessig zugesetzt. Gefärbt wurde mit Safranin, Eisenhämatoxylin, Hämatoxylin Dela- Schiefferdecker {Bon.))). XVIII, 1. Referate. 81 Dawitlow, D., Die FLORENCE'sche Methode für den Nach- weis der Spermatozoon (Wratsch 1900, no. 16 [russisch]; vgl. Deutsche med. Wochenschr. 1900, No. 19, p. 110). Die bei Zusatz von Jod ausfallenden Krystalle lösen sieh in Folge der Verflüchtigung- des Jods sehr bald wieder auf und ver- schwinden. Verf. schlägt daher vor, die Probe in Capillarröhrchen vorzunehmen , in denen sich die Krystalle unbegrenzt lange unver- ändert erhalten und jeden Augenblick unter dem Mikroskop demon- strirt werden können. Wichtig ist die vom Verf. festgestellte That- sache , dass sich bei gleicher Behandlung ähnliche Krystalle auch aus den männlichen wie weiblichen Geschlechtsorganen der Pflanzen (Hyacinthen, Chrysanthemen, Cyclamen) niederschlagen lassen. — In einer späteren Arbeit führt Verf. aus, dass in Folge der angegebenen Thatsache bei Fehlen der Spermatozoen Flecke auf Wäsche, welche FLORExcE'sche Reaction geben, auch auf Wasserextracte mancher ge- wöhnlichen Blüten (Kamillen , Holländer etc.) zurückgeführt werden können 1 . Schiefferdecker (Boiui). Baffaele , Per 1 a g e n e s i d e i nervi da c a t e n e cellulari [Ueber die Entstehung der Nerven aus Zell- reihen] (Anat. Anz. Bd. XVIII, 1900, No. 15, 16, p. 337 m. 11 Figg.). Verf. hat die Nervenentwicklung an jungen Larven von Lophius studirt , welche theilweise im ganzen , theilweise auf Serienschnitteu untersucht wurden. Die zur Haut verlaufenden Nerven und der Nervus lateralis lassen sich hier sehr gut verfolgen (auch im frischen Zustande , mitunter sogar hier am besten) , da sie in einem sehr zellarmen Gewebe liegen. Gute Präparate wurden nach Fixirung in concentrirter Sublimatlösung (unter Umständen mit Zufügung von Essigsäure oder Essigsäure und Alkohol) und Nachfärbung mit dem Hämalaun von Mayek oder Säurefuchsin erhalten. Weitere Studien wurden bei Amphibienlarven ausgeführt. Bei solchen von 2 bis 3 Tagen gelang es nach Fixation der ganzen Larven leicht hinreichend grosse Epidermisstücke durch Zerzupfuug zu isoliren , denen noch lange Stücke der Hautnerven ansassen , ebenso wie besonders noch in jüngeren Stadien die Seitennerven. Auch die Hautparthie , aus welcher die embryonale Flosse gebildet wird , ist in toto gehärtet i ) Wratsch, 1900, No. 28. Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 1. 82 Referate. XVIII, 1. sehr geeignet für das Studium der Hautnerven , die reiche subepi- theliale Plexus bilden. Auch hier kann man mit Hämalaun, Säure- fuchsin , dem HEiDENHAiN'schen Eisenalaunhämatoxylin mit unvoll- kommener Entfärbung, Goldchlorid und Ameisensäure sehr schöne Präparate erhalten , iii denen man die Nerven auf lange Strecken verfolgen und mit starken Vergrößerungen untersuchen kann. Schiefferdecker (Bonn). Bielschowsky, M., u. Plien, 31., Zur Technik der Nerven- zellenfärbung (Neurol. Centralbl. Bd. XIX, 1900, No. 24, p. 1141—1142). Der von Ehrlich und Lazarus in dem Handbuch „Die Anämie" erwähnte , die Mastzellengranula (basophile Granula) stark meta- chromatisch tingirende Farbstoff, das Kresylviolett , welcher von Litten zur Färbung der basophilen Granula der Erythrocyten bei Anämie benutzt worden ist, wird von dem Verf. zur Darstellung der chromophilen Substanz der Nervenzellen empfohlen. Der Farbstoff wird von den Farbwerken in Mühlheim am Main in einigen Modi- fikationen hergestellt. Der hier verwendete ist „Kresylviolett RR U . Die Resultate sind denen der Färbung mit Thionin und Toluidin- blau gleichwerthig , doch ist die Haltbarkeit eine längere , und man kann zur Färbung so dünne durchsichtige Lösungen verwenden, dass man einmal den Schnitt leicht findet und zweitens nur wenig Farbe verbraucht. Die blauviolette Färbung ist ferner angenehmer als die mit Neutralroth (Rosin) erhaltene. Methode: 1) Härten des der Leiche entnommenen Materials in Alkohol oder Formol mit nach- folgender Alkoholbehandlung; 2) Celloidineinbettung ; 3) Färben der Schnitte in dünner wässeriger Lösung (6 bis 10 Tropfen einer concentrirten wässerigen Farbstofflösung auf 50 cc Wasser) während 24 Stunden bei Zimmertemperatur; 4) Rasches Durchziehen der Schnitte durch Wasser; 5) Entwässern in Alkohol von steigender Concentration. (Durch Farbabgabe Differenzirung der grauen und weissen Substanz in den ursprünglich gleichmässig gefärbten Schnitten); 6) Cajeputöl; 7) Abspülen des Cajeputöles durch Xylol auf dem Object- träger, Canadabalsam, Deckglas. — Gleich gute Resultate ergab auch Paraffineinbettung. Auch Gefrierschnitte von Blöcken, welche direct den für die Conservirung gebräuchlichen Formollösungen entnommen waren, Hessen brauchbare Structurbilder erzielen. Statt der langsamen Färbung in dünnen Lösungen, kann man natürlich auch schnelle Färbungen in concentrirten vornehmen, doch sind die dünnen wegen XVIII, 1. Referate. 83 der Leichtigkeit, die Schnitte aufzufinden, vorzuziehen. Ueberfärbte Schnitte werden durch längeres Verweilen in Alkohol bis zu dein gewünschten Grade entfärbt. In Alkohol , der auch nur spurweise mit Salzsäure angesäuert ist, wird die Farbe sehr rasch ausgezogen. Ausser den genannten Farbeigenschaften hat das Kresylviolett noch sehr schätzenswerthe metachroma tische. Neben den oben erwähnten färbt es amyloi'de Substanzen (hellblau) gegenüber dem sonst violett gefärbten Gewebe. Auch in anderen Geweben hat es Resultate ergeben , über die noch weitere Mittheilungen gemacht werden sollen. Schiefferdecker {Bonn). Mosse, Ueber Silberimpräguation der Markscheide und Nervenzellen (Deutsche med. Wochenschr. 1900, No. 23). Es ist Verf. gelungen, sowohl eine Imprägnirung der Markscheide wie der Nervenzellen mit Silber zu erhalten. Er verwendet eine ein- bis 2proceutige Lösung von Argentamin, welches sich praktischer erwiesen hat als Silberuitrat, und reducirt mit lOprocentiger Pyro- gallollösung. Die Schnitte aus Celloidinpräparaten kommen für etwa 10 Minuten in die Argentaminlösung , werden dann kurz in destil- lirtem Wasser abgespült, wenige Minuten in Pyrogallollösung reducirt und endlich nach der bekannten PAi/schen Methode differenzirt. Man erhält so eine gute Markscheidenimprägnation. Um die Zellen zu imprägniren, verfährt man in folgender Weise: Die nach Carnoy- Gehuchten gehärteten und in Paraffin eingebetteten Präparate werden in möglichst dünne Schnitte zerlegt, mit der Argentaminlösung be- handelt (2 bis 3 Minuten) und dann ebenfalls kurze Zeit in der Pyrogallollösung reducirt. So erhält man eine Imprägnirung, bei der die NissL'schen Körperchen, der Zellkern und die Kernkörper- chen schön hervortreten. Es ist , wie Verf. bemerkt , zum ersten Mal gelungen, die Nissl- Körperchen mit einem Metallsalz zu im- prägniren. — Verf. hat auch versucht, an Stelle der Silberlösungen Gold-, Quecksilber-, Palladium- und Platinsalzlösungen anzuwenden, doch ist dies entweder garnicht oder nur in unzureichendem Maasse geglückt. Scliiefferdeclcer (Bonn). Brodmaiiii, K., Die Anwendung des Polarisationsmikro- skops auf die Untersuchung degenerirter mark- halt i g e r Nervenfasern (Neurol. Centralbl. Bd. XIX ; 1900, No. 24, p. 1154). 6* 84 Referate. XVIII, 1. Ambronx und Held haben sich bekanntlich des Polarisations- mikroskops bei der Untersuchung der Entwicklung der Markreifung der Nervenfasern bedient. Verf. hat diese Methode auf die Degene- ration des Nervenmarkes angewendet. Sowohl bei experimentellen Versuchen an Kaninchen wie an frischem menschlichen Leichenmaterial nach verschiedenen Krankheiten ergaben sich bestimmte Resultate. Bei allen untersuchten chronisch -parenchymatösen Degenerationen der Nervenfasern erhielt Verf. bestimmte Farbenreactionen im pola- risirten Licht. Zahlreiche Nervenabschnitte , besonders die feineren Muskel- und Hautäste, zeigen ein von der starken negativen Doppel- brechung der gesunden markhaltigen Nervenfaser abweichendes optisches Verhalten, das sich im frischen Gewebe durch drastische Farbenwirkung zu erkennen giebt. Die Methode lieferte Bilder, die besonders für die Anfangsstadien noch instruetiver waren als die Osmiumschwärzung. Als Hauptresultate werden angeführt: 1) Wäh- rend starke, negative Doppelbrechung Attribut der normalen funetio- nellen markhaltigen Nervenfaser ist , zeigt die degenerirende Faser eine dem Degenerationsgrad entsprechende Abweichung ihres Ver- haltens in polarisirtem Lichte im Sinne einerseits einer AbSchwächung der doppelbrechenden Eigenschaft der Markscheide, anderseits (bei stärkerer Degeneration) einer Umkehrung des Charakters der Doppel- brechung. 2) Vermöge der optischen Eigenthümlichkeit der Nerven- fasern lassen sich im Polarisationsmikroskop degenerative Vorgänge in bestimmten Farbenerscheinungen, die von der normalen optischen Reaction abweichen, erkennen. 3) Die Untersuchung im polarisirten Licht bietet absolute Zuverlässigkeit. Wegen ihrer Exactheit und Einfachheit ist sie zur Ergänzung der übrigen Untersuchungsmittel dringend zu empfehlen. ScMcfferdecker (Bonn). Rosin u. Feny vessy , B. v. , U e b e r das L i p ö c h r o m d e r Nervenzellen (Virchow's Arch. Bd. CLXII, 1900, H. 3, p. 534 — 540 m. 2 Tfln.). Bei der Wichtigkeit, welche nach der Meinung der Verff. dem von Rosin gefundenen Fettbestandtheil in den Nervenzellen , dem Lipochrom zukommt, erschien es wünschenswerth, noch auf andere AVcise als es bisher schon geschehen war (Osmiumsäure, Alkohol und Aether). die Fettnatur der betreffenden Substanz sicher fest- zustellen. So wurde zu diesem Zwecke Alkanna probirt, indessen gelangen die Versuche nicht. Die Körnchen wurden zwar roth ge- färbt, aber auch der übrige Zellleib färbte sich so stark, dass eine XVIII, 1. Referate. 85 deutliche Differenzirung nicht möglich war. Auch Cyanin erwies sich als ungünstig und kann für Fettfärbung- im Centralnervensystem nicht empfohlen werden. Es wurde deshalb noch Sudan III versucht und dabei Material aus dem normalen Hirn und Rückenmark eines er- wachsenen Menschen nach Formolhärtung benutzt. Da die Anwen- dung von absolutem Alkohol, Aether, Xylol und Canadabalsam wegen ihrer fettlösenden Eigenschaften nicht möglich war, so wurden nur Gefrierschnitte gemacht, welche dann in die Farblösung kamen, und zwar in 70-, 75-, 80- und 85procentigen Alkohol, der mit Sudan entweder in der Kälte oder in der Wärme gesättigt worden war. Geschah die Sättigung in der Kälte, so war zur Erreichung der nöthigen Concentration mindestens eine Lösungsdauer von 2 Tauen und mehrfaches Durchschütteln nöthig. Vor dem Gebrauche wurde die Lösung von dem überschüssigen Farbstoff entweder vorsichtig abgegossen oder liltrirt und in gut versehliessbare Glasschälchen ge- bracht, um Niederschläge durch Verdunstung und Auskrystallisiren zu vermeiden. Die Färbungsdauer war gewöhnlich 24 Stunden ; eine längere Zeit empfiehlt sich nicht, weil zu leicht krystallinische Nie- derschläge in Form von Nadeln und Drusen die Schönheit der Bilder beeinträchtigen. Auch eine kürzere war nicht praktisch, da das Fett dann nicht eine scharlachrothe Farbe annimmt , sondern einen mehr oder minder röthlichgelben Ton. Es kam aber darauf an, ein intensives Roth zu erhalten, um die Substanz von dem umgebenden Gewebe möglichst zu dift'erenziren. Am zweckuiässigsten erwies sich 80procentige Lösung. Nach der Färbung 50procentiger Alkohol (wenige Secunden) , destillirtes Wasser , Aufheben in Glycerin mit Lackrahmen. Ein Theil der Präparate wurde nachgefärbt mit Hä- matoxylin oder Methylenblau, Jodgrün oder Lichtgrün. Die Doppel- färbung mit Hämatoxylin war die schönste. Die Präparate hielten sich gut. Sämmtliche früher schon als Fettsubstanz angesprochenen Körnchen in den Nervenzellen zeigten sich intensiv scharlachroth gefärbt. Ausser diesen wurden auch andere Gewebselemente mit- gefärbt: eine Substanz, welche in Schollen oder Körnchen sich sehr reichlich in der Adventitia der Hirngefässe vorfindet und sich mit Osmiumsäure ebenfalls intensiv schwärzt; ferner die Markscheiden, die aber einen sehr viel blasseren Farbenton annehmen. Die übrigen Gewebsbestandtheile, Achsencylinder, Kerne, Glia ; Gefässwand, Binde- gewebe blieben fast ungefärbt. Es zeigte sich also, dass Alles, was sich mit Osmiumsäure schwärzte, durch Sudan intensiv scharlachroth gefärbt wurde. Zur Controle haben die Verff. auch nach der Sudan- 86 Referate. XVIII, 1. färbung noch auf andere Weise das Fett mikrochemisch nachzuweisen versucht. 1) Haben sie die bereits in Sudan gefärbten Schnitte in absoluten Alkohol übertragen ; das Sudan wird gelöst und die Farbe ausgezogen. Wenn nun die Schnitte längere Zeit in absolutem Alko- hol verblieben, so gelang es nicht mehr, sie aufs neue mit Sudan zu färben, da das Fett extrahirt worden war. 2) Wurden Schnitte vor der Färbung erst in absoluten Alkohol , dann in Aether für 24 Stunden gebracht; die Sudanfärbung gelang jetzt nicht mehr. Sie haben schliesslich auch Fett, Protagon und Lecithin in reiner Substanz auf Objectträger aufgestrichen mit Sudan behandelt; Fett färbte sich intensiv, Lecithin garnickt, Protagon nur blassrosa. Schiefferdecker ( Bonn) . Wriglit, H., The action of ether and Chloroform on the neuron o f r a b b i t s and d o g s (Journ. of Physiol. vol. XXVI, 1901, no. 1, 2, p. 30—41 w. 1 plte. a. 4 figg.). Die dem Thier entnommenen Organe (Gehirn und Cervical- gegend des Rückenmarks) wurden der Länge nach in Hälften ge- theilt, von denen die eine in absoluten Alkohol, die andere in MüLLER'sche Flüssigkeit gelegt wurde. Die Alkoholpräparate wurden für die Nissi/sche Methylenblaufärbung, für Weigert's Hämatoxylin und für die Hämatoxylin-Eosinfärbung verwendet. Die aus Müller- scher Flüssigkeit wurden mit der BERKELEv'schen Modification der Golgimethode (bei den Kaninchen) und der Cox'schen Methode (bei den Hunden) behandelt. Schieferdecker (Bonn). Krause, R., u. Philippsoll, M., Untersuchungen über das Centralnerven System des Kaninchens (Arch. f. mikrosk. Anat. Bd. LVII, 1901, p. 488—527 m. 4 Tfln.). Die Untersuchungen wurden mittels der vitalen Methylenblau- methode angestellt. Folgender Modus procedendi bewährte sich am besten. Als Stammlösung dient eine einprocentige Lösung des Farb- stoffes in 0*6procentiger Kochsalzlösung. Dem durch intraperitoneale Injection von Chloralhydrat (1 bis 2 cc einer 50procentigen Lösung) narkotisirten Thiere wird eine Glaskanüle in die Vena femorales eingebunden und die Farblösung mittels einer Bürette mit Glashahn injicirt. Man muss bei der Injection äusserst vorsichtig zu Werke gehen, um das Thier möglichst lange am Leben zu erhalten. Zu- nächst verdünnt man die Stammlösung mit einem oder 2 Theilen Kochsalzlösung und lässt alle 5 Minuten ein Cubikcentimeter ein- XVIII, 1. Referate. 87 fliessen. In der zweiten Stunde kann man dann zur Injection der 0*5- oder einprocentigen Lösung übergehen. Die Thiere ertragen so die Injection mehrere Stunden lang, und es gelingt in manchen Fällen, bis zu einem Gramm des trockenen Farbstoffes zu injiciren. Selbstverständlich muss die zu injicirende Farblösung auf Körper- temperatur erwärmt werden, auch soll das Thier während der ganzen Operation künstlich warm gehalten werden, durch Auflegen ange- wärmter Tücher oder ähnliche Vorrichtungen. Sehr wichtig ist die passende Sorte Methylenblau. Von den im Handel vorkommenden Sorten wurden auf ihre Wirksamkeit geprüft Methylenblau B , 2 B, B extra und Methylenblau medicinale chlorzinkfrei , sämmtlich von E. Merk, Darmstadt, ferner Methylenblau Bx von Grübler und schliesslich ein chemisch reines aber chlorzinkhaltiges Methylenblau der Höchster Farbwerke. Das letztere erwies sich als das bei weitem günstigste, es sollte ausschliesslich angewandt werden. Die Vorher- sage, ob gute Färbung zu Stande kommt oder nicht, ist stets äusserst unsicher; einigermaassen brauchbare Präparate erhält man aber eigent- lich immer. Sobald das Thier gestorben ist, wird das Centralnerven- system kerauspräparirt und in lOprocentige Lösung von molybdän- saurem Amnion für 6 bis 12 Stunden eingelegt. Die Stücke dürfen nicht zu gross sein. Die mehrere Stunden in tliessendem Wasser ausgewaschenen Stücke werden dann zunächst in 70-, 95procentigem und schliesslich absolutem Alkohol entwässert und durch Xylol in Paraffin eingebettet. Neben dieser intravenösen Methode wurde die Farblösung auch intraperitoneal eingeführt. Man verwendet dazu ein- bis 2procentige Lösung und führt je nach der Grösse des Thieres stündlich 5 bis 10 cc ein. Auch auf diese Weise werden zuweilen gute Resultate erzielt, doch sind sie noch weniger constant als bei der vorigen Methode. E. Schoebel {Neapel). Bischoff, E., Beitrag zur Anatomie des Igelgehirns (Anat. Anz. Bd. XVIII, 1900, No. 15, 16, p. 348—358 m. 1 Tfl.). Das Gehirn der Insectenfresser ist noch unvollkommen durch- forscht. Maulwürfe kann man in der Gefangenschaft nicht am Leben erhalten. Nach Angaben der Literatur haben sich auch Igel nicht genügend widerstandsfähig erwiesen. Verf. hat dagegen operirte Igel, welche vorher entweder frei gelebt hatten oder im Käfig auf- gezogen waren, sehr wohl wochenlang ohne Störung ihres Allgemein- befindens am Leben erhalten können. Er hebt nun hervor, dass die 88 Referate. XVIII, 1. Untersuchung clor nach Marchi behandelten Gehirn- und Rücken- niarkstücke beim Igel durch zwei Umstände sehr erschwert wurde. Es fand sicdi im Hirnstamm und im Rückenmark in anscheinend regelloser Vertheihmg ein „Niederschlag" feiner schwarzer Körnchen, welcher die Verfolgung degenerirter Fasern bedeutend erschwerte. Solche Niederschläge wurden in allen Igelrückenmarken gefunden. Es scheint also, dass schon die normalen Markscheiden beim Igel eine grössere Neigung zur Osmiumschwärzung zeigen. Dazu kommt noch, dass ein beträchtlicher Theil der Nervenfasern ein äusserst geringes Kaliber besitzen. Endlich war die Degeneration in längeren Fasersystemen, besonders in der Pyramidenbahn, trotz des lötägigen Ueberlebens noch nicht voll ausgebildet. [Es würde sich diese Be- obachtung den schon öfters von anderen Tarieren mitgetheilten an- schliessen, dass auch bei normalen Nervenfasern ein Niederschlag bei der MARCHi'schen Methode eintreten kann. Ref.] Scliicfferdecker {Bonn). Studnicka , F. K. , Untersuchungen übe r den B a u des Ependyms der nervösen Centralorgane (Anat. Hefte H. 48, 1900, p. 301—429 m. 10 Tfln.). Verf. hat an einem sehr ausgedehnten, die verschiedensten Wivbel- thierklassen umfassenden Material untersucht, welches mit Sublimat- Eisessig, Sublimat-Formol, Pikrinsäure, ZENKEu'scher, PERENYi'scher, zu einem kleinen Theil auch mit FLEMMiNo'scher Flüssigkeit conser- virt war. Das von menschlichen Gehirnen stammende war zum Theil in MüLLER'scher Flüssigkeit , zum Theil in Formol conservirt. Am besten bewährte sich das Sublimat-Eisessiggemisch. Flemming- sche Flüssigkeit wurde hauptsächlich deshalb wenig benutzt, weil die Färbung durch sie erschwert war. Geschnitten wurde in Paraffin. Zur Färbung diente hauptsächlich HEiDENHAiN'sches Eisenhämatoxy- lin, sonst aber auch Safranin, Methylenblau-Erythrosin, Hämatoxylin (Delafield) mit Erythrosin. Die Eisenhämatoxylinpräparate färbte Verf. häufig mit Bordeaux R nach. Mittels der GoLGi'schen Silber- imprägnation Hessen sich die Fortsätze der Ependymzellen verfolgen. Zum Studium der Intercellularverbindungen eignet sich diese Methode nicht besonders. Die WEiGERT'sche Neurogliamethode empfiehlt sich für die vorliegenden Zwecke noch weniger. Sie lässt sich übrigens auch bei niederen Wirbelthieren nicht anwenden. Schiefferdecker {Bonn) . XVIII, 1. Referate. 89 Thiemisch, 31., reber die Schädigung des Central- nervensystems durch E r n ä hrungsst ö r u n g en im S äu g lin g s a 1 1 e r (Jahrbuch f. Kinderheilk. Bd. LH, 1 900, II. 5, p. 810—843). Das Gehirn und Rückenmark wurde möglichst bald nach dem Tode der Leiche entnommen (niemals später als 12 Stunden). Die Gehirne wurden unter Vermeidung von Formalin 3 bis 5 Monate oder länger in anfangs oft gewechselter MüLLER'scher Flüssigkeit gehärtet , nachdem sie bei der Section durch einen Frontalschnitt ungefähr in der Mitte der Hemisphären , welcher über die Weite der Ventrikel und den Blutreichthum, sowie die Färbung der Schnitt- fläche Auskunft geben sollte , zerlegt waren. Die Entnahme der zur mikroskopischen Untersuchung bestimmten Stücke geschah in der Weise, dass der Hirnschenkel beiderseits durchschnitten und das abgetrennte Grosshirn durch einen Sagittalschnitt in der Mitte des Balkens in seine beiden Hemisphären zerlegt wurde. Zur Unter- suchung wurden aus einer Hemisphäre (meist rechts) dünne Frontal- scheiben in der Höhe des vorderen und des hinteren Balkenendes und der mittleren Commissur herausgeschnitten , und die Scheiben durch passend geführte Schnitte in mehrere (3 bis 5) Theile zer- legt, welche zusammen in ein Gefäss mit MARCin'scher Mischung kamen. Auf diese Weise war es leicht möglich, aus den einzelnen Schnitten den ganzen Frontalschnitt zusammenzusetzen und jede wünschenswerthe Orientirung zu gewinnen. In einigen Fällen wurden auch noch weitere Stücke aus dem Frontal- und Occipitalpol etc. eingelegt, Pons und Medulla oblongata ebenfalls durch Frontalschnitte zertheilt. Aus dem Rückenmarke untersuchte Verf. Scheiben aus dem Cervical-, dem oberen und unteren Dorsal-, Lumbal- und Sacral- marke. Diese sowie die kleinen Stücke aus der Medulla oblongata kamen für etwa eine Woche, die grösseren für etwa 2 bis 3 Wochen in das MARcm'sche Gemisch. Da es bei den sehr zahlreichen Unter- suchungen des Verf. darauf ankam, nicht unnöthig grosse Mengen von Osmiumsäure zu verschwenden, so überzeugte er sich jeden Tag oder jeden zweiten Tag durch Eintauchen von mit Fett getränkten Papier- streifen in das Gemisch, ob noch genügend freie Osmiumsäure darin enthalten war. Falls nicht sehr schnell eine Schwärzung des Streifens eintrat, wurde frische Osmiumsäurelösung zugefügt. Auf diese W T eise hat Verf. eine gute Durchfärbung selbst grösserer Stücke erhalten. Nach gründlichem , mindestens 24stündigem Auswaschen in reichlich fliessendem Wasser folgte Celloi'dineinbettung. — Bekanntlich ist 90 Referate. XVIII, 1. mehrfach zur Entfernung der in den MARcm-Präparaten gelegentlich vorkommenden schwarzen Stäubchen und Körnchen (gewöhnlich als „Verunreinigungen" bezeichnet) die Nachbehandlung der Schnitte mit der PAL'schen Entfärbungsflüssigkeit empfohlen worden. Verf. hat gleich im Anfange eine Erfahrung damit gemacht, die ihn ver- anlasste, diese Methode nicht weiter zu benutzen. Er fand bei einem 5 Monate alten Kinde das Marklager der Centralwindungen mit einer ganz enormen Zahl von schwarzen Körnchen und Schollen be- deckt, während in der zugehörigen Rinde sich zahlreiche Körnchen- zellen zeigten. Im Vergleich mit den anderen bis dahin untersuchten Fällen und im Hinblick auf das geringe Lebensalter des Kindes, welches einen so grossen Markscheidenreichthum an dieser Stelle kaum erwarten Hess, schien gerade hier die Möglichkeit von Kunst- producten oder Verunreinigungen nicht von der Hand zu weisen. Verf. behandelte daher die Schnitte mit der Entfärbungsflüssia'keit nach Pal mit dem Erfolge , dass das Marklager nachher ganz un- verändert dieselben massenhaften Körnchen und Schollen aufwies, während die Körnchenzellen in der Rinde , bei denen von Kunst- producten nicht wohl die Rede sein konnte , völlig entfärbt waren. Er hat daher für seine weiteren Untersuchungen von dieser Methode Abstand genommen. Schieferdecker (Bonn). C. Mikroorganismen. Boi'OSini, A. V. , Glaskolben zur Herstellung von Nähr- böden (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Bd. XXVIII, 1900, No. 1, p. 23). Borosini hat, um das Ueberkochen von Nährböden in Glaskolben zu verhüten, solche mit oberer trichterförmiger Erweiterung des Halses anfertigen lassen. Beim Zweiliterkolben beträgt die Höhe bis zum Halsansatz 17 cm, die Länge des Halses 15 cm, die Höhe des an- gesetzten Trichters 7 cm, die Weite des Halses 4'5 und. der obere Durchmesser des Trichters 12 cm. Die Preise (mit Vorbehalt) wur- den von der Firma Schott u. Genossen in Jena auf 1*20 für den Halbliterkolben, 1*60 für den Liter- und 2*00 M. für den Zweiliter- kolben angesetzt. Oxapleivski (Köln). XVIII, 1. Referate. 91 Petri , R. J. , Ein neuer R e a g e n s g 1 a s s t ä n d e r für C u 1 - turen (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Bd. XXVIII, 1900, No. 21, p. 747—748). Petri empfiehlt für Reagensglasculturen ein neues Gestell. Das- selbe , für 10 Reagirgläser eingerichtet, besteht aus einem soliden schweren Fuss aus Eisen oder Zink, über welchem zwischen zwei Säulen drei Reihen von neben einander stehenden Ringen zum Ein- stecken der Reagensgläser über einander angeordnet sind. Die oberste Reihe ist etwa in der Höhe des unteren Endes des Watte- bausches, die dritte mit engeren Ringen für die Kuppen der Reagens- gläser angebracht, die zweite in der Mitte zwischen beiden. Auf diese Weise sind die neben einander stehenden 10 Gläser mit ihrem Inhalt von allen Seiten gut zu betrachten. Das Gestell ist zu be- ziehen von Warmbrunn, Quilitz und Co. Oxapleivski {Köln). Petri, R. J., Nachtrag zu: Neue, verbesserte Gelatine- schälchen [verbesserte PETRi-Schälchen] (Cen- tralbl. f. Bacteriol. Abth. 1 , Bd. XXVIII, 1900, No. 22, p. 789—790). Petri erwähnt , dass von den von ihm construirten neuen Schälchen nur die an zweiter Stelle angegebenen Schalen angefertigt werden. Für gewöhnlich kommt die Standplatte mit Ring in Weg- fall. Bei dem Anaerobenapparat wird nunmehr das Gestell aus Metall gefertigt. Auch ist der Apparat dadurch verbilligt, dass die ring- förmige Erhöhung der Standplatte in Wegfall gekommen ist. Czapleivski {Köln |. Epstein, St., Ein vereinfachtes Verfahren zur Züchtung' anaerober Bacterien in Doppelschalen (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Bd. XXVIII, 1901, No. 14, 15, p. 443). Epstein giebt ein sehr einfaches Verfahren zur Züchtung von Anaeroben in Plattenculturen an. Als Platten dienen PETRi'sche Doppelschalen (Modell des preussischen Kriegsministeriums). Die- selben werden von einem breiten, fest schliessenden Gummiringe um- spannt, welcher an zwei gegenüber liegenden Stellen dickwandige Gummiröhren trägt. Nachdem der Rand zwischen Schale und Band mit einer Mischung von Paraffin und Wachs abgedichtet ist, wird 3 Minuten Wasserstoff durchgeleitet. V ersuche ergaben, dass alka- 92 Referate. XVIII, 1. lisches Pyrogallol dabei unverändert blieb. Gezüchtet wurden Bacillus oedematis maligni, B. botulinum und B. tetani. Der Apparat ist zu beziehen von Peters und Rost, Berlin. Cxapletcslä {Köln). Aderhold, R., Eine kleine technische Mittheilung (Cen- tralbl. f. Bacteriol. Abth. 2, Bd. VI, 1900, No. 19, p. 627 —628). Aderhold hat die sogenannten „WoLPF'schen Conservenbüchsen mit dem Wolfe" von Wulff- Habelschwerdt zu bacteriologischen Zwecken verwandt. Es sind cylindrische Gläser mit plattgeschliffenem Rand, auf denen ein Glasdeckel mit Gummiring gedichtet, zuerst durch einen Metallbügel, dann nach der Sterilisation durch den Luft- druck selbst angepresst wird. Auf Wunsch erhält man harzfreie Gummiringe. Die kleineren Gläser zu ein viertel Liter, welche nur 5 cm hoch sind , füllt er entsprechend mit Gelatine , sterilisirt und impft, worauf der Deckel durch den Metallbügel wieder fest auf- gepresst wird. Sie sollen nicht leichter als Culturen mit Wattever- schluss verunreinigt werden. Die grösseren , etwa 1 9 cm hohen Gläser zu ein Liter benutzt Verf., um in ihnen je 6 mit Nährböden beschickte Reagensgläser zu sterilisiren, welche sich darin, ohne zu verderben und zu vertrocknen, gut halten. Qw/plewsld {Köln). Strassblli'ger , J. , I. Ein verändertes S e diment irungs- verfahren zum mikroskopischen Nachweis von Bacterien. IL U e b e r den Nachweis von Tuber- kel b a c i 1 1 e u in den Fäces (Münchener Med. Wochen- schr. 1900, No. 16, p. 5.33—535). Strassburqer empfiehlt, das Sedimentiren von bacterienhaltigen Flüssigkeiten beim Centrifugiren dadurch zu erleichtern , dass man das specifische Gewicht der Flüssigkeit durch Alkoholzusatz herab- setzt. Er verdünnt 1 Th. Untersuchungsflüssigkeit mit 2 Th. Al- kohol (1 Th. Wasser und 2 Th. Alkohol haben bei 15° C. 0'8975 spec. Gew.). Die Methode erwies sich namentlich bei verhältniss- mässig klaren Flüssigkeiten dem gewöhnlichen Verfahren überlegen. [Ihre Anwendung ist aber natürlich ausgeschlossen , wenn man das Sediment zu Züchtungszwecken zu verwerthen wünscht. Ref.] Auch zum einfachen Sedimentiren lässt sich das Verfahren bei Mangel einer Centrifuge zur Abkürzung der Untersuchung mit Vortheil verwerthen. Verf. hat dann versucht, die Alkoholcentrifugirmethode zum Nachweis von Tuberkelhacillen im Stuhlgang von Phthisikern (welche XVIII, 1. Referate. 93 ihr »Sputum aber nicht verschlucken dürfen!) zu benutzen, indem er beliebige Parthien aus der Mitte der Fäces wühlte. Die Prä- parate trocknen schnell, enthalten fast nur Bacterien dicht an ein- ander gelagert , während in gewöhnlichen Präpai-aten viel Verun- reinigungen sind. In der That gedang es Verf. mit diesem Ver- fahren, tuberkelbacillenähnliche Stäbchen, in mehreren Fällen auch in äusserlich ganz normalen Stühlen nachzuweisen. Verf. macht aber mit Recht darauf aufmerksam, dass die Deutung der gefundenen Stäbchen als Tuberkelbacillen durch die neuerdings sich mehrenden Befunde von anderen säurefesten Stäbchen sehr erschwert wird. Gegen Täuschung durch Smegmabacillen räth er , sich durch 10 Minuten dauerndes Entfärben mit absolutem Alkohol [absoluter Alkohol entfärbt nach C. Günther überhaupt nicht Ref.] zu schützen. CzaplewsM (Köln 1. Tkomaiin , J. , U e b e r die Brauchbarkeit verschiedener N ä h r b ö d e n für die bacteriologische Wasser- unt er suchung (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 2, Bd. VI, 1900, No. 24, p. 796—800). Thomann hat vergleichende Untersuchungen mit verschiedeneu zu bacteriologischen Wasseruntersuchungen empfohlene Gelatinenähr- böden angestellt. Bei der Kocn'schen Fleischwasserpeptongelatine fügte er zu der mit Natronlauge neutralisirten Gelatine 1*5 Promille krystallisirte Soda (nach Dahmen) hinzu. Die MiQUEi/sche schwach- alkalische Gelatine zu Wasseruntersuchungen neutralisirt er genau mit Milchsäure und fügt ebenfalls 1*5 Promille krystallisirte Soda hinzu, ausserdem aber noch 2 Promille Dikaliumphosphat, weil ohne Phosphate nach Niederkorn 1 B. pyoeyaneus und B. fluorescens dar- auf keinen fluorescirenden Farbstoff bilden. Auf dieser modificirten MiQUEi/schen Gelatine entwickelten sich aber alle Colonien bedeutend langsamer, auch B. coli und B. typhi gediehen darauf nicht so gut, so dass diese Gelatine nicht als ebenbürtig der KocH'schen bezeichnet werden kann. Zu weiteren Untersuchungen zog Verf. sodann die beschriebene Fleischextract- Pepton -Kochsalzgelatine 2 heran, ferner die jüngst von Abba bekannt gegebene Gelatine. Auch letzterer *) Niederkorn, Vergleichende Untersuchungen über die verschiedenen Varietäten des B. pyoeyaneus und des B. fluorescens liquefaciens. Inaug.- Diss. Freiburg (Schweiz) 1898. -) Vereinbarungen zur einheitlichen Untersuchung und Beurtheilung von Nahrungs- und Genussmitteln für das Deutsche Reich, H. 2, Berlin 1899. 94 Referate. XVIII, 1. setzte Verf. 2 Promille Dikaliumphosphat (aus obigen Gründen) zu und ein Promille Soda nach Neutralisir en. Es fand sich dabei zwi- schen der KocH'schen und der AßBA'schen Gelatine kein wesentlicher Unterschied in der Zahl der entwickelten Colonien, während die „Deutsche" Gelatine stets weniger Keime ergab. Verflüssigung war bei diesen drei Gelatinearten ziemlich gleich gut. Dagegen ent- wickelten sich Stichculturen von B. coli, typhi, V. cholerae uud Mäuse- typhus auf KocH'scher Gelatine am besten, schlechter auf AßBA'scher und am schlechtesten auf Deutscher Gelatine. Verf. suchte nun die ABBA'sche Gelatine noch zu verbessern und glaubt dies durch folgen- des Recept gethan zu haben, welches er jetzt allein noch für Nähr- gelatine zu Wasseruntersuchungen verwendet: Fleischextract 6 g, Pepton Witte 10 g, Kochsalz 5 g, Dikaliumphosphat 2 g werden in 1000 g destillirtem Wasser auf dem Dampfbad gelöst und dieser Lösung 100 bis 120 g (je nach der Jahreszeit) Gelatine zugefügt. Nach Auflösung der letzteren wird mit Normalnatronlauge neutrali- sirt (Indicator empfindliches Lakmuspapier) und der neutralen Flüssig- keit 1*5 g krystallisirte Soda (= 15 cc einer lOprocentigen Soda- lösung) hinzugefügt. Nach halbstündigem Kochen im Dampftopf oder besser noch nach viertelstündigem Erwärmen im Autoklaven auf 110° wird filtrirt und in gewohnter Weise die Gelatine abgefüllt etc. Diese Gelatine ist, wie der Verf. rühmt, in kürzerer Zeit herzustellen und hat eine constantere Zusammensetzung. Czapleivski (Köln). Boni , J. , Methode zur Darstellung der Bacterienkap- sel auch in festen Nährböden (Münchener med. Wochenschr. 1900, Nr. 37, p. 1262—1263). Boni hat, von der Beobachtung ausgehend, dass die „Kapsel" beim FitÄNKEL'schen Diplococcus durch den Farbencontrast eines leicht gefärbten Untergrundes deutlich zu werden schien, eine bequeme Methode zur Darstellung der Bacterienkapsel gefunden. In Bestä- tigung seiner Annahme fand er , dass durch Aufschwemmen von Bacterienagarculturen in Bouillon statt in Wasser, die Kapsel bereits deutlich wurde, aber nicht in allen Fällen, was auf Verschieden- heiten in der Zusammensetzung der Bouillon beruht. Verf. versuchte dann statt Bouillon eine ähnlich wirkende Flüssigkeit mit constanterer Zusammensetzung zu finden. Als solche erkannte er eine Mischung von einem Hühnereiweiss, 50 g Glycerin und 2 Tropfen Formalin, welche zuerst geschüttelt und dann filtrirt wird. Die Flüssigkeit könne lange steril bleiben; für feinere diagnostische Untersuchungen XVIII, 1. Referate. 95 müsse sie wie Blutserum sterilisirt werden. Seine Technik beschreibt Verf. wie folgt: „Man bringt auf das Deckgläschen (oder auf den Objectträger) eine Oese voll der oben beschriebenen Flüssigkeit; ver- mischt damit sorgfältig eine Spur Agarcultur von Pneumococcus und streicht das Tröpfchen recht dünn aus. Zur vollständigen Austrock- nung des Präparates muss man dasselbe so lange über die Flamme ziehen, bis die Bildung weisser Dämpfe aufhört. Dann bedeckt man die Bacterienschichte mit der ZiEHi/schen Lösung (welche nicht ver- dünnt sein darf!). Nach kurzer Einwirkung (eine halbe Minute) spült man das Präparat mit Wasser ab und trocknet es. Mittels eines Tröpfchens Canadabalsam wird endlich das trockene Deckgläschen auf den Objectträger angeheftet." Mit dieser Methode vermochte Verf. nicht nur beim FRÄNKEL'schen Diplococcus, sondern auch bei anderen Mikroorganismen, welche unter gewissen Umständen schon eine Kapsel gezeigt haben, Kapseln nachzuweisen, auch constant beim B. coli aber nicht beim B. typhi. Er betont zum Sehluss: 1) dass gegen- über der allgemein bis jetzt geltenden Meinung, die sogenannten Kapselbacterien nicht nur im menschlichen oder thierischen Organis- mus, sondern auch in flüssigen und festen Nährböden immer eine Kapsel darbieten können ; 2) dass man auch in Bacterien, bei welchen nur ausnahmsweise zuweilen eine Kapsel gesehen wurde, durch die von ihm angegebene Methode immer leicht in Agarculturen dieselbe erzeugen [besser: darstellen Ref.] kann; 3) dass weitere Versuche unter Anwendung derselben Methode wahrscheinlich auch bei Mikro- organismen eine Kapsel darbieten werden, welche nie eine solche bis jetzt gezeigt haben. Czaplewski {Köln). Boni , J., Methode zur Darstellung einer „Kapsel" bei allen Bacterienarten. Vorläufige Mittheilung (Centralbl. f. Bacteriol. Abth. 1, Bd. XXVIII, 1900, No. 20, p. 705). Boni konnte mit dem von ihm (siehe vorstehendes Referat) be- schriebenen Verfahren nicht nur mit Carbolfuchsin, sondern auch mit anderen Anilinfarben in Bacterienculturen Bacterienkapseln zur Dar- stellung bringen. Am besten gelang dies, auch bei' Arten, bei welchen der Nachweis mit der genannten Färbung nicht möglich war und auch in alten Culturen, mittels einer Doppelfärbung mit Carbolfuchsin und Löffler's Methylenblau. Das Verfahren gestaltet sich wie folgt : 1) Anfertigung des Ausstrichpräparates in einem Tröpfchen der oben beschriebenen Flüssigkeit. Gut ausbreiten — Trocknen (bis zur voll- 9(3 Referate. XVIII, 1. ständigen Verdampfung: des Glycerins). 2) Färbung mit ZiEHi/sehem Carbolfuchsin (20 bis 30 Secunden). 3) Abspülen mit Wasser — Abtrocknen (Fliesspapier). 4) Nachfärbung mit Löffler scher Me- thylenblaulösung (4 bis 6 Minuten). 5) Abspülen mit Wasser. 6) Trock- nen (Fliesspapier) und Untersuchung in Canadabalsam. — Auf rothem Hintergründe erscheint die farblose, scharfconturirte Kapsel, welche den centralen , blaugefärbten Theil umgiebt. Die Kapsel bleibt un- sichtbar, wenn der Hintergrund entfärbt ist. Frische Culturen geben bessere Präparate. Verf. stellte die Kapsel dar bei: Sarcina flava, S. alba, Bacillus subtilis, B. mycoides, B. megatherium, B. acidi lactici, B.. anthracis, B. coli commune, B. rhinoscleromatis, B. mallei, B. pneumoniae. Vibrio aquatilis, Diplococcus pneumoniae, Streptococ- cus pyogenes, Bacillus typhi, B. diphtheriae, B. pseudodiphthericus, B. pestis, Staphylococcus pyogenes aureus. „Die auffallende mor- phologische und tinctorielle Aehnlichkeit zwischen der Hülle der Ba- eterienarten, deren Kapsel schon gekannt war, und jener der übrigen, beweist die Identität der Natur derselben und lässt die Möglichkeit eines Artefacts ausschliessen." Verf. unterscheidet danach in der Bacterienzelle einen centralen, intensiv färbbaren Antheil und „eine periphere, farblose immer scharf conturirte Schicht", welche die ge- wöhnlichen Färbungsmethoden von den übrigen Zellbestandtheilen nicht unterscheiden lassen, und welche in einer geringeren Anzahl von Bacterienarten unter gewissen Umständen schon beobachtet [und auch gefärbt Ref.] worden ist (Kapsel). Er vermuthet, dass letztere dem Zellprotoplasma, das Centrum dem Zellkern entspricht. Cxapleivslä (Köln I. Sata, A., lieber die Fettbildung durch verschiedene Bacterien nebst einer n e u e n F ä r b u n g des Actinomyces im Schnitte (Centralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. XI, 1900, No. 3, 4, p. 97 — 102). Sata fand gelegentlich von Untersuchungen über Fette im Ge- webe, dass sich die Actinomycesdrüsen auf Schnitten mit dem neuen Fettfärbungsmittel Sudan III orangeroth bis tiefroth färben lassen und hat dann verschiedene Bacterienculturen auf ihr Verhalten zu diesem Farbstoff untersucht. Die Färbung lässt sich bei einigen Arten bereits an getrockneten, nicht rixirten Deckglaspräparaten nachweisen, aber nur bei nicht zu dünner Schicht. Besser ist folgen- des Verfahren: Gut entwickelte Schrägculturen oder Kartoffelculturen werden 10 Jlinuteu durch Uebergiesseu mit Alkohol entwässert (weil XVIII, 1. Referate. 97 Wasser Sudan niederschlägt), 10 Minuten mit alkoholischer Sudan- lösung gefärbt und dann mit Spiritus ausgewaschen. Nicht gefärbt werden die Culturen von B. coli commune, B. typhi, V. cholerae, B. Diphtheriae, B. pseudodiphtheriae , B. pestis und Hühnereholera- bacillen. Nur auf Grlycerinagar und Kartoffeln färbten sich Rotz- bacillen, Milzbrandbacillen , Wurzelbacillen , Staphylococcus aureus, während säurefeste Bacillen (von Korn) auch auf gewöhnlichem Agar ohne Grlycerin Färbung zeigten. Tuberkelculturen auf glyceri- nirtem Blutserum färbten sich ebenfalls. Er glaubt, dass die Färbung auf dem (von anderen Seiten durch zahlreiche Beobachtungen ge- stützten) Fettgehalte der Bacterien beruhe. — Er empfiehlt ferner eine neue Methode zur Färbung des Actinomyces in Schnitten. Diese besteht in 1) Fixirung in Formollösung, 2) Abspülen in Wasser, 3) Zerlegung in Schnitte auf dein Gefriermikrotom, 4) schwache Hämatoxylinfärbung, 5) einige Minuten in Spiritus, 6) 12 bis 24 Stunden in eine gesättigte alkoholische (96procentige) Lösung von Sudan 111 , 7) Abspülen in Spiritus , 8) Einschliessen in Glycerin. Am besten ist frisches Material. Einlegen in Alkohol schädigt die Färbung. Die Actinomycesdrüsen sollen dadurch sehr deutlich orange- bis hellroth in dem blauen Gewebe hervortreten, wenn sie auch keine tiefe Färbung zeigen. Czaplewski {Köln). Helbiilg, C. , Erklärungsversuch für die speci fische Färbung der Tub er ke lb acillen (Deutsche Med. Wo- chenschr. 1900, p. 133). Helbing giebt einen neuen Erklärungsversuch für die specifische Färbbarkeit der Tuberkelbacillen. In einem Fall von Perityphlitis wurde zufällig in einem excidirten Netzstückchen die Beobachtung gemacht, dass sich die Schalen von Bandwurmeiern und Bruchstücke derselben wie Tuberkelbacillen färbten. Da nach den Untersuchungen von Aronsohn und Sata der nachweisbare Fettgehalt der Tuberkel- bacillen es nicht sein konnte, welcher ihre specifische Färbbarkeit bedingt, forschte Verf. nach, ob es einen chemischen Körper giebt, der sowohl in den Tänieneierschalen als in den Tuberkelbacillen vorkommt. Nun fand er aus der Literatur, dass die Tänieneier- schalen aus Körpern bestehen, die zur Reihe der Chitingruppe ge- hören. Ausserdem stiess er auf die Angabe von Ruppel (aus dem BEHRiNG'schen Laboratorium), welcher bemerkt, „dass in den Tuberkel- bacillenleibern ein grosser Theil der Eiweisskörper aus Substanzen besteht, welche den Chitinkörpern nahestehen". Verf. glaubt daher, Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 1. 7 98 Referate. XVIII, 1. dass die Säurefestigkeit der Tuberkelbacillen keineswegs , wie in letzter Zeit angenommen wurde, auf dem Fettgehalt, sondern auf ihrem Gehalt an chitinähnlichen Körpern beruht. Auch bei Crustaceen (Daphnia) wies Verf. schwere Färbbarkeit mit Anilinfarbstoffen und Säurefestigkeit gegenüber 33procentiger Salpetersäure nach. Er re- sumirt : „Es spricht gegen die Annahme , dass der Fettgehalt den Tuberkelbacillen die charakteristische Sonderstellung verleiht, erstens, dass auch die fast vollkommen entfetteten Tuberkelbacillen die Reaction geben, zweitens, dass fetthaltige andere Bacterien absolut nicht dieselbe Reaction geben. Auf der anderen Seite spricht für die Vermuthung, dass die Tuberkelbacillen ihrem Chitingehalt gerade diese specifische Farbreaction verdanken, erstens, dass Chitin that- sächlich die Reaction giebt, und zweitens, dass ein sehr grosser Theil der Tuberkelbacillenleiber aus Chitin besteht." [Verf. dürfte mit seiner Theorie Recht haben. Uebrigens hat auch Abel bei Psoro- spermien die Färbbarkeit mit Tuberkelbacillenfärbung beschrieben. Ebenso verhalten sich Bacillen- und Pilzsporen, Lycopodiumkörner etc., ferner aber auch verhornte Epidermis und Haare. Ref. hat übrigens schon vor vielen Jahren bei Insecten auf Schnitten Färbbarkeit des Chitins nach Tuberkelbacillenfärbung gesehen.] Czaplewski (Köln). Schütze , A. , U e b e r den Nachweis von T y p h u s b a c i 1 1 e n in den F ä c e s und in der Milz nach dem Ver- fahren von Piorkowski (Zeitschr. f. klin. Med. Bd. XXXVIII, 1899, p. 39—45 u. Nachtrag p. 284). Schütze konnte mit dem PiORKOwsKi'schen Verfahren der Züch- tung auf Harngelatine in fünf Fällen von Typhus abdominalis die Typhusbacillen isoliren , während ein 6. als Typhus zunächst ange- sprochener, mit negativem Erfolg untersuchter Fall sich in der Folge als Parametritis ohne Typhus herausstellte. Auf der ersten Platte fanden sich in drei Fällen nach 20 bis 24 Stunden bei 22°, in den beiden letzten Fällen sogar schon nach 15 bis 16 Stunden bei schwacher Vergrüsserung neben den runden, braungelben, scharf ab- gegrenzten Colonien des Bacterium coli etwa stecknadelkopfgrosse Gebilde, von deren hellglänzender Centrale einige Fasern, meist 2 bis 4 endständige Fädchen ausgingen. Dieselben waren auf Platte II nach 2 Tagen bei 22° oft unter Bildung von kürzeren oder längeren, häufig in spirochätenartiger Form sich darstellenden Ranken, zu deutlichen Ausläufern ausgewachsen und verliehen den Colonien das XVIII, 1. Referate. 99 Aussehen von Flagellaten, durch welches sie von den scharfrandigen, gelblichen , fein granulirten Colicolonien unverkennbar differenzirt waren. Die isolirten Colonien auf Platte III waren meist erst nach 48 bis 56 Stunden vollentwickelt und erinnerten unter dem Mikro- skop am ehesten an Rettige oder Radieschen mit ausserordentlich feinen und zarten nach allen Seiten gerichteten Ausfaserungen, wäh- rend auf den Platten mit gewöhnlicher Gelatine keine solche Unter- schiede gegenüber B. coli bemerkbar waren. Zur Differentialdiagnose und Identifizirung der abgestochenen Colonien als Typhusbacillen wurden folgende Kriterien benutzt: 1) sehr lebhafte Beweglichkeit im hängenden Tropfen nach 24 Stunden in Bouillon von 37°, 2) mikro- skopisch mehr schlanke Stäbchen mit abgerundeten Enden , z. Th. mit Kettenbildung , 3) keine Verflüssigung im Gelatinestich , 4) un- sichtbares Wachsthum auf Kartoffeln nach einem Tag bei 37° (im Gegen- satz zu Controlculturen auf derselben Kartoffel mit Coli), 5) keine Gasbildung im Gährungsröhrchen (Rückübertragung auf Harngelatine ; ausgefaserte Colonien), 6) keine Indolreaction, 7) geringe Säuerung, niemals Gerinnung der Milch, 8) speeinsehe Immunitätsreaction nach Pfeiffer positiv. — Einmal gelang Verf. auch die Isolirung aus der Milz etwa 4 bis 5 Stunden nach dem Tode. In Fall I waren die Typhusbacillen aus dem Stuhl gezüchtet , während Widal negativ war. CzapUwski [Köln). Kraus, E., Züchtung der Typhusbacillen aus dem Stuhl (Centralbl. f. allgem. Pathol. und pathol. Anat. Bd. XI, 1900, No. 21. p. 316) ] . Kraus benutzt zur Trennung des Typhusbacillus von B. coli die Unfähigkeit des Typhusbacillus Traubenzucker unter Gasbildung zu vergähren. Eine bis 2 Oesen Stuhl werden in 5 cc sterilen Wassers aufgeschwemmt, davon 3 Oesen auf 5 cc Wasser und davon 2 Oesen auf 5 cc Wasser übertragen. Hiervon wird 0*5 cc mit 5 cc ver- flüssigten Glycerinagar nebst 2 Procent Traubenzucker in Petrischale eine Platte gegossen und bei 37° 24 Stunden bebrütet. Xur tiefe Colonien wurden abgestochen. Die Colonien ohne Gasbildung er- wiesen sich als Typhus. — In der Discussion betont Löwit, dass auch der B. faecalis alkaligenes ausgeschieden werden müsse. Das neue PiROKOwsKi'sche Verfahren sei schwierig. Michaelis hat damit gute Resultate gehabt ; Kraus erwähnt im Schlusswort , dass er einen v ) XVIII. Congress f. innere Med. Wiesbaden 1900. Sitz. v. 19. April. 7* 100 Referate. XVIII, 1. Colistamm beobachtet, welcher auf Piorkowski's Harngelatine Aus- läufer wie ächter Typhus bildete. Cxaplewski (Köln). D. Botanisches. Pollacci, Gr., II biossido di zolfo come mezzo conser- vatore dei organi vegetali [Schwefeldioxyd als Conservirungsmittel für Pflanzen] (Atti del- l'Ist. Botan. dell'üniv. di Pavia 2 Ser. vol. VI, 1900, p. 165). Schwefeldioxyd empfiehlt sich durch verschiedene vorteilhafte Eigenschaften als Conservirungsmittel für pflanzliche Objecte. Am einfachsten ist es, die wässerige Lösung des Gases zu ver- werthen : die Objecte schrumpfen nicht, behalten ihre Elasticität und bleiben auch für histologische Untersuchungen geeignet, gehen aber oft ihrer Farbe verlustig. Sehr gute Resultate erzielte Verf. beim Conserviren der Pilze. Chlorophyll wird rasch zerstört , ohne dass dabei die Conservirungsfliissigkeit sich verfärbt. Die Farben der Blüten verhalten sich verschieden ; am besten widersteht die gelbe Färbung. Umständlicher ist die Aufbewahrung der Objecte im G a s e selbst; der Erhaltungszustand ist dafür auch ein besserer als bei Anwendung der wässerigen Lösung, vor allem bleiben die Farben besser erhalten (Versuche mit Armillaria , Blüten von Tagetes und Cirsium, Früchten von Taxus u. a.). Küster (Halle a. S.). Jahn , E. , Myxomycetenstudien. 1 . Dictydium u m b i 1 i - catüm Schrader (Ber. d. Deutschen Botan. Gesellsch. Bd. XIX, 1901, p. 97—115). Plasmodien wie Sporangien sind bei den Cribrarien und Dicty- dien durch eigenthümliche Körnchen gekennzeichnet, die Verf. als Dictydinkörner bezeichnet. Ihren mikrochemischen Charakter erhalten sie vorwiegend durch negative Merkmale. Auffallend ist vor allein ihre hohe Widerstandsfähigkeit gegen starke Säuren und Alkalien. Während im lebenden Plasma die Dictydinkörner dunkel gefärbt sind, verlieren sie bei Zusatz von Kalilauge, Salzsäure, Essigsäure etc. ihre Farbe ; auch in dem mit Alkohol oder Glycerin XVIII, 1. Referate. 101 conservirten Material sind sie, weil farblos, nicht aufzufinden, und erst nach Zusatz von Farbstoffen werden sie wieder sichtbar. Be- sonders die sogenannten Kernfarbstoffe werden von ihnen so be- gierig aufgenommen , dass es an eingebettetem und mikrotomirtem Material schwer hält, gute Kernfärbungen zu bekommen. Kach Fixi- rung mit Alkoholsublimat färben sich immer nur die Dictydinkörn- chen, die Kerne bleiben unsichtbar. Auch Fuchsin, Safranin, Gentiana- violett und Rutheniumroth werden von ihnen aufgenommen. Bei gleichzeitiger Anwendung von Fuchsin und Jodgrün werden das Plasma roth , die Körnchen grün. Gelingt es , die Kerne gleichzeitig zu färben, so werden bei der Anwendung von Safranin -Gentiana violett die Dictydinkörner roth, das Chromatin der Kerne blau. Die Körner verhalten sich also genau so wie sonst die Nucleolen der ruhenden Myxomycetenkerne , wenigstens hinsichtlich ihres physikalischen Ab- sorptionsvermögens. — Eiweissreactionen geben die Dictydinkörnchen niemals ; vermuthlich bestehen sie aus einer ungewöhnlich widerstands- fähigen Modification der Cellulose. — Die Kerne von Dictydium sind ausserordentlich klein. Die für Untersuchungen an Myxomyceten im allgemeinen so brauchbare alkoholische Sublimatlösung gestattet der eben besprochenen Körnchen wegen keine Kernfärbung. Man fixire vielmehr das Material mit Flemming's Gemisch und färbe die Kerne mit Hämatoxylin oder Safranin - Gentiana violett. In Safranin- lösung können die Schnitte beliebig lange verweilen, dann werden sie mit Salzsäurealkohol differenzirt und kurz in Gentianaviolett ge- taucht, das die Kerne deutlich färbt. — Karyokinesen konnte Verf. nicht beobachten. Küster {Halle a. 8.). Harper , R. A. , Sexual reproduction in Pyronema con- fluens and the m Orphol ogy of the ascocarp (Ann. of Bot. vol. XIV, 1900, p. 321). Ausser den beiden Modifikationen der FLEjniiNG'schen Fixirungs- tlüssigkeit machte Verf. Versuche mit Hermanx's und Merkel's Ge- mischen und den Sublimatpräparaten von Kaiser und Wilson. Merkel's Flüssigkeit gab stets die besten Resultate, wenn es sich um die Fixirung jugendlichen Materials handelte. Osmiumhaltige Flüssigkeiten verwandelten das Plasma, besonders im Oogonium , in eine dichte , undifferenzirte Masse , welche bei Versuchen zu tinetio- neller Differenzirung grosse Schwierigkeiten machte. Verf. vermuthet, dass gewisse, nicht näher bekannte Reservestoffe, die das Plasma des Oogoniums birgt, diese Umwandlung veranlassen. — Die mit 102 Referate. XVIII, 1. Sublimatlösungen fixirten Objecte lieferten gute Bilder, Hessen sieh aber mit Anilinfarben nicht gut färben. Man wähle daher lieber Eisenhämatoxylin zum Färben, das gute Resultate giebt. — Zu be- vorzugen bleibt gleichwohl Merkel's Flüssigkeit zum Fixiren und nachfolgende Färbung mit Säurefuchsin und Jodgrün, wenn es sich um jugendliche Stadien handelt, mit Flemming's Dreifarbengemisch bei älterem Material. ■ — Die Kerne im Ascus sind besonders deut- lich sichtbar in Objecten , die mit Flemming's (schwächerer) Lösung fixirt und nach Flemming's Methode gefärbt sind. Küster (Halle a. S.J. Kilider m anil , V. , Ueber das sog e n a n n t e Bluten der Fruchtkörper von Stereum s a n g u i n o 1 e n t u m Fries (Oesterr. Botan. Zeitschr. Bd. LI, 1901, p. 32). Zur Fixirung benutzte Verf. Alkohol, Pfeiffer' sehe Flüssigkeit 1 und eine Mischung von Wasser und Carbolsäure. Bei Untersuchung trockenen Materials gab Amann's Methode 2 gute Resultate. Nach Kochen mit Kalilauge färbten sich die Wände der „Gerbstoffhyphen" violett mit Chlorzinkjod, die anderen Hypken gaben keine Reaction, vielleicht wegen ihres höheren Chitingehaltes. Küster (Halle a. S.). G ruber , E. , Ueber das Verhalten der Zellkerne in den Zygosporen von S p o r o d i n i a g r a n d i s Link (Ber. d. Deutschen Botan. Gesellsch. Bd. XIX, 1901, p. 51—55). Von allen verwandten Fixirungsflüssigkeiten gab bei Unter- suchung der Zygosporenentwicklung von Sporodinia das vom RATH'sche Pikrin- Osmium -Platinchlorid -Essigsäuregemisch gute Resultate. Bei jüngeren Stadien Hess Verf. eine im Verhältniss von 1 zu 1 ver- dünnte Lösung etwa eine halbe Minute auf die Objecte wirken; ältere, schon mit einer harten, cutinisirten Schale umgebene Zygo- sporen wurden in einer Lösung von 1 zu 10 eine bis 2 Minuten gekocht und dann noch einer 12- bis 24stündigen Einwirkung der ') Vgl. diese Zeitschr. Bd. XI, 1894, p. 528. 2 ) Amann, J. , Nouvelles methodes de preparation des cryptogames cellulaires vertes (Journ. de Bot. t. X, 1896, p. 187 und diese Zeitschr. Bd. XIII, 1896, p. 18). Ueber Amann's Lactophenolmischung vgl. diese Zeitschr. 1. c. XVIII, 1. Referate. 103 Flüssigkeit überlassen. — Zum Färben der Schnitte empfiehlt sich besonders Heidexhaix's Eisen -Hämatoxylin- Methode. Küster (Halle a. 8.). Prowazek, S., Kern th eilung und Vermehrung der Poly- toma (Oesterr. Botan. Zeitschr. 1901, p. 51 — 60). Die Geis sein sah Verf. einer „knopfförmigen , mit Eisen- hämatoxylin schwarz sich färbenden, aber leichter in der Beize sich wieder entfärbenden plasmatischen Differenzirung" entspringen. Die feinen , fadenförmigen Structuren , die von dort aus gegen den Kern hin verlaufen , sind am besten an den mit Rath's Piki'insnbliniatosmiumessigsäure fixirten Flagellaten sichtbar. — Bei Kernuntersuchungen wurden die Polytomeen in Gläschen, wie sie für Untersuchung von Harnsedimenten verwendet werden , con- servirt (Rath's Gemisch), mit Cori's Handcentrifuge centrifugirt und in den erwähnten Gläschen bis zur Paraffineinbettung weiter be- handelt. Die Schnitte werden mit Heidexhaix's Eisenhämatoxylin mit oder ohne Bordeauxroth-Vorfärbung tingirt. Küster (Halle a. S.). Timlberlake, H. <*. , Swarm spore formation in Hydro- dietyon utriculatum Roth (Botan. Gazette vol. XXXI, 1901, p. 203). Fixirung mit einem Gemisch von 100 Th. 0'5procentiger wässe- riger Iridiumchloridlösung mit 1 Th. Eisessig oder 100 Th. einpro- centiger Iridiumchloridlösung mit 3 Th. Eisessig. Käster (Halle a. S.). Hansteeu, B. , Ueber das Fucosan als erstes schein- bares Pro du et der Kohlensäureassimilation bei den Fucoideen (Pringsheim's Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXXV, 1900, p. 611). Verf. vertheidigt seine Auffassung gegen Crato's Einwände, der in Haxsteex's „Fucosankörnern" lebende selbständige Zellorgane (Physoden) sah. Nach Verf. sind jene vielmehr Assimilationspro- duete und identisch mit Schmitz' Phäophyceenstärke. Ihre i n t r a - vitale Färbung gelingt mit Methylviolett. Verf. beliess mög- lichst unbeschädigte Pflänzchen von Pylaiella littoralis in grossen Mengen Seewassers, welches 0*0005 Procent Methylviolett gelöst ent- hielt. Die Pflanzen wurden 16 Stunden im Dunkeln gehalten. Aelin- 104 Referate. XVIII, 1. lieh verfuhr Verf. mit Elachista fucicola, die 22 Stunden im Dunkeln und in Seewasser mit 0*0003 Procent Methylviolett verblieb. Die Fucosankörnchen färben sich deutlich violett. Küster (Halle a. 8.). Smith , ß. W. , The achromatic spindle in the spore mother cells of Osmunda regalis (Botan. Gazette vol. XXX, 1900, p. 361). Verf. fixirte mit Chromessigsäure (einprocentige Chromsäure, O'75procentige Essigsäure) und Flemming's (schwacher) Lösung. Die chromatischen Elemente färben sieh gut mit Jodgrün - Fuchsin , die achromatischen Fasern werden nach Behandlung der Präparate mit Safranin-Grentianaviolett deutlich. Küster (Halle a. 8.). Timberlake, H. Gr., The development and funetion of the cell p 1 a t e in higher p 1 a n t s (Botan. Gazette vol. XXX, 1900, p. 73—99). Ausser den bekannten Fixirungsmitteln von Flemming, Hermann, vom Rath und Keiser wurde Worcester's Mischung (Sublimat, For- malin, Essig- und Ameisensäure) verwendet. Die stärkere Flemming sehe Mischung gab die besten Resultate. Damit beim Entwässern der Präparate keine Plasmolyse eintritt , lasse man die Objecte in den schwächeren Alkoholgraden nur kurze Zeit verbleiben: 30 Mi- nuteu in löprocentigem, 45 Minuten in 30procentigem, eine Stunde in 50procentigem Alkohol als längste zulässige Zeitdauer. Gegen höher-procentigen Alkohol sind die Objecte minder empfindlich. Die mit Osmium-haltigen Flüssigkeiten fixirten Objecte wurden nach Flemming's Dreifarbenmethode gefärbt ; nach Fixirung mit Sublimat verwandte Verf. Zimmermannes Jodgrüufuchsin oder Heiden- hain's Hämatoxylin mit Bordeauxroth -Vorfärbung. Küster (Halle a. 8.). 3Iolisch, Th., Studien über den Milchsaft und Schlei m- saft der Pflanzen. Jena (Fischer), 1901. 111 pp. 8° m. 33 Figg. Das vorliegende Werk bringt eine Fülle neuer Angaben über die Milchröhren, den lebenden Theil ihres Inhalts und deren leblose Producte, über die chemischen Charaktere der Milchsäfte und der bei Monokotyledonen häufigen Schleimsäfte. Im „Anhang" wird über die Aloeharzbehälter berichtet. — - Von den Mittheilungeu , die vor- XVIII, 1. Referate. 105 zugsweise mikrochemisches und mikrotechnisches Interesse haben, wollen wir nur folgende hervorheben. Die Leukoplasten, durch deren Thätigkeit die im Milchsaft enthaltenen Stärkekörner entstehen, sind an fast oder ganz aus- gewachsenen Stärkekörnern oft schlecht nachzuweisen. Bei Zutritt von Wasser blähen sie sich sofort auf und werden dabei deutlich wahr- nehmbar. Gute Dienste leistet Anilinblau oder Säurefuchsin in sehr verdünnter wässeriger Lösung, welche die änsserste Grenzmembran der aufgeblähten Leukoplasten scharf hervortreten lässt. — Im Milch- saft von Hura crepitans macht Jodjodkalium bereits die Leukoplasten sichtbar. Zum Maceriren der Milchröhren und ihrer Nachbarzellen be- nutzte Verf. die von Richter 1 empfohlene Methode : Die Einwirkung heissen Ammoniaks lässt die Stärkekörner intact. Aehnlich wie die Entstehung der Stärkekörner ist auch die der Eiweisskörner , wie Verf. feststellen konnte, an lebende Gebilde geknüpft, die Prot ein o- p las ten. Ihr Nachweis wird erleichtert, wenn man sie durch Zu- satz von Wasser zur Quellung bringt. Die Stäbchenstructur der Eiweisskörner mache man durch Zusatz alkalisch reagirenden Wassers (Kaliumhydrat, Ammoniak !) deutlich. Der Lep tomingehalt der Milchröhren lässt sich durch die von Raciborskt' 2 angegebenen Methoden nachweisen. Für mikroskopische Zwecke hält Verf. folgende Methode als empfehlenswerth. Alkoho- lische löprocentige Lösung von a-Naphtol wird so weit mit Wasser verdünnt, bis a-Naphtol auszufallen beginnt. Dann setzt man so viel Alkohol zu, bis das ausgefallene «-Naphtol sich wieder löst. In dieser Lösung belasse man die Schnitte 3 bis 12 Stunden. Die Reaction tritt zwar langsam auf aber sehr intensiv , und sie währt viel länger. Entgegen Raciborski's Angaben konnte Verf. nach- weisen, dass eine Localisation des Leptomingehaltes auf Milchsaft und Leptom keineswegs die Regel ist. Auch Bast- , Kollenchym-, Phellogen- und Epidermiszellen gaben bei den verschiedensten Pflan- zen Leptominreaction. Ueberdies ist die Vertheilung des Leptomins mit Raciborski's Guajak-Wasserstoftsuperoxyd-Methode nur schwierig zu ermitteln, da auch die den leptoininführenden Zellen benachbarten Elemente leicht sich bläuen. Die a-Naphtohnethode verdient als die prägnantere den Vorzug. x ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVII, 1900, p. 123. -) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XV, 1898, p. 390, 392, 516. 106 Referate. XVIII, 1. Der Gehalt der Milchsäfte an A 1 k a 1 o i d e n wird durch folgende Reaction nachgewiesen. Werden frische Längsschnitte durch die Wurzel mit lOprocentiger Salzsäure behandelt, so wird der orangerothe Milchsaft grösstentheils in Krystalle von orangerother oder gelbbrauner Farbe um- gewandelt. Sie bilden sich in so grosser Menge, dass der Verlauf der Milchröhren durch continuirliche Züge von Krystallen angedeutet wird. In den Schleimsäften vieler Amaryllideen und Liliaceen, ferner von Commelinaceen, Gramineen und Lobeliaceen konnte Verf. einen neuen Stoff nachweisen, dessen auffällige Reactionen ihm den Namen „Luteofilin" eingetragen haben. Lässt man ein Schleimtröpfchen z. B. von Clivia nobilis auf dem Objectträger eintrocknen , so bilden sich Sphärokrystalle von wechselnder Grösse, die in Wasser löslich, un- löslich in absolutem Alkohol, Aether u. s. w. sind. Besonders chara- kteristisch ist die Reaction, die sie mit wässeriger Kalilauge geben. Bei Einwirkung einer etwa 20procentigen wässerigen Lösung von Kaliumhydroxyd verschwinden die Sphärite ; es entstellt ein cana- riengelber, krystallinischer Brei; in der Nähe der Sphärite bilden sich rundliche oder wurzelähnliche Krystalle, in weiterer Entfernung körnige Niederschläge oder eigenartige haarartige Bildungen; eine Art von Filz von geschlängelten, oft ausserordentlich feinen gelben Fäden, die lebhaft an ein Pilzmycelium erinnern. Sie erscheinen, ebenso wie die anderen krystallinischen Bildungen, im durchfallenden Licht canariengelb , im auffallenden blau. Bei dieser Reaction werden auch die Calciumoxalat-Raphiden gelb. Den Aloi'ngehalt der Harzbehälter von Aloe socotrina u. a. kann man bequem zum Auskrystallisiren bringen , wenn man den Safttropfen mit einem Tröpfchen Glycerin mischt und ihn einen oder mehrere Tage unter dem Deckglas belässt. Die auskrystallisiren- den Sphärite lösen sich in concentrirter Salpetersäure mit tief rother Farbe, Bromdämpfe färben die feuchten Krystalle tief kirschroth, mit Kalilauge und Ammoniak geben sie eine braungelbe Lösung, die sich bei Luftzutritt roth färbt. Im ausgeflossenen Saft der Aloeblätter und in Querschnittspräparaten erhielt Verf. auch unter Einwirkung anderer Oxydationsmittel, wie einprocentiger Chromsäurelösung, Chlor, Chlorkalk, Jod und verdünntem Eisenchlorid, intensive Rothfärbung. Von den ungewöhnlich geformten Zellkernen, die Verf. in Milch- und Schleimsäften und in den Aloeharzbehältern fand, war in dieser Zeitschrift bereits die Rede. 1 Küster {Halle a. 8.). x ) Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVI, 1899, p. 508. XVIII, 1. Referate. 107 Nemec , B. , Die R e i z 1 e i t u n g und die reizleitenden Structuren bei den Pflanzen. Jena (Fischer), 1901. 153 pp. Die Fortpflanzung des Reizes innerhalb der Pflanzenorgane ver- mitteln nach Verf. besondere plasmatische Stränge in den einzelnen Zellen, deren Beobachtung bei Anwendung verschiedener Methoden gelingt. Geeignet fand Verf. Vitalfärbung mit Methylen- blau. Die Längsschnitte (durch Würzelspitzen vom Allium Cepa etc.) werden in einprocentige wässerige Lösung von Methylenblau gebracht. Das Plasma färbt sich zunächst sehr schwach diffus blau, bis plötz- lich in seinen Strängen feine, intensiv blaue Fasern sichtbar werden, die sich von einer Querwand bis zur anderen verfolgen lassen. Dieser Zustand dauert nur wenige Secunden, später wird die Fär- bung wieder diffus, und es treten deutliche Desorganisationserschei- nungen auf. Aehnlich wie bei Färbung der Nervenfasern nach der- selben Methode handelt es sich, wie Verf. hervorhebt, auch bei Färbung pflanzlicher Gewebe mit Methylenblau nicht um eine „eigent- liche" Vitalfärbung, vielmehr um eine Färbung während des Ab- sterbens. Trotzdem giebt Verf. diesen Beobachtungen eine besondere Bedeutung, „weil sie später die an fixirten Objecten beobachteten Structuren nicht als Artefacte deuten Hessen und eine Beobachtung in vivo doch ein immer anzustrebendes Ideal ist". — Vorteilhaft ist es bei Anwendung der beschriebenen Methode, die Schnitte wo- möglich bald zum Absterben zu bringen ; Zusatz von Ammoniak wirkt hierbei fördernd. Das von Bethe benutzte Molybdän-Ammoniumver- fahren lieferte keine befriedigenden Resultate. Die Mehrzahl seiner Untersuchungen hat Verf. an fixirtem und gefärbtem Material vorgenommen. Zum Fixiren dienten Pikrineisessig- schwefelsäure, Flemming's Gemisch, Chromessigsäure, Alkohol und Al- koholeisessig (98 : 2), zur Stückfärbung Paracarmin und Hämalaun, zur Schnittfärbung Heidenhain's Eisenalaunhämatoxylin , Flemming's Dreifarbengemisch und die Combination von Smaragdgrün und Fuch- sin S nach vorheriger Tanninbeizung. Sehr gut bewährte sich Ueber- färbung mit Fuchsin S , nach der die Präparate einen bis 2 Monate dem Licht ausgesetzt wurden. — In den plasmatischen Strängen, welche Verf. für reizleitende hält, lassen sich bei 400- bis öOOfacher Vergrösserung faserige, längs verlaufende Structuren nachweisen. Nach Fixirung mit Pikrineisessigschwefelsäure und durch Färben mit Paracarmin werden sie gelblich oder sehwach rosa, das übrige Plasma ist fast gar nicht gefärbt. Nach Fixirung mit Chromessigsäure 108 Referate. XVIII, 1. und Durchfärbung mit Paracarmin sind die Stränge ebenso schwach rosa gefärbt wie das übrige Plasma ; ebenso fixirt und mit schwacher Lösung von Delafield's Hämatoxylin gefärbt, erscheinen sie fast schwarz faserig, das übrige Plasma wenig schwächer, violett, körnig. Mit Pikrineisessigschwefelsäure und Heidenhain's Eisenalaunhämat- oxylin behandelt werden sie dunkelviolett bis schwarz, nachgefärbt mit Orange G schmutziggelb. Flemming's Farbgemisch wirkt verschie- den; an Präparaten mit rein rothen Nucleolen sind auch die Plasma- stränge roth , bei längerer Einwirkung des Orange G werden sie gelb. Fuchsin S färbt die Stränge dunkler roth als das übrige Plasma — die Fäden, aus welchen die Plasmastränge gebildet sind, werden von einer „Scheide" umschlossen, die sich durch besondere Uhtersuchungsmethoden deutlich sichtbar machen lässt. Die homogene Fibrillensubstanz verhält sich im allgemeinen erythrophil. Präparate von Material, das mit Chromessigsäure oder Flemming's Gemisch fixirt war, zeigen eine meist deutlich erythrophile innere Faser und eine kyanophile Scheide , nach Fixirung mit Pikrineisessigschwefel- säure dagegen erschien der von den Scheiden umgebene Raum farb- und structurlos. Küster (Halle a. S.J. Mäule, C, Das Verhalten verholzter Membranen gegen Kaliumpermanganat, eine H o 1 z r e a c t i o n neuer Art (Fünfstück's Beitr. z. wiss. Botan. Bd. IV, 1900, p. 17G— 185). Czapek's Arbeiten über die sogenannten Ligninreactionen 1 hatten die Untersuchungen über den Chemismus verholzter Membranen zu einem gewissen Absehluss gebracht : es war endlich gelungen, den chromogenen Bestandtheil verholzter Zellhäute, der die Phloro- glucin- Salzsäure -Reaction und viele andere bedingte, in seinem chemischen Charakter zu erkennen, sogar ihn zu isoliren. Die vom „Hadromal" befreiten Membranen gaben keine Phloroglucin- Salzsäure- etc. Reactionen mehr. Die bisherigen „Ligninreactionen" waren somit als Reactionen auf Hadromal erkannt. Mit einer „Holz - reaction neuer Art" macht Verf. in der vorliegenden Arbeit be- kann. Lässt man auf verholzte Gewebe Lösungen von übermangan- saurem Kali einwirken und wäscht hiernach mit Wasser aus, so sind die verholzten Membranen gelb bis braun gefärbt. Man entfärbt sie wieder durch Zusatz von Salzsäure und setzt dann Salmiakgeist ') Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVI, 1899, p. 119. XVIII, 1. Referate. 109 hinzu : die verholzten Membranen zeigen sich nun tiefroth gefärbt, die anderen bleiben hell. Die Einwirkung des Manganats darf nicht zu lange währen, da sonst die »Salzsäure erst nach stundenlanger Einwirkung sie entfärbt und die Rothfärbung sich gar nicht oder nur unvollkommen erzielen lässt. So behandelte Membranen zeigen fast reinen Cellulosecharakter (Chlorzinkjodprobe, löslich in Kupferoxyd- ammoniak). — Verf. empfiehlt 1 g Manganat in 100 cc Wasser zu lösen. Die Schnitte verbleiben in dieser Normallösung fünf Minu- ten, Salzsäure entfärbt sie in 2 bis 3 Minuten. Nach Zusatz von Ammoniak oder über den Hals der Ammoniakflasche gehalten, färben sie sich bald roth. Will man die Reaction beschleunigen, so koche man die Schnitte auf dem Objectträger in der Manganatlösung , die alsdann aber nur wenige Secunden auf die Schnitte einwirken darf. — Statt Ammoniak sind auch Kali- oder Natronlauge brauchbar. Die Hauptbedeutung der Manganatreaction sieht Verf. darin, dass sie auch dann noch eintritt , wenn die Phloroglucin - Salz- säure- und andere Reactionen versagen , weil der Träger derselben, das Hadromal, in der Membran zerstört ist. Gewebe, die durch einen Aufenthalt in Hydroxylaminlösung (Seliwanoff's Methode) ihren Hadromalgehalt verloren haben , färben sich sehr intensiv mit Man- ganat. (Bei Anwendung der letzteren wird übrigens das Hadromal ebenfalls schon zerstört.) Man wird annehmen müssen, dass der Man- ganatreaction ein Zersetzungsproduct des Hadromals zu Grunde liegt — oder ein anderer, selbständiger Stoff. Für die zweite Annahme spricht die Thatsache, dass keineswegs alle Gewebe sich Phloroglucin und Salzsäure gegenüber ebenso verhalten wie bei Anwendung der Manganatreaction. Die verholzten Bastbündel im Blattstiel von Galactodendron utile z. B., welche kein oder wenig Hadromal ent- halten, geben intensive Manganatreaction. „So müssen wir im Hadromal einen zwar ständigen Begleiter der verholzten Substanz ansehen, ohne dass aber diesem Stoff die verholzende Wirkung zuzuschreiben ist." Eine Möglichkeit bleibt es auf jeden Fall, dass der Manganat- reaction das vielgesuchte Lignin oder ein Derivat von diesem zu Grunde liegt. Die Dauer der Manganatwirkung ist zum Erzielen einer guten Reaction bei verschiedenen Pflanzen, ja sogar bei verschiedenen Ge- weben der nämlichen Pflanze verschieden lang zu bemessen. — Ab- weichendes Verhalten zeigen die Coniferen, deren Hadromalgehalt dem Manganat wie der Hydroxylaminlösung ausserordentlich lange widersteht. Anwendung heisser Manganatlösung ist bei ihnen aus- HO Referate. XVIII, 1. geschlossen. Kalte Lösung lasse man 6 bis 10 Minuten wirken und beobachte unter dem Mikroskop während der Ammoniak-Ein- wirkung, da nach allzu starker Manganatwirkung die entstehende Farbe schnell wieder in Lösung geht. Küster {Halle a, S.). Tison, A. , Methode nouvelle de coloration des tissus subereux (Comptes Rend. de l'Assoc. Franc, p. l'Avanc. des Sc. 1899, p. 454). Zum Färben verkorkter Membranen empfiehlt Verf. Gentiana- violett, Dahlia, Mangin's Säuregrün, Methylgrün und Pariser Violett, Zu den concentrirten alkoholischen Lösungen der Farbstoffe wird ge- rade so viel Ammoniak gesetzt, dass sich die Lösungen entfärben. Mit den verfärbten Flüssigkeiten werden die mit Eau de Javelle vor- behandelten Schnitte einige Minuten gefärbt und dann in 5- bis 10- procentige Salzsäure, Schwefelsäure oder Salpetersäure gebracht. Die verholzten Membranen färben sich nunmehr violett, beziehungsweise grün, die verholzten bleiben farblos. Die Schnitte können unmittel- bar in Glycerin übertragen werden. — Zu Doppelfärbungen benutze man ein Gemisch der genannten ammoniakalischen Lösungen mit wässeriger Solution von Congoroth. Küster (Halle a, S.). Pozzi-Essot, M. E., Contributions ä la rech er che micro- chimique des alcaloides (Comptes Rend. de l'Acad. des Sc, Paris t. CXXXI, 1901, p. 1062). Zum Nachweis und zum ldentificiren der verschiedenen Alka- loi'de dienen folgende Reactionen: Strychnin giebt mit Platin- chlorid sternförmig angeordnete Prismen (130 (Jt), mit Goldchlorid sehr zahlreiche Prismen in colonienähnlichen Verbänden, mit Jodjod- kalium grosse, tief olivengrüne Krystallgarben. Brucin giebt mit Platinchlorid sternförmige Prismen, Chinin mit demselben Reagens stark doppelbrechende Körnchen, mit Jodjodkalium kleine Prismen. Cocain bildet nach Zusatz von Platinchlorid dicht zusammengesetzte Prismen, mit Goldchlorid dendritisch geformte Krystallvereinigungen. Quecksilberjodid in Jodkalium gelöst giebt mit Cocain fast schwarz gefärbte Krystallrosetten , Atropin nach Zusatz von Jodjodkalium sehr reichlich 4 bis 5 /* grosse Krystallpaare , Morphin mit dem- selben Reagens distelkopfähnliche Krystallniederschläge. Küster (Halle a. S.). XVIII, 1. Referate. 111 Siim- Jensen, J. , Beiträge zur botanischen und phar- makognostischen Kenntniss von Hyoscyamus niger (Bibl. Botan., herausgeg. v. Luerssen, H. 51, 1901. — 90 pp. m. 6 Tun.). Von den üblichen Methoden zum Nachweis von Alkaloi'den fand Verf. nur einige für die ihm vorliegenden Objecte (Semina Hyoseyami) geeignet. — Jodjodkalium giebt gute Reactionen bei einer Concentration von 1:1: 200. Die Zellmembranen und der Zellinhalt fiirben sich alsdann nicht so tief wie bei Anwendung der üblichen stärkeren Concentration. Es empfiehlt sich, nach Zusatz des Reagens mit Chloralhydrat aufzuhellen. Ebenso verfahre man bei Verwendung von Kaliumwismuthjodid. „Ich habe," sagt Verf., „mit diesem Reagens nur dann zuverlässige Resultate erreichen können, wenn ich die frisch bereitete Lösung, unter Zusatz einer Spur Jodkalium, mit der 6- bis Tfachen Menge Wassers verdünnte." Andernfalls färbt sich Zellhaut und -inhalt zu intensiv. Gute Resultate gab ferner die Anwendung der von Barth benutzten Joddämpfe und der vom Verf. neu em- pfohlenen Bromkaliumlösung (20procentig, mit Brom gesättigt), welche an Empfindlichkeit gesättigtes Bromwasser um das 3- bis 4fache übertrifft: reine Alkaloi'de bleiben noch in Verdünnung von 1 : 100 000 nachweisbar. Auch innerhalb der Zellen werden die Alkaloi'de kry- stallinisch ausgefällt, und zwar am schönsten, wenn man das Deck- gläschen mit einem Wachsrand umgiebt." Küster (Halle a. S.). Pollacci, GL, Intorno ai metodi di ricercamicrochimica del fosforo nei tessuti vegetali [Ueber die Me- thoden zum mikrochemischen Nachweis des Phosphors in pflanzlichen Geweben] ( Atti del- l'Ist. Botan. dell'üniv. di Pavia 2 Ser. vol. VI, 1900, p. 15). Verf. bereitet das Phosphorreagens nach folgendem Recept: Von 15 g krystallisirtem molybdänsauren Ammonium werden mit ammoniakalischem Wasser 100 cc Lösung hergestellt, ferner wird eine Mischung von 70 Th. Salpetersäure (spec. Gew. 1'18) und 30 Th. Wasser bereit gehalten. Von beiden Lösungen mischt man gleiche Theile ; der beim Mischen auftretende Niederschlag löst sich beim Schütteln wieder. Nach Einwirkung des Reagens müssen die Schnitte gründlich ausgewaschen werden — mau versichere sich des- halb, dass das Spülwasser mit Zinnchlorür keine Blaufärbung mehr giebt — und kommen dann in 4procentige wässerige Zinnchlorür- 112 Referate. XVIII, 1. lösung. Die phosphorhaltigen Theile färben sich dabei blau. Verf. vertheidigt seine Methode gegen verschiedene Einwände, auch gegen den, dass Lecithin, Nuclei'n u. a. sich dem Nachweis durch das ge- schilderte Verfahren entzögen. Küster (Halle a. S.). Byxfoee , E. S. , The development o f t h e karyokinetic spindle in the pollen-mother-cells of Lavatera (Proceed. California Acad. Sei. 3. ser. Bot. vol. II , no. 2, 1900, p. 63—76 w. 4 pltes.). Als Fixirimgsmittel wurden verwandt : Flemming's starke Misch- ung, einprocentige Chromsäure, 2procentiges Eisenchlorid, Wilson's Sublimat- Essigsäure , Boveri's Pikrin- Essigsäure, Lixdsey's Kalium- bichromat- Platinchlorid- Osmiumessigsäure , einprocentiges Palladium- chlorid, O'öprocentiges Iridiumchlorid. Schwache Mischungen nach Flemming Hessen die Objecte stärker schrumpfen, ein weiterer Zu- satz von Essigsäure zu der starken Lösung gab die besten Resultate. Palladium- und Iridiumchlorid sind wenig empfehlenswerth. — Die Antheren blieben 24 Stunden lang in der Fixirungsflüssigkeit , wur- den dann 6 Stunden lang gewaschen und einen Tag lang in einen „Dehydrator" gebracht. In letzterem wurde das Wasser allmählich durch Alkohol verdrängt, bis die Objecte schliesslich in 95procen- tigem lagen, dann gelangten sie für je 6 Stunden in absoluten Alko- hol, Alkohol 1 Th. und Bergamottöl 1 Th., Bergamottöl, Bergamottöl 1 Th. und Paraffin von 47° 1 Th., Paraffin von 47°, Paraffin von 47° 1 Th. und Paraffin von 54° 1 Th. ; endlich in Paraffin von 54°. Die 3 bis 4 ju dicken Schnitte wurden am besten mit Flem- ming's Safranin-Gentianaviolett-Orange G tingirt, wobei in den Pollen- mutterzellen die Chromatinfäden blau , der Nucleolus roth werden. Im Cytoplasma sind zwei Componenten vorhanden; ein feines Netz- werk, welches dunkelblau gefärbt erscheint, und zarte Granula, die eine gelbbraune Farbe annehmen. Behrens. &' Juel , H. 0. , Beiträge zur Kenntniss der Tetrade n- th eilung (Prixg.sheims Jahrb. f. wiss. Bot. Bd. XXXV, 1900, p. 626). Beim Untersuchen der Samenanlagen von Larix bediente sich Verf. der FLEMMiNG'schen Fixirungsflüssigkeit (und zwar des stär- keren FLEMMiNGSchen Gemisches , aber mit nur der Hälfte des für dasselbe angegebenen Osmiumsäuregehaltes). Das Material wurde dann in der üblichen Weise behandelt, nur mit der Veränderung, XVIII, 1. Referate. H • > dass die Objecte aus dem Cedernholzöl in ein Gemisch von diesem mit Paraffinöl und dann in reines Paraffinöl kamen. Küster {Halle a. 8.). Campbell, D. H. , S tu dies on the Araceae (Ann. of Botan. vol. XIV, 1900, p. 1). Bei Untersuchungen der Blüten von Araceen erwies sich der in den Blütengeweben entwickelte Schleim als sehr störend , beson- ders bei Anwendung von wässerigen Fixirungslösungen. Verf. em- pfiehlt daher eine concentrirte Lösung von Sublimat in gewöhnlichem Alkohol, der gelegentlich noch 10 Procent Essigsäure zugesetzt wur- den. — Gute Doppelfärbungen der Mikrotomschnitte erhielt Verf. mit Bismarckbraun und Anilinwasser- Safranin. Küster (Halle a. S.). Zeitschr. f. -wiss. Mikroskopie. XVIII, 1. 114 Neue Literatur. XVIII, 1. Neue Literatur 1. Lehr- und Handbücher. Dommergue, G. , Traite pratique d'analyse chimique microscopique et bacteriologique des urines. Paris (Maloine) 1900. 8°. 4 fr. Hanausek, T. E., Lehrbuch der technischen Mikroskopie. 3. Lief. (Schluss). Stuttgart (Enke) 1901. 455 pp. 8° m. 256 Figg. Joseph, M., u. Loewenbaeh, G., Dermato-histologische Technik. Ein Leit- faden für Aerzte und Studirende. 2. Aufl. Berlin (Marcus) 1900. 125 pp. 8°. (Vgl. diese Zeitschr. Bd. XVIII, 1901, p. 26.) Kaiser, W. , Die Technik des modernen Mikroskopes. Ein Leitfaden zur Benutzung moderner Mikroskope für alle praktischen Berufe im Hin- blick auf die modernen Errungenschaften auch auf dem Gebiete der Bacterioskopie und unter besonderer Berücksichtigung der Fortschritte der österreichischen und reichsdeutschen optisch- mechanischen Werk- stätten. 2. Aufl. Wien (Perles) 1900. 1. Lief. 80 pp. 8°. 2 M. 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Und das kann nicht geschehen von Jemand, der sich in einiger Ent- fernung vom Projectionsschirme befindet, und der daher die feineren Linien nicht gut zu unterscheiden vermag. Ausserdem muss der Vortragende, beim Projectionsschirme stehend, während seiner Aus- einandersetzungen wenigstens bei starken Vergrösserungen fortwährend die Mikrometerschraube spielen lassen, wie das bei Beobachtungen unter dem gewöhnlichen Mikroskope auch nothwendig ist. Wenn man also oft stärkere Vergrösserungen beim Projections- Mikroskope benutzt, kann man die scharfe Einstellung nicht, wie bei der gewöhnlichen Projection von photographischen Bildern, dem Zeit8chr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 2. 9 130 Moll: Apparat zur Einstellung des Protections -Mikroskops. XVIII, 2. Gehülfen überlassen, der die Apparate bedient. Es muss dann un- bedingt der Vortragende selbst die scharfe Einstellung des Mikro- skopes vollständig beherrschen. Im Laboratorium zu Groningen sind Katheder und Projections- apparate in 6 Meter Entfernung von einander aufgestellt , während ausserdem die letzteren sich in einem vom Hörsaale getrennten Zimmerchen befinden. Am meisten auf der Hand liegend ist es natürlich , eine Ein- richtung herzustellen, welche es erlaubt, aus dieser Entfernung die Mikrometerschraube willkürlich hin und her zu bewegen. Man könnte das erreichen entweder durch elektrische Uebertragung, 1 oder ganz auf mechanischem Wege durch eine drehende Stange, oder mit Hülfe der sogenannten „biegsamen Welle", die an Bohrwerkzeugen ver- schiedener Art, zum Beispiel der Zahnärzte benutzt wird. Es standen dem aber Bedenken entgegen, hauptsächlich wegen der schlechten Construction der Mikrometerschraube des in Groningen vorhandenen Projections-Mikroskopes. Die ganze Einrichtung wurde geliefert von der bekannten Firma Newton & Co. in London, und ist in den Hauptsachen durchaus empfehlenswerth. Ein grosser Nachtheil dieser Apparate ist es aber, dass die Arbeit der Metall- theile derjenigen der besseren deutschen Werkstätten sehr wesent- lich nachsteht. Besonders die Mikrometerschraube leistet nicht im Entferntesten das, was man gegenwärtig von einer guten Construc- tion erwarten darf. Es sind nun bei starken Vergrößerungen und bei einer Entfernung des Projectionsschirmes von 6 Metern äusserst winzige Drehungen der Schraube genügend, um grosse Verschieden- heiten in der Einstellung hervorzurufen, und deshalb war von vorn- herein wenig Gutes auf diesem Wege zu erwarten. Auch war es nicht gut möglich, die Mikrometerschaube durch eine bessere zu ersetzen. So wurde ich darauf geleitet, eine andere Lösung der Schwierig- keit zu finden, und ich glaube, dass es mir gelungen ist, dieselbe in einfacher und zweckentsprechender Weise zu überwinden. Bekanntlich kann man durch Abänderung der Entfernung zwi- schen Ocular und Objectiv des Mikroskopes die Einstellung des x ) Auf dem im April 1901 in Rotterdam abgehaltenen Congress Nieder- ländischer Mediciner und Naturforscher hat Herr Prof. Einthoven einen Apparat arbeiten lassen, der nach diesem Princip construirt war, dessen Einrichtung mir aber sonst unbekannt ist. XVIII, 2. Moll: Apparat zur Einstellung des Protections- Mikroskops. i;;i Präparates verändern. Man erreicht auf diese Weise dasselbe Re- sultat wie durch Drehung der Mikrometerschraube , ja selbst ein etwas besseres, denn jede Verschiebung des Oculars entspricht einer sehr viel kleineren Bewegung der Schraube. Es ist also möglich, mit Hülfe des Oculars beim gewöhnlichen Mikroskop eine viel ge- nauere und feinere Einstellung zu erzielen. Ranvier 1 theilt denn auch mit, dass er an seinem Mikroskope eine Einrichtung hat an- bringen lassen , die es ermöglicht , das Ocular auf und nieder zu bewegen, und dass er dieselbe bei feineren Beobachtungen benutze. Natürlich kann man beim Projections -Mikroskop nach demselben Princip verfahren und, wie einige vorläufige Versuche sogleich zeigten, mit sehr gutem Erfolge. Zu einem solchen Versuche brachte ich einen festgestützten hölzernen Querbalken vor dem Projections-Mikroskope an. Dieser Querbalken trug einen ebenfalls hölzernen Schieber, in dem das Ocular befestigt wurde , während das Mikroskop , welches mit dem Querbalken gar nicht in Verbindung stand, nur das Objectiv trug. Wurde der Schieber hin- und herbewegt, so wurde das Ocular mehr oder weniger vom Objectiv entfernt; die Bewegungsbahn war etwa 5 cm. Die Bewegung geschah mittels eines Seiles , das ich , beim Schirme stehend, in der Hand hielt , und das mir erlaubte die Ent- fernung zwischen Ocular und Objectiv zu vergrössern. Die entgegen- gesetzte Bewegung fand , sobald die Spannung des Seiles aufhörte, durch entsprechend angebrachte Gewichte statt. Sogleich bei den ersten Versuchen erwies sich diese Einrichtung als sehr zweckmässig ; die scharfe Einstellung war mindestens ebenso leicht und genau regulirbar wie beim gewöhnlichen Mikroskop , und es war ausserdem sehr leicht , den Schieber in jeder beliebigen Stellung längere Zeit unbeweglich zu erhalten, wenn die scharfe Einstellung eines gewissen Niveaus beibehalten werden sollte. Es war somit das Princip der Einrichtung der Hauptsache nach sogleich gegeben, und es erübrigte nur, einen definitiven Apparat herzustellen, welchen ich jetzt beschreiben will. Dieser definitive Apparat ist ganz aus Metall gearbeitet; er ist in Figur 2 in Verbindung mit dem Mikroskop abgebildet. Bevor ich zur genaueren Beschreibung der Einzelheiten . die manchen Leser vielleicht nicht besonders interessiren werden, über- J ) Ranvier, L., Technisches Lehrbuch der Histologie, übersetzt von Nicati u. Wyss, Leipzig 1888, p. 9 f. ; vgl. Fig. 4 a. p. 10. 9* 132 Moll: Apparat zur Einstellung des Projections-Mikroskops. XVIII, 2. gehe, sei es mir gestattet vorher ein paar Worte zu sagen über den Theil des Apparates , der sich im Hörsaale befindet und welcher in der Figur 2 nicht zu sehen ist. Die beiden am Ocularschieber O 50 ioo somM. !■"'■-< I I I I , I I I I I 1 1 I 1 1 I 1. befestigten Seile, x die in der Figur nach oben laufen , vereinigen sich alsbald zu einem einzigen, das über eine Seilrolle geht, dann J ) Es wurde verzinktes Drahtseil von der Firma C. F. Rochlitz in Berlin benutzt. Die Dicke beträgt 2-1 mm. XVIII, 2. Moll: Apparat zur Einstellung des Protections- Mikroskops. 133 ganz oben im Hörsaale , horizontal nach der Schirmwand läuft, und sich dort neben dem Schirme an denjenigen Theil des Ap- parates anschliesst, welcher in Figur 1 in Projection und zum Theil im Durchschnitt dargestellt ist. Oben an der Wand befinden sich nämlich zwei Holzscheiben, die fest mit einander verbunden sind, und die beide am Rande eine ziemlich tiefe Rille besitzen, um das Herabgleiten der Seile zu verhindern. Die Doppelscheibe ist um eine Achse drehbar , welche in einem Metallbügel (a) an der Wand befestigt ist. Das vom Mikroskop kommende , horizontale Seil b ist nun in der Rille der kleinsten Scheibe befestigt, welche einen wirksamen Radius von 2*1 cm besitzt. Wird die Scheibe nach rechts gedreht , so wird damit das Seil heraufgezogen und also das Ocular dem Schirme genähert. Es findet dieses aber statt , wenn der Vortragende an dem herabhängenden Griffe c zieht, der durch ein Drahtseil mit der grösseren Scheibe d verbunden ist. Der Radius dieser Scheibe beträgt 10'5 cm. Es hat die Ein- richtung einen doppelten Zweck. Einestheils wird durch diese Ueber- tragung die Kraft, welche der Vortragende anwenden muss, um die Bewegung des Oculars zu vermitteln , äusserst gering. Es ist das nicht ganz ohne Bedeutung, da die Gewichte des provisorischen, hölzernen Apparates durch sehr starke Spiralfedern ersetzt wurden, welche einen ziemlich grossen Widerstand leisten. Der Hauptvortheil aber ist eine bedeutende Verfeinerung der Einstellungsbewegung. Die Bahn des Ocularschiebers ist bei dem definitiven Apparate 5*5 cm lang, aber die Hand des Vortragenden muss eine Strecke von etwa 26 cm zurücklegen, um den Schieber von der einen nach der anderen Seite der Bahn zu bewegen. Es ist ein Leichtes , während dieser Verschiebung das Ocular an zwanzig und mehr Stellen ruhen zu lassen, so dass in der That die scharfe Einstellung hier in relativ feinerem Grade als beim ge- wöhnlichen Mikroskop erreicht werden kann. Selbstverständlich ist es keineswegs nothwendig, die Doppel- scheibe neben dem Schirme oben im Hörsaale anzubringen. Die- selbe kann vielmehr überall in der Bahn des Seiles eingeschaltet werden, wo es aus örtlichen Rücksichten am bequemsten ist. Noch ein zweiter Punkt sei hier berührt. Es muss beim ge- wöhnlichen Mikroskop am Anfang der Beobachtung die Mikrometer- schraube einen mittleren Stand haben, damit man ebenso gut auf höher wie auf tiefer gelegene Niveaus des Präparates scharf ein- stellen kann. Ebenso soll das auch beim Projections-Mikroskop der 134 Moll: Apparat zur Einstellung des Projections- Mikroskops. XVIII, 2. Fall sein. Es muss daher, bevor der Apparat in Benutzung ge- nommen wird, der Ocularscbieber in einem mittleren Stande fest- gebalten werden. Der Gehülfe beim Apparat besorgt dann mittels der Mikrometerschraube so gut wie möglich die scharfe Einstellung, etwa in der Mitte des Präparates , und dann wird weiter die Einstellung vom Vortragenden selbst übernommen, wobei es dann natürlich nöthig ist, das Ocular in beiden Richtungen bewegen zu können. Es wird dies in einfachster Weise erreicht durch die Einrich- tung des in Figur 1 im Längsschnitte abgebildeten Griffes , dessen Ring (d), wenn die Projection eines Präparates beendet ist, von dem Vortragenden auf den Nagel e geschoben wird. Dieser Nagel ist in geeigneter Höhe in der Zimmerwand befestigt. Ist die Länge des Seiles richtig bemessen, so wird also bei Nichtbenutzung des Apparates das Ocular stets eine mittlere Stellung einnehmen. Um , diese Stellung noch genauer reguliren zu können , befindet sich in dem hohlen Griffe eine verschiebbare Stange (/"), welche sich durch eine Schraube (g) in jeder beliebigen Lage fixiren lässt. Da die Doppelscheibe hoch oben im Hörsaale befestigt ist, be- findet sich der Griff an einer langen Schnur, so dass der Vortragende, während er die Einstellung regulirt, frei vor dem Schirme sich hin- und herbewegen kann, sofern das nöthig ist, um bestimmte Theile eines Präparates dem Auditorium zu zeigen. Wie man sieht, ist die ganze Einrichtung sehr einfach und zweckentsprechend. Es sei mir aber erlaubt, auf einen Nachtheil hinzuweisen. Es findet nämlich bei der Verschiebung des Oculars bekanntlich eine kleine Aenderung in der Vergrösserung und in der Lichtintensität des Feldes statt ; diese aber sind so geringe, dass sie für das Auditorium keineswegs von Belang sind, meist vielleicht gar nicht einmal die Aufmerksamkeit der Hörer auf sich lenken. Je weiter das Ocular vom Objectiv entfernt wird, desto stärker wird die Vergrösserung und desto geringer die Lichtintensität. Es werden aber auch die Acnderungen der Einstellung, welche man erzielt, relativ geringer, je weiter das Ocular vom Objectiv entfernt wird. Es ist somit nötbig, die normale Lage des Oculars nicht in die Mitte seiner Bahn zu verlegen, sondern sie etwas mehr nach der Seite des Objectivs zu verschieben. Die Erfahrung hat gelehrt, dass die mittlere Stellung am besten so auf der 5*5 cm langen Bahn gewählt wird, dass eine Bewegung von etwa 2*2 cm nach der Mikroskopseite und 3"3 cm nach der XVIII, 2. Moll: Apparat zur Einstellung des Projections- Mikroskops. 135 Schirmseite möglich ist. Diesen Stand kann man am Apparate ein- für allemal durch ein paar Striche markiren. Eine andere Frage ist die , wie weit die Entfernung zwischen Ocular und Objectiv im Mittelstande sein soll. Weil die Helligkeit des Bildes bei Mikroprojectionen ein Alles beherrschender Factor ist , könnte man geneigt sein , diesen Abstand zu verringern. Das würde aber durchaus verfehlt sein, denn die Linsen werden dadurch in ihrer Wirkung sehr beeinträchtigt. Es sind deshalb die Maasse des Apparates so gewählt worden, dass in der oben besprochenen mittleren Stellung die Entfernung zwischen Ocular und Objectiv die- selbe ist wie beim Mikroskoptubus, der ursprünglich dem Instrumente beigegeben war, und dessen Länge 15*5 cm beträgt. Ich gehe jetzt zu der genaueren Beschreibung des Apparates über, so wie er im Laboratorium zu Groningen ausgeführt worden ist, und wie er in Verbindung mit dem Projections - Mikroskop in Figur 2 abgebildet ist. Das Mikroskop ist das im Verzeichniss der Firma Newton & Co. unter dem Namen „Patent electric lantern microscope and micro- polariscope 110. 5350" aufgeführte. Man sieht in der Figur den schweren Metallbalken (a), auf dem das Mikroskop ruht. Er ist vcrl »linden mit der grossen, drehbaren Laterne, welche im Katalog als „Newton's uew patent triple rotating electric lantern no. 5345" verzeichnet ist. Der ganze Apparat ist so aufgestellt, dass er sehr leicht hin- und hergeschoben werden kann. Der Metallbalken (a) wird in einer ebenfalls metallenen Gabel (b) durch eine Schraube (c) festgehalten. Die beiden Enden dieser Gabel sind an der Wand des Projectionszimmers befestigt. Es hat sich gezeigt, dass sonst, ganz unabhängig von der Art der scharfen Einstellung sehr unan- genehme Erschütterungen des Bildes vorkommen. Denn es ist noth- wendig, die Laterne während der Projectionen mit starker Ver- grösserung ab und zu zu berühren, weil der übrigens automatisch centrirenden Lampe in solchen Fällen gelegentlich mit der Hand nach- geholfen werden muss. Auf dem Balken a kann nun der Körper d durch Zahn und Trieb bewegt werden. Die Schraube e dient also zur groben Ein- stellung. Am Körper d befindet sich bei f die Mikrometerschraiibe. indem dieser Körper im ursprünglichen Apparat den Mikroskoptubus mit dem Objectiv (g) und dem Ocular (h) trägt. Wie aus der Figur ersichtlich , ist dieser Tubus jetzt in zwei Theile zerlegt, einen Objectivtubus (?'), der am Mikroskop befestigt 136 Moll: Apparat zur Einstellung des Projections -Mikroskops. XVIII, 2. ist, und einen dünneren Oeulartubus (&), der sich auf dem Schieber des neu hinzugefügten Apparates befindet. Beide sind ungefähr gleich lang (12 cm), so dass Objectiv und Ocular sehr weit aus einander geschoben werden können, ohne dass IC störende Lichtstrahlen ins Innere des Tubus ihren Weg finden. In der Figur sind beide in der oben besprochenen mittleren Stellung abgebildet. Ich gebe nun zur Beschreibung des neuen, das Ocular tragen- den Apparates über. Dieser ist auf einem ziemlich schweren, guss- XVIII, 2. Moll: Apparat zur Einstellung des Projections -Mikroskops. 137 eisernen Querbalken (l) befestigt, der von den senkrechten Holz- balken (m) der Wand des Projectionszimniers getragen wird. Diese, vor dem Apparate selbstverständlich durchlöcherte Wand ist in der Figur weggelassen. Da während der Vorlesung oft die Projection mikroskopischer Präparate mit anderen Projectionsformen gewechselt werden muss , ist es nothwendig , den ganzen Apparat sehr schnell entfernen zu können. Dazu hat der Querbalken am linken, in der Figur nicht sicht- baren Ende ein Charnier, so dass er nach oben gedreht und in schiefer Stellung durch den Haken (n) festgehalten werden kann. Am rechten Ende ist der Querbalken durch eine Feder (0) befestigt und ruht auf einer Stellschraube , welche gestattet, die Feder stets genau über den Balken einschnappen zu lassen, so dass jeder un- nütze Kaum vermieden ist. Mit den Querbalken an ein Stück gegossen ist die Platte (79), welche zwischen zwei, eine Schwalbenschwanzführung bildenden Leisten (y) den eigentlichen Schieber trägt, dessen Basalplatte in der Figur nicht deutlich sichtbar ist. Dagegen sieht man dort eine der beiden starken Spiralfedern (s), welche den Schieber zurückbewegen, ferner die beiden Stangen (tt), welche die Führung der Spiralfedern bilden und aus dem daselbst durchlöcherten Schieber hervorstehen. Uebrigens trägt der Schieber einen Bing (u), in dem sich der Oculartubus (k) befindet, sodann eine starke Querleiste mit zwei cylindrischen Klötzen (v) , in denen die Drahtseile befestigt sind. Diese gehen über die Bollen (w) und vereinigen sich bald über dem Apparate, wie es oben beschrieben wurde. Der Apparat ist von der Firma P. J. Kipp en Zonen in Delft (Holland) nach meinen Angaben angefertigt, die Gabel zum Fest- halten des Mikroskopes, die oben beschriebene Doppelscheibe und der Griff von dem Mechaniker des Botanischen Institutes Herrn J. Veenhofp. Groningen, am 23. Juni 1901. [Eingegangen am 29. Juni 1901.] i;;s Heidenhain: Ueber die Schlittenbrenise. XVIII, 2. lieber die Schlittenbremse, eine Neuconstruction am Jung'schen Mikrotom zur Yermehrung der Stabilität der Schlittenführung. Von Prof. Dr. Martin Heideiilmin in Tübingen. Hierzu zwei Holzschnitte. Die JuNG'schen Mikrotome waren schon immer treuliche Instru- mente und erfreuen sich deswegen einer weiten Verbreitung. In den letzten zehn Jahren habe ich fast ausschliesslich mit den Instrumenten der Heidelberger Werkstätte geschnitten, weil diese auch bei geringer Schnittdicke relativ gleichmässige und exacte Arbeit liefern. Bei Untersuchungen, wie ich sie meistenteils betreibe, ist ein Variiren der Schnittdicke um nur 0*5 fi oder noch weniger oft schon von ausschlaggebender Bedeutung bei der Färbung. Hinderlich für ein gleichmässiges Schneiden ist in erster Linie die zwischen dem Schlitten und der Bahn eingeschaltete Oelschicht, welche als wechselnder Factor meiner Meinung nach leicht zu einer Aenderung der Schnittdicke in geringer Breite führen kann, je nachdem man nämlich mit der Hand mehr oder weniger schwer auf dem Messer- schlitten lastet. Hinderlich ist ferner bei hartem oder ungewöhnlich grossem Object, dass der Messerschlitten sich in die Höhe hebt oder der Objectschlitten durch den Druck des Messers aus der Bahn ge- hebelt wird. Unter diesen Umständen entstehen Unebenheiten der Schnittfläche, welche parallel zur schneidenden Kante liegen. Fs kam nun die Frage der Vermehrung der Stabilität der Schlittenführung gelegentlich in einer Correspondenz zwischen mir und der Heidelberger Werkstätte zur Besprechung, und die Leitung der Werkstätte entschloss sich daraufhin, an ihrem bekannten Mikrotom mit doppelter Schlittenbahn eine sehr einfache und sinnreiche Vorrich- tung anzubringen, durch welche Object- und Messerschlitten in der Bahn fixirt werden. Diese Vorrichtung bezeichnet die Werkstätte als XVIII, 2. Heidenhain: Ueber die Schlittenbremse. 139 Schlittenbremse, und ich erlaube mir , dieselbe hierdurch in weiteren Kreisen bekannt zu machen. In der Länge jeder Schlittenbahn liegt jetzt eine Schiene (Figur 1 bei a) und der Schlitten (c) läuft mit einer Rolle an dieser Schiene entlang, jedoch so, dass die Rolle (b) von unten her an die 1. Schiene andrückt. Die Rolle (b) ist an der Unterseite des Schlittens befestigt, jedoch nicht direct, sondern auf folgende Weise (Figur 2). 1 An der Unterseite des Schlittens ist ein zweiarmiger Hebel (de) be- festigt. An dem einen Ende dieses Hebels ist die Rolle (b) an- *) Die Vorlage zu dieser Abbildung verdanke ich der photographi- schen Kunst meines Hauscollegen Dr. Fr. Müller. 140 Heidenhain: Ueber die Schlittenbremse. XVIII, 2. gebracht, auf das andere Ende wirkt (Figur 1) durch Vermittlung eines Bolzens (f) eine kräftige Spiralfeder (g) , welche durch eine Stellschraube (h in Figur 1 und 2) angezogen oder ausgeschaltet werden kann. Schraube, Feder und Bolzen liegen in einem aus- gebohrten Kanäle im unteren massiven Theile des Schlittens. Die Rolle kann also willkürlich, indem man die Feder ver- mittels der Schraube spannt, emporgehebelt werden, und sie drückt dann fest auf die in der Schlittenbahn befestigte Schiene. Hierdurch wird , gleichsam wie durch Rückstoss , der Schlitten in die Bahn hineingepresst ; sucht man ihn mit der Hand zu lieben, so scheint er wie durch magnetische Kraft in der Bahn festgehalten. Der Feder- druck kann selbstverständlich vermittels der Stellschraube nach Be- lieben variirt werden; dadurch ist man in der Lage, den Bedürf- nissen entsprechend, den Schlitten bald mehr bald weniger fest auf der ,Bahn zu fixiren. Sobald beim Objectschlitten die Schlittenbremse in Wirksam- keit gesetzt wird, ergiebt sich secundär ein erhöhter Druck auf die Mikrometerschraube. Da nach dem Urtheil der Heidelberger Werkstätte die bisherige Mikro- 2. meterschraube auf die Dauer dem vermehrten Druck nicht hinläng- lichen Widerstand geleistet hätte , so ist im Anschluss hieran auch eine neue stärkere Mikrometerschraube construirt worden. Da die Werkstätte eventuell auch bereit wäre, alte Mikrotome auf Wunsch abzuändern , so müssten die Besteller auf jeden Fall auch den neuen Mikrometerbock mit in Kauf nehmen. Ich für meinen Theil schneide nicht immer mit der Schlitten- bremse, sondern nur dann, wenn es nöthig ist. Es hat keinen Zweck, die Schlittenbahn und die Mikrometerschraube anzustrengen, wenn keine Notwendigkeit dafür vorliegt. Bei sehr geringer Schnittdicke jedoch oder bei hartem Object oder bei grosser Oberfläche des Paraffinblockes ergiebt die Anwendung der Schlittenbremse ganz er- hebliche, sofort merkliche Vortheile. Es ergeben sich sogar Fälle, wo ein bestimmtes Object ohne Schlittenbremse nicht schneidbar ist, nach Anziehen der Stellschraube aber sogleich schneidbar wird. XVIII, 2. Noll: Ein neuer Aether- Gefrierapparat für Mikrotome. 141 Die Ausführung der JuNö'schen Instrumente war schon immer in Rücksicht auf die Präzision der Arbeit eine vorzügliche, und ich glaube, dass die Instrumente nunmehr, nach Einführung der Schlitten- bremse , vergleichsweise sehr vollkommen sind. Es kommt ja wohl überhaupt weniger darauf au, dass man einem ganz bestimmten Mikrotommodell den Vorzug giebt, denn es wird verschiedene Modelle geben , welche an sich vorzügliche Erfolge gestatten würden : Alles hängt von der trefflichen Ausführung im Einzelnen ab, und gerade diesen Vorzug glaube ich den JuNG'schen Mikrotomen nach meinen Erfahrungen einräumen zu müssen. Die Schlittenbremse erzielt ferner einen gewissen Abschluss in der Vollendung dieses Mikrotomtypus, indem, wie ich glaube, durch dieselbe die fehlerhaften Wirkungen bis auf das wirklich unvermeidliche Maass eingeschränkt werden. Tübingen, August 1901. [Eingegangen am 12. August 1901.] Ein neuer Aether -Gefrierapparat für Mikrotome. Von Dr. Alfred Noll in Jena. Hierzu zwei Holzschnitte. Das Princip des Gefrierapparates , welchen ich in Folgendem beschreibe, beruht darauf, durch Verdunsten von Aether im Vacuum die zum Durchfrieren der Objecte erforderliche Kälte zu erzeugen. Der Apparat ist folgendermaassen zusammengesetzt (Figur 1): Eine Kammer (K), auf deren obere Fläche das zu schneidende Ob- ject zu liegen kommt , aus Messing gefertigt , dient zur Aufnahme des Aethers. In der Ausführung, wie ich sie seit einiger Zeit auf einem ScHANzE'schen Mikrotom benutze, ist ihre untere Fläche 4 zu 2'5 cm, die obere 2'5 zu 2 cm gross ; die Höhe beträgt 3 cm. Der Stiel (c) dient zu ihrer Befestigung am Mikrotom. 142 Noll: Ein neuer Aether- Gefrierapparat für Mikrotome. XVIII, 2. An zwei benachbarten Seitenwänden der Kammer befinden sieh die Ansatzrohre a und b , von welchen die Schläuche s r und s., (in der Figur nur angedeutet) abgehen. Der erstere (s x ) führt zu einem Glastrichter (T) mit Hahnverschluss , mittels dessen das Einfüllen des Aethers geschieht ; der zweite (s 2 ) zu einer Saugvorrichtung (Pj, am besten einer Wasserstrahlsaugpumpe , welche die Kammer luft- leer machen und dadurch den Aether zum Verdunsten bringen soll. Der letztere Schlauch muss dickwandig und von engem Lumen, der erstere dünnwandig sein. Die Handhabung des Apparates ist folgende : Nachdem man die Kammer auf dem Mikrotom befestigt und die Schläuche an- gebracht hat (Figur 2), füllt man in den Trichter, dessen Hahn zu- nächst geschlossen ist, eine bestimmte Menge Aether ein, hebt dann den Trichter über das Niveau der Kammer, öffnet den Trichterhahn und lässt den Aether in die Kammer einlaufen. Darauf schliesst man den Hahn und stellt den Trichter bei Seite. Hierauf setzt man durch Oeffnen des Wasserhahnes die Saugvorrichtung in Gang, in Folge dessen der Apparat bis zum Hahn des Trichters luftleer ge- macht wird und der Aether verdunstet. — Nach Verlauf von etwa einer Minute beginnt eine solche Kälteentwicklung, dass ein auf der XVIII, 2. Null: Ein neuer Aether -Gefrierapparat für Mikrotome. | |;; Kammer liegendes Object ins Frieren kommt. Bei der angegebenen Grösse der Kammer und maximaler Füllung mit Aether hält das Frieren etwa 15 Minuten an. Will man den Apparat ausser Thätigkeit setzen, sei es um mit dem Schneiden aufzuhören oder um von neuem Aether einzufüllen, so öffnet man zunächst den Trichterhahn und schliesst danach den Wasserhahn. 2. Sollte das Aufstellen des Mikrotomes in der Nähe eines Wasser- hahnes nicht möglich sein, so hilft man sich am besten dadurch, dass man als Verbindung zwischen P und 2T, um ein allzu langes Stück Schlauch zu ersparen, ein Glasrohr einschaltet. Die Wasser- strahlsaugpumpe selbst schliesst man am zweckmässigsten an ein Abzweigrohr der Wasserleitung über dem Ausgussbecken an. Die Vorzüge des Apparates scheinen mir darin zu liegen, dass er einmal ganz unfehlbar funetionirt (es sind keine engen Bohrungen vorhanden), zweitens, dass der Aetherverbrauch ein geringer ist, und 144 Meyer: Eine Mikroskopirlampe. XVIII, 2. der Arbeitende im Gegensatz zum Aetherzerstäubungsapparat durch den Aether nicht belästigt wird. Ferner erfordert die ganze Ein- richtung , wenn einmal das Frieren in Gang gekommen ist , keine Bedienung mehr, sondern man kann, während man beide Hände frei behält, den Apparat sich selbst überlassen. In letzterer Hinsicht steht er den Apparaten , welche die Kälte durch Kohlensäure er- zeugen, nicht nach. In der geschilderten Weise habe ich den Apparat zusammen mit Herrn Rinck, Mechaniker am Physiologischen Institut in Marburg, construirt. Herr Rinck hat den Apparat zum Musterschutz an- gemeldet und übernimmt es , denselben auf Bestellung zu liefern, und zwar sämmtliche Theile zusammen (Kammer, Trichter, Schläuche und Saugpumpe) oder auch nur einzelne Theile. Dabei möchte ich bemerken, dass auch, wenn es die Construction eines Mikrotomes erfordert, auf Wunsch Aenderungen in der Form und Grösse der Kammer getroffen werden können. Jena, Physiologisches Institut, 28. August 1901. [Eingegangen am 29. August 1901.] Eine Mikroskopirlampe. Von Arthur Meyer in Marburg. Hierzu ein Holzschnitt. Bei der Ausführung von Untersuchungen über den Bau der Bacterienzelle , für welche die stärksten Immersionssysteme benutzt wurden, war ich in den Wintermonaten oft genöthigt, bei künstlichem Lichte zu arbeiten. Dabei stellte es sich heraus, dass für die Unter- suchung der feinsten gefärbten und farblosen Structuren das Licht der bisher benutzten Mikroskopirlampen gegenüber dem von weissen Wolken reflectirten Sonnenlichte, ganz ungenügende Resultate ergab. XVIII, 2. Meyer: Eine Mikroskopirlampe. i i;» Die besten mikroskopischen Bilder erhielt ich noch mit Gasglühlicht und der bekannten mit Wasser gefüllten Schusterkugel, einer Vor- richtung, die für schwächere Objective völlig ausreicht, jedoch gegen- über dem für diese fast gleichwertig einfachen Gasglühlichte den Nachtheil besitzt, dass man noch eine zweite Lichtquelle neben der dem Mikroskope das Licht liefernden Lampe aufstellen mnss , wenn man mit dem Zeichenprisma arbeiten will. Ich sah mich deshalb veranlasst, selbst eine Mikroskopirlampe zu construiren, welche mir jetzt bedeutend mehr leistet als die älteren Modelle. Selbstverständlich konnte auch ich die Fehler, welche durch die Abweichung der Zusammensetzung des Lichtes der künstlichen Licht- quellen von der Zusammensetzung des Sonnenlichtes jeder Mikro- skopirlampe anhaften müssen, nicht eliminiren, nur die Lichtquelle günstig wählen und den Strahlengang in der Lampe zweckmässig gestalten. Als Lichtquelle benutze ich eine kleine Gasglühlampe mit AuER'schem Glühstrumpfe, da der kleine Brenner weniger Gas kostet, weniger wärmt und in der Lampe doch noch eine hinreichende Licht- intensität liefert. Den Glühkörper stelle ich in den Brennpunkt eines parabolischen Spiegels (P der beistehenden Figur), welcher mit der Lampe auf einem Dreifusse befestigt ist. Der Spiegel macht die Lichtstrahlen annähernd parallel und wirft sie auf eine matte Glas- scheibe (M), welche ein sehr feines Korn besitzt, einen Theil der Strahlen, ohne deren Richtung zu ändern, einen anderen Theil zer- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 2. 10 146 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung' mikrosk. Präparate. XVIII.-'. streut austreten lässt. In einer Entfernung - von ungefähr 2ö cm vom Fusse der Lampe , bei Benutzung der stärksten Systeme , oder ungefähr bis 35 cm bei Anwendung schwacher Systeme , wird das Mikroskop aufgestellt, dessen Spiegel (S) das Licht aufnimmt. Der Schirm B schützt die Augen gegen das directe Licht der Lampe. Die Lampe ist von W. u. H. Seibert in Wetzlar oder von Me- chaniker Fr. Bühler in Marburg (Bez. Cassel) zu beziehen. Zu beachten ist bei Benutzung der Lampe, dass die leuchtende Stelle des gut glühenden Glühstrumpfes im Brennpunkte des Spiegels stehen niuss. Der Spiegel ist zum Höher- und Tieferstellen ein- gerichtet. Ferner darf keine beliebige Mattscheibe für die Lampe benutzt werden , da das Korn der Scheibe von grosser Bedeutung für die Leistung der Lampe ist. Der Neusilberspiegel hält seine Politur sehr gut, sollte er durch unrichtige Behandlung sich trüben, so kann man ihn mittels eines trockenen , mit etwas Wiener Kalk eingeriebenen Fensterleders leicht wieder blank putzen. [Eingegangen am 27. August 1901.] Präcisionssäge zur Herstellung mikroskopischer Präparate harter Substanzen. 1 Von Cand. med. Georg Arndt in Berlin. Hierzu neun Holzschnitte. An die Thatsache anknüpfend , dass die Herstellung mikrosko- pischer Präparate aus Hartgebilden, wie Knochen, Zahn und gewissen botanischen Objecten auf dem Schleifstein oder der mit Schmirgel bedeckten Glasplatte einen geraumen Zeitaufwand erfordert und weit J ) Nach einem in der Berliner Physiologischen Gesellschaft am 14. Juni dieses Jahres gehaltenen Vortrage mit Demonstrationen. XVIII, 2. Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. 117 weniger einfach ist als die von Schnitten weicher Substanzen , be- nutzte ich eine Vorrichtung, die ich ursprünglich für die Herstellung von parallelen Schlitzen an Holz- und Metallarbeiten getroffen halte zur Gewinnung dünner Platten von Knochen, Holz und Zahnwurzeln, indem ich in ein gewöhnliches Laubsägengestell statt einer Laub- säge deren zwei parallel neben einander einspannte , die durch dünnen, an beiden Enden dazwischen gesteckten und herumgewickelten Draht in bestimmter , variabler Entfernung von einander gehalten wurden. Die Arbeitswirkung war hier die, dass die Sägen (Figur 1 und 2 , schematische Querschnitte durch Sägen und Object dar- stellend) a beim Eindringen in das Material zwischen sich eine dünne Leiste b verschonten , die mit dem tieferen Eindringen der Sägen immer höher wird und in ihrer Dicke dem gegenseitigen Sägen- abstande entspricht , ein ähnlicher Vorgang wie der , mit dem die Gattersägen der grossen Holzschneidemaschinen den Baumstamm in einer Sägeperiode gleich in eine Anzahl Bretter zerlegen. Die ersten Versuche mit der Laubsäge ergaben, dass die Sägen sich in der Mitte ausbauchten , weil sie nicht stark genug gespannt werden konnten, dann, dass sie nur schwer genau parallel, keine höher als die andere , in den an beiden Enden des Sägegestelles befindlichen Klemmbacken festzuschrauben waren , drittens , dass die Laubsäge- blätter schnell stumpf wurden oder zerbrachen. Der erste Uebel- stand war theils der Elasticität des Gestelles, theils der Länge (12 cm) und mangelnden Zugfestigkeit der Sägen, theils, wie auch der zweite, der unvollkommenen Befestigungsart der letzteren zuzuschreiben ; der dritte betraf allein das Sägenmaterial. Daher wurde bei den näch- sten Versuchen die Länge der Sägen bedeutend verringert und das Sägegestell entsprechend verstellbar eingerichtet und durch einen Steg unelastisch gemacht. Trotz des primitiven Zustandes , in dem das Instrument noch steckte, gelang es mühelos, in kurzer Zeit 10* 148 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. XVIII, 2. Längs- und Querschnitte von Knochen, Hölzern, Zähnen und anderem harten Material zu gewinnen, die durchscheinend und zum Theil mikroskopirbar waren. Dieses Resultat ermuthigte zu weiteren metho- dischen Versuchen und zur Construction einer hierauf gegründeten, einzig dem mikroskopischen Zwecke gewidmeten Säge. Hierbei waren folgende vier Punkte zu berücksichtigen: 1) Die Grössenabmessung des Gestelles; 2) die Befestigung der Sägeblätter; 3) die Einsteil- vorrichtung für den gegenseitigen Abstand derselben; 4) Material und Form der Sägeblätter, Form und Stellung der Zähne. Principiell war zu beachten, dass die Sägeblätter eine enorme Spannung nöthig hatten, viel stärker als sie bei den üblichen Metall- iind Holzarbeiten angewandt wird, wenn sie auch bei nicht ganz sicherer Führung des Instruments, wie sie nun einmal die Hin- und Herbewegung des Armes und der Hand mit sich bringt, ihren gegen- seitigen Abstand beibehalten sollten. Die Rücksicht hierauf dictirte vielfach die Abmessungen und Constructionseinzelheiten. Das gebrauchsfertige Instrument ist in Figur 3 dargestellt, Figur 4 zeigt dasselbe von der anderen Seite mit heraufgeklappter XVIII, 2. Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. 149 Stellvorrichtung und den Widerstandsschrauben; Figur 5 und 6 stellen Querschnitte durch den Befestigungstheil für die Sägeblätter dar. und zwar Figur 5 den unserer Präcisionssäge, Figur C> der gebräuch- lichen Sägen ; Figur 7 ist eine Vorderansicht der Vorrichtung zum Einstellen des Sägenabstandes. Die Buchstabenbezeichnungen der Figuren 3 bis 7 entsprechen einander. Die Gesammtlänge der Säge vom Ende der Spannschraube bis zu dem des Griffs gemessen beträgt 26 cm; das rechtwinklig ge- bogene Stahlgestell m ist etwa 13 cm lang und 6*5 cm hoch; un- gemein widerstandsfähig gebaut, hat es die Eigenschaft , beim Aus- spannen der Sägen nur ganz wenig zu federn. Die freie Spannstrecke der Sägen beträgt 6'5 cm. Die starke Spannung macht eine zu- verlässige Befestigung der Sägeblätter nothwendig, 1 die nur durch 6. sehr festes Anziehen der Klemmschrauben e mit Hilfe eines bei- gegebenen Stahlstäbchens , das durch ein Loch im Handgriff der Schrauben gesteckt wird , zu erreichen ist. Diese haben daher nie- drige Schraubengänge erhalten und sind, ebenso wie die Klemmbacken a und ö, in deren Schraubenfutter sie laufen, aus besonders ge- härtetem Stahl gefertigt. Nun verschiebt sich aber beim festen An- ziehen der Klemmschrauben der lose Klemmbacken b trotz noch so präciser Herstellung an allen gebräuchlichen Befestigungsvorrichtungen immer ein wenig im Sinne der Rechtsdrehung gegen den festen J ) Aneinanderlöthen der Sägen mittels Hartloth unter Zwischenschal- tung eines Stahlplättchens gestattet zwar auch in der gewöhnlichen Säge eine sichere Befestigung, stellt sich aber so theuer, dass es in praxi nicht zu verwenden ist. 150 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. XVIII, 2. Klemmbacken a und verschiebt damit zugleich die Lage der Sägen so zu einander, dass die eine etwas höher oder tiefer als die andere steht. Dieser Uebelstand ist bei unserer Construction dadurch be- seitigt worden , dass von dem festen Klemmbacken, und zwar von der oberen und unteren Schmalseite desselben, aus einem Stück mit ihm gefertigt, zwei Leisten f und g (Figur 3 und 5) ausgehen, die den losen Klemmbacken in sicherer Führung umfassen , wobei die untere Leiste g zugleich zum Auflegen der Sägeblätter c dient. Allein diese Leisten würden sich ebenso wie die Klemmschrauben bald abnutzen, weil die Klemmbacken nur an ihrem untersten Theil, wo sie die Sägeblätter festzuhalten haben, beansprucht werden, sich mit ihren oberen Rändern aber ungehindert einander nähern können, so dass ihre Flächen einen nach unten offenen spitzen Winkel bilden (Figur 6) , während die Sägen in entsprechend winkeliger Stellung stehen. Zur genauen Parallelstellung ist daher eine Schraube h (Figur 4 und 5), die Widerstandsschraube , in dem festen Backen a gelagert , dicht unter dem An- satz der oberen Leiste f und genau in der Mitte über der Klemmschraube ß angebracht, die gegen den losen Klemm- backen b stösst und ihm , je nach der Dicke der Sägeblätter verstellbar , den '■ nöthigen Widerstand bietet. Die Linie d in den Figuren 5 und 6 deutet den Quer- schnitt eines Stahlplättchens an , das sich — mit Aussparungen für die Klemm- und Widerstandsschrauben versehen und genau eingepasst — in dem Raum zwischen den Backen befindet und die Sägeblätter c in einer ihrer Dicke entsprechenden Entfernung hält. In verschiedener Dicke angewandt, würden diese Plättchen also den Abstand der Sägeblätter und damit auch die Dicke der Schnitte variiren lassen, doch wird dieses unbequeme Verfahren durch den Gebrauch einer einfachen Stellvorrichtung (Figur 7) ersetzt, die aus zwei in den Schenkeln des Bügels i gelagerten, von aussen her gegen die Fläche der durch die Stahlplättchen in einem gewissen maximalen Abstand gehaltenen Sägeblätter c drückenden Schrauben k besteht. Der Bügel i ist in einem Scharnir- gelenk l an der oberen Leiste des festen Klemmbackens drehbar befestigt , um nach oben geklappt (Figur 4) beim Einspannen der Sägen nicht hinderlich zu sein. Was die letzteren selbst betrifft, XVIII, 2. Arndt: Präcisionsslige zur Herstellung mikrosk. Präparate. 151 so ist bereits erwähnt worden, dass die einfachen Laubsäge- blätter schnell stumpf und bauchig werden ; die gebräuchlichen Metallsägen , die bei feiner Zahnimg ein breites Blatt besitzen, nutzen sich zwar weniger leicht ab , haben aber den Nachtheil, Schnitte von allmählich immer breiter werdender, keilförmiger Ge- stalt zu liefern, weil bei den unvermeidlichen seitlichen Schwankungen des Werkzeuges beim Sägen die beiden Sägeblätter bald links, bald rechts mit ihren oberen Kanten — die unteren, schneidenden, sind in den zwei Schnittfurchen fixirt — gegen die Schnittflächen stossen und dadurch zur Divergenz gebracht werden ; aus demselben Grunde können sie auch convergiren, wodurch dann der Schnitt ein vorzeitiges Ende erreicht. Nur die sogenannten Mailänder Metallsägen, die in guten AVerkzeuggesckäften in verschiedenen Stärkegraden zu billigem Preise käuflich sind , haben sich als geeignet erwiesen 5 sie sehen den Laubsägen ähnlich, unterscheiden sich von ihnen aber äusserlich durch die Gleichmässigkeit und Schärfe ihrer Zähne; sie sind aus hartem, dabei nicht sprödem Uhrfederstahl gefertigt und besitzen eine im Verhältniss zu ihrem Querschnitte erstaunliche Zugfestigkeit. Die Zähne stehen gegen die Sägenachse in einem Winkel von 45° geneigt und zeigen an einer Seite einen kaum wahrnehmbaren, un- regelmässigen, durch die Herstellungsweise bedingten Grat, der durch Abfeilen erst gänzlich entfernt werden muss. Von den verschiedenen Stärkegraden der Mailänder Sägen ist der als No. 4 bezeichnete für unsere Zwecke am geeignetsten, sowohl hinsichtlich der Zug- festigkeit als auch der Art der Zahnung. Diese Sägen haben bei einer Breite von 1 mm und 0*5 mm Dicke 13 Zähne auf je 1 cm Länge. Sehr dünne Sägen, die wegen der Feinheit ihrer Zähne Vortheil bringen könnten, sind wegen mangelnder Zugfestigkeit nicht zu ver- wenden. Der Wunsch, dünnere Schnitte, besonders auch von weniger hartem, faserigen oder spongiösen Materiale zu erzielen, führte mich dazu, Sägen von grösserer Dicke (über 1 mm) mit fast quadratischem Querschnitt (Figur 8, a) herstellen zu lassen, deren ausserordentlich feine Zähne unter Controle der Lupe einzeln mit dem Meissel ge- hauen waren und der Sägefläche das Aussehen einer feinen Feile gaben. Diese Sägen waren weit starrer als die Mailänder und be- hielten ihren gegenseitigen Abstand auch bei sehr unsicherer Füh- rung des Instrumentes. Ihre Arbeit glich dabei mehr der einer Feile. An beiden Seiten hatten sie einen vom Meisselschlag herrührenden, ziemlich gleichmässigen Grat (Figur 8, c). Hinsichtlich des Schnei- dens von porösem Material zeigten sie keinen Vorzug, dagegen 152 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. XVIII, 2. brachten sie weit dünnere Schnitte zum Vorschein, als ich bis dahin erhalten hatte ; es wirkte nämlich der als seitliche Leiste vor- springende Grat wie die Verschränkimg an den Zähnen der Tischler- säge , d. h. reibungsmindernd , weil die Stelle des Grates die einzige ist , die mit dem entstehenden Präparatblättchen b in Be- rührung kommt, während die übrigen Seitenflächen d der Sägen einen gewissen freien Spielraum haben, der auch sehr dünne Prä- parate vor dem Abreissen schützt. So vollendet solche Präparate makroskopisch erschienen, so sehr enttäuschte aber ihr mikroskopisches Bild, das dicht neben einander feine, regelmässige, von dem scharfen Grat herrührende Rillen aufwies , die so störend wirkten , dass die Verwendung der Sägen aufzugeben war. Schliesslich gelang es, diesen Uebelstand zu beseitigen, ohne doch den Vortheil der Ver- schränkung zu entbehren, dadurch, dass ich die oberen Kanten der U 8. Mailänder Sägen abschrägte (Figur 9), so dass nur der Zahntheil a parallele Seitenflächen hat und mit dem Präparat b in Berührung steht, die schrägen Flächen d aber keine Reibung mit der Umgebung haben und auch bei seitlichen Schwankungen des Instruments das Präparat weniger als die Sägeblätter mit rechtwinkligem Querschnitt (Figur 1 und 2) gefährden. Die so hergerichteten Mailänder Sägen, die von der das Instrument ausführenden Firma fertig zu beziehen sind , vermögen Knochenschnitte zu liefern , die nur eine Schicht Knochenkörperehen enthalten, Zahnschnitte mit einer Schicht Cement- körperchen, botanische Präparate, besonders der Steinmiss, von der- selben Feinheit. 1 Solche Schnitte machen durchaus den Eindruck von Schleifpräparaten. Von diesen unterscheiden sie sich durch die ') Demonstrirt wurden Quer- und Längsschnitte von Rührenknochen, Schädeldach in seiner ganzen Dicke, Zahnwurzel längs, quer und schräg, Steinnuss, Pflaumen- und Kirschkern, Cocosnuss, Jalape, Colanuss. XVIII, 2. Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. 153 unvergleichlich kürzere Herstellungszeit, die je nach der Grösse des Präparates nach Secunden bis wenigen Minuten zählt, und durch feine Killen , die man bei Benutzung der Blende und beim Heben und Senken des Tubus mitunter wahrnehmen kann , die aber , je sicherer die Handhabung der Säge und je besser aufgehellt die Präparate, um so weniger erkennbar sind. Sollten sie einmal störend wirken, so lassen sie sich, da sie sehr flach sind, durch mehrfaches Hin- und Herfahren auf dem Abziehstein gleich beseitigen. Die mit der Säge hergestellten Schnitte erfordern kein nachträgliches Poliren, weil sie schon von den Seitenflächen der Sägen mit Hilfe des reich- lich entstehenden Sägemehls schön glatt polirt sind , so dass man sie so , wie sie die Sägen verlassen, auch sofort nach Abspülen der Sägemehlreste in Wasser in Glycerin oder anders aufgehellt unter das Mikroskop legen kann. Frische , feuchte Objecte lassen sich gleichfalls mit grosser Leichtigkeit schneiden, so kann man z. B. während einer chirurgischen Knochenoperation ein frisches Präparat vielleicht mit noch lebenden Zellen erhalten, ohne die Narkose zu verlängern oder dem Patienten einen nennenswerthen Substanzverlust zu bereiten, denn die Sägen graben eine Furche von weniger als 2 mm Breite und beliebig zu wählender Länge und Tiefe. Aehnliche Vortheile muss auch die Untersuchung frischer botanischer Objecte, z. B. eines Baumes von hinreichend hartem Gefüge an seinem Stand- ort haben , hier könnte das Instrument das Reisemikroskop wirksam begleiten. Ferner ist es überall da am Platze , wo es sich um die Gewinnung möglichst zahlreicher Schnitte aus einem Objecte von be- schränkter Grösse handelt, dessen Form aber erhalten bleiben soll. Hierbei werden die entstandenen Fugen durch ein Füllmittel, wie Gips oder Wachs, ausgekittet. Die Schnelligkeit der Methode gestattet , öfter als bisher Stich- proben von harten Materialien zu nehmen, sich eine grössere Anzahl Schnitte herzustellen , von denen nur die besten conservirt werden ; sie erscheint auch berufen , die in mikroskopischen Lehrcursen be- stehende Schwierigkeit der Versorgung der Theilnehmer mit Präpa- raten der verschiedenen Hartgebilde zu beseitigen, die nunmehr von denselben ebenso wie Rasirmesser- und Doppelmesserpräparate ge- schnitten werden können, 1 oder zum Vertheilen durch den Instituts- ! ) Wie es z. B. seitens der Theilnehmer des von Herrn Geheimrath Waldeyer und Herrn Prof. H. Virchow geleiteten mikroskopischen Curses im Sommersemester dieses Jahres mit gutem Erfolge geschehen ist. 154 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. XVIII, 2. diener in grosser Zahl herzustellen sind. Dabei wird am besten so verfahren , dass man z. B. einen festen Röhrenknochen im ganzen oder längs- und quergetheilt in den Schraubstock derart einspannt, dass eine stumpfe Längskante hervorragt, auf der man die Schnitte bequem anlegen kann, indem man von links nach rechts fortschreitend Kerbe neben Kerbe mehr oder weniger tief eingräbt. Die Präparate kann man dabei gleich nach jedem Schnitt entfernen oder bequemer so lange stehen lassen , bis die ganze Kante mit Einkerbungen ver- sehen ist, wonach man das Object aus dem Schraubstock nimmt und die Präparate nach einander mit dem Messer (s. weiter unten) ab- knickt. Fallen bei solcher Massenherstellung die Schnitte nicht dünn genug aus, so können sie von den Curstheilnehmern selbst auf dem Abziehstein schnellstens vollendet werden. Nachträgliches Abschleifen kann man überhaupt überall da anwenden, wo die Consistenz des Objects nur dickere Schnitte zulässt, auch bei frischen, feuchten Schnitten, die ja schnell zu trocknen sind. Zahnschmelz vermögen die Mailänder Metallsägen nicht anzu- greifen, sie werden an ihm schnell stumpf, Dentin und Cement da- gegen lassen sich ebenso gut wie Knochen bearbeiten. Ob sich für die Bearbeitung von Schmelz hinreichend harte Sägen werden her- stellen lassen , erscheint zweifelhaft , denn auch die zahnärztlichen Bohrinstrumente werden bald stumpf und arbeiten trotz grosser Um- drehungsgeschwindigkeit verhältnissmässig langsam. Je schärfer die Sägen, um so dünner sind auch die mit ihnen erzielten Schnitte , doch habe ich auch mit Sägen , die schon über 50 Knochenschnitte geliefert hatten, noch brauchbare Knochen- und Zahnpräparate erhalten. Zum Auswechseln der Sägen klappt man die Stellvorrichtungen nach oben (Figur 4), schraubt die eine Klemm- schraube mit Hülfe des Stahlstäbchens g ä n z 1 i c h a b , entfernt den losen Klemmbacken und löst die andere Klemmschraube theilweise. Dann setzt man nach Entfernung der alten Sägen die neuen ein, natürlich so, dass die Stahlplättchen d zwischen ihnen liegen. Hier- bei liegt das Instrument auf dem Tische ; man achtet auf die Zahn- richtung der Sägen (s. u.), legt sie dicht an die untere Leiste g an und zieht die nur etwas gelöste Klemmschraube an. Die andere Klemmschraube sammt dem zugehörigen Klemmbacken setzt man wieder ein und schraubt ihn, nachdem die Sägen der unteren Leiste fest aufliegen , gleichfalls mit der Hand fest. Correcturen in der Stellung der Sägen lassen sich jetzt durch Verschieben derselben nach Lockerung der Klemmschrauben leicht vornehmen. Die Sägen XVIII, 2. Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. 155 müssen genau parallel und keine höher als die andere neben ein- ander liegen. Bleibt diese leicht zu erfüllende Forderung unbeachtet, so verdankt man gute Schnitte nur dem Zufall. Falls die Klemm- backen selbst nicht mehr parallel stehen (vgl. Figur 6), sei es, weil man Sägen oder Stahlplättchen von anderer Dicke eingelegt oder beim Auswechseln der Sägen an der Widerstandsschraube h gedreht hat, so muss man diese letztere nach Locker u n g der K 1 e m m - schraube vor- oder zurückdrehen. Nachdem die Sägen durch Anziehen der Klemmschraube mittels des Stahlstäbchens nunmehr endgiltig befestigt sind, erkennt man, ob sie gleichmässige Spannung haben , beim Drehen der Spannschraube n , die wie bei den be- kannten Sägen, nur präciser functionirt, daran, dass beide Sägen — vorausgesetzt, sie haben die gleichen Dimensionen, was gewöhnlich zu- trifft — beim Anschlagen denselben Ton geben. Geringe Differenzen spielen dabei keine Rolle, grössere machen sich dadurch bemerkbar, dass die weniger stark gespannte Säge sich beim Schneiden aus- baucht und höher als die andere steht. Nach erfolgter Spannung der Sägen klappt man die Stellvorrichtungen herunter und stellt, während man die Sägen gegen das Licht oder eine helle Fläche hält , durch Drehen an den Schrauben k (wobei man übrigens die Hände nicht zu wechseln braucht) die gewünschte Schnittbreite ein. Da diese letztere ja nur sehr gering ist, so erfordert das Parallel- stellen des schmalen Lichtspaltes zwischen den Sägen weder Uebung noch besonders gutes Augeumaass. Die Stellschrauben mit Kreis- theilung zu versehen oder sie so unter einander zu verbinden, dass sie alle von einer Stelle aus regulirbar sind , ist daher überflüssig und, weil complicirend , schädlich. Beim Gebrauch der Spann- schraube n empfiehlt sich die Vorsicht, die Zugfestigkeit der Sägen nicht aufs äusserste in Anspruch zu nehmen, da sie bei allzu straffer Spannung mitunter erst beim Sägen zerreissen. Genügend sind sie dann gespannt, wenn sie sich nur noch schwer durch Druck in der Mitte ausbauchen lassen; die ungefähre Tonhöhe, die dieser Span- nung entspricht, merkt man sich leicht. So sind mir bisher trotz ungemein zahlreicher Versuche kaum mehr als drei Mailänder Sägen- paare — der Untergang der einen Säge zieht in Folge der enormen Spannung sofort den der anderen nach sich - gesprungen. Beim Einlegen der Sägen in die Klemmbacken erhebt sich die Frage, ob dies mit gleicher oder entgegengesetzter Zahnrichtung der beiden Sägen geschehen soll. Letztere würde theoretisch den Vor- theil haben, dass das Präparat nicht gleichzeitig von beiden Seiten 156 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. XVIII, 2. geschnitten und auf seine Festigkeit beansprucht wird, sondern nur immer von der, wo die Zähne gegen die Schubrichtung geneigt stehen. In der Praxis hat sich das aber nicht bestätigt, denn Sägen, die mit gleich- , und zwar nach der Spannschraube hin gerichteten Zähnen eingespannt waren, haben mir immer die besten Schnitte er- geben. Nach der Spannschraube hin sollen die Zähne deshalb ge- neigt stehen, weil die Hand beim Vorstossen grössere Kraft und Sicherheit als beim Zurückziehen des Werkzeuges hat. Drei Sägen an Stelle von zweien, zur gleichzeitigen Erzielung von zwei Schnitten, habe ich in das Präcisionssägengestell mehrfach eingespannt ; die Schnitte waren allerdings nicht so dünn und gleich- massig wie die mit zwei Sägen hergestellten, doch wird man zweifel- los, wenn nur das Gestell hierauf eingerichtet ist, auch mit drei oder beliebig vielen Sägen gleichzeitig gute Serienschuitte erhalten müssen. — Serienschnitte , die allerdings meist noch nachgeschliffen werden müssen, kann man auch mit zwei Sägeblättern so anfertigen, dass man den ersten Schnitt wie gewöhnlich herstellt, die nächsten aber so , dass man nur mit einer Säge sägt , die andere dagegen dicht an der vorher gewonnenen Schnittfläche leer gehen und somit als Führung dienen lässt. — Im allgemeinen gelten für den Gebrauch der mikroskopischen Prücisionssäge folgende drei Regeln: 1) Gute Feststellung des Objectes, und zwar in einem Schraub- stocke am nicht wackelnden Arbeitstisch. 2) Gelinder Beginn des Sägens und im weiteren Verlaufe Ab- stufen des Druckes je nach dem Gefüge des Objectes und der ge- wünschten Präparatdicke. Die Säge selbst soll man wie eine feine Feile halten, den Griff nicht mit der Faust umschliessen, sondern nur mit den letzten drei Fingern, der Daumen ruht links, der Zeige- finger rechts oben auf dem Griffe. 3) Sichere Führung des Instrumentes immer in derselben Ebene. Jede Abweichung von der Schubrichtung macht sich dadurch be- merkbar, dass die Säge schwerer vor- und zurückzuschieben ist ; lässt man den Griff los und unterstützt den Bügel mit einem Finger in der Nähe des Schwerpunktes, so stellt sie sich durch die elastischen Sägeblätter wieder von selbst in ihre alte Richtung ein. Schwan- kungen aus der Verticalebene heraus — in der man ja fast aus- schliesslich sägt - - entsprechen Pronations- und Supinationsbewegungen des Vorderarmes und führen dazu, dass der Schnitt allmählich dicker, dünner oder wellig wird. XVIII, 2. Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. 157 Man sägt mit grösserer Sicherheit im Sitzen als im Stehen, den Oberarm an den Körper angelegt und geringe Excursionen machend. Ist der Schnitt hinreichend tief gedrungen, so kann man das Prä- parat entweder so ablösen, wie man es mit Doppelmesserschnitten zu tliun pflegt, indem man das Instrument etwas nach links und rechts herüber biegt, während man einige Sägebewegungen ausführt, oder indem man es vorsichtig heraushebt, mit dem Taschenmesser in eine Schnittfurche eingeht und das Präparat an seiner Haftstelle abknickt. Bei grossen und dünnen Schnitten erfordern beide Metho- den besondere Aufmerksamkeit. Die Frage, ob faserige oder bröckelige Objecte animaler oder vegetabilischer Herkunft, die sich mit der Säge nur schlecht be- arbeiten lassen, durch Tränken in Wasser oder Oel geeigneter wer- den , lässt sich nicht allgemein beantworten ; von frischem , fetten, spongiösen Knochen habe ich allerdings bessere Präparate erhalten als von spongiösem macerirten, dessen Knochenbälkchen ihre Elasti- cität zum Theil eingebüsst hatten. An derartigen Knochenpräparaten (aus der Patella z. B.), deren Fett nachträglich extrahirt wird, kann man die Anordnung der Knochenstructur makroskopisch gut erkennen. Schneidet man sie so dünn, dass sie auch gute mikroskopische Bilder geben, so geht ein grosser Theil der Knochenbälkchen beim Sägen verloren. Um dies zu verhindern, habe ich durch Einlegen in Gips- wasser die Hohlräume einer eröffneten macerirten Endphalanx sich mit Gips füllen lassen, der, erstarrt, in den 2 bis 3 Knochenkörper- chen starken Schnitten beim Sägen viele Knochenbälkchen vor dem Abreissen schützte ; ein weniger bröckliges Füllmittel würde wohl noch wirksamer sein. Hartgetrockneter Knorpel lässt sich leicht schneiden, giebt aber nicht so schöne Schnitte als frischer, mit dem Messer geschnittener. Besser sind Knorpelknochenpräparate von Gelenkenden mit ange- trocknetem Knorpel. Der Zusammenhang von Weich- und Hart- gebilden lässt sich ferner — abgesehen von der v. KocHSchen Ver- steineruugsmethode mittels Canfadabalsam — auch durch das Gefrier- verfahren darstellbar denken, analog dem des Mikrotoms und der grossen anatomischen Gefrierdurchschnitte , welch letztere ja trotz Herstellung mit der Säge glatte Schnittflächen aufweisen. Mit Piück- sicht auf die Erhitzung der Sägen, die schon nach wenigen Zügen eintritt, müsste dabei für beständige Kühlung, etwa durch Einschliessen des Objects in einen grösseren Eisklotz, gesorgt werden. Substanzen , deren Härtegrad über dem der Stahlsägen liegt, 158 Arndt: Präcisionssäge zur Herstellung mikrosk. Präparate. XVIII, 2. wie Zahnschmelz und gewisse Mineralien, müssen sieh durch Kar- borund- oder Diainantscheibchen , wie sie von Zahnärzten allgemein benutzt werden, schneiden lassen, die man zu je zweien in verstell- barem Abstände auf die zahnärztliche Bohrmaschine steckt. Ferner kann man an die Adaptirung einer mikrotomähnlichen Vorrichtung zur Gewinnung sehr ausgedehnter »Schnitte oder an die Herstellung einer in grösseren Dimensionen als die hier beschriebene gehaltenen Säge denken, doch sind alle diese Modifikationen erst noch praktisch zu erproben. Ein Verfahren, das sich einer einfachen Kreissäge zur Her- stellung mikroskopischer Knochenpräparate bediente und daher an den Gebrauch einer Schlittenführung für das Object gebunden war, ist für die mikroskopische Technik in der von Prof. J. Csokor ge- meinsam mit A. Csokor (Wien) construirten „Knochenschneide- maschine" l nutzbar gemacht worden, die mit einer 12 cm im Durchmesser haltenden, von einem Kraft- oder Tretmotor (einer Näh- maschine z. B.) angetriebenen Kreissäge von einem auf einem Object- schlitten durch Zahnrad- und Schraubenübertragung continuirlich ent- gegenbewegten — auch frischen — Knochen fertige mikroskopische Präparate schnitt. Das Princip des Apparats beruhte (vgl. das Kef.) „einerseits in der schnellen Rotation der Circulärsäge, anderseits in der Selbststeuerung durch das langsame , aber beständige Heran- ziehen des Objectschlittens an den schneidenden Rand der Circuliir- säge". Hieraus geht, um von weiterem abzusehen, die grundsätzliche Verschiedenheit des als „Maschine" wirkenden Apparates von un- serem frei in der Hand arbeitenden Werkzeuge deutlich hervor. Was das Anwendungsgebiet der Präcisionssäge — die, mit zwei Sägen bespannt, auch „mikroskopische Doppelsäge" 2 genannt werden kann — anlangt, so dürfte es sich ähnlich gestalten, wie das seines technischen Analogons, des Doppelmessers. So wie dieses sein wohl- begrenztes Wirkungsfeld hat , ohne aber dem Mikrotom den Rang x ) Die „Knochenschneidemaschine" wurde auf dem Congress der Anatomischen Gesellschaft in Wien 1892 von Herrn Prof. J. Csokor demon- strirt (Referirt im Ergänzungsheft des Anat. Anz. 1892), ist aber offenbar wenig bekannt geworden; mir selbst erst nach Abschluss der Versuche durch Hinweis auf das Referat seitens des Herrn Dr. Kopsch. 2 ) „Anatomische Doppelsäge" ist die zur Eröffnung des Wirbel- kanals dienende zu nennen, deren technischer Effect nicht in der Erhal- tung, sondern Entfernung des zwischen den Sägen befindlichen Ob- jectstücks beruht. XVIII, 2. Pranter: Ein billiger Ersatz für Deckgläser. 159 streitig machen zu können, so ist auch unsere Sägemethode nur auf bestimmtem Gebiet der Schleifmethode überlegen, mit Vortheil aber können beide sich auch gegenseitig ergänzen. Noch einen wichtigen Berührungspunkt hat die ^Yi'^c mit dem Doppelmesser gemein, sie lässt sich nämlich selbst in ein solches verwandeln, wenn man an Stelle der Sägen Messer einsetzt, die aus dünnem, schmalem Stahlband gefertigt sind. Ueber die Einzelheiten dieser Vorrichtung und eines darauf gegründeten, ausschliesslich als Doppelmesser dienenden Instrumentes soll nach Abschluss der Ver- suche berichtet werden. Die Herstellung und der Vertrieb der Präcisionssäge erfolgt durch die Fabrik chirurgischer Instrumente von J. Thamm, Berlin N.W. , Karlstrasse 14, die den Preis auf 20 Mk. festgesetzt hat. Zum Schluss sei mir gestattet, Herrn Prof. Dr. Langerh.w^. Prosector an der Pathologisch -Anatomischen Anstalt des Kranken- hauses Moabit , für das meinen Versuchen entgegengebrachte , för- dernde Interesse meinen wärmsten Dank auszusprechen. [Eingegangen am 24. August 1901.] [Aus der Klinik für Dermatologie zu Leipzig.] Ein billiger Ersatz für Deckgläser. Von Dr. Victor Pranter, Volontärassistent. An der Klinik für Dermatologie in Leipzig werden seit etwa einem Jahre auf Veranlassung des Herrn Prof. Riehl an Stelle der namentlich in grösseren Formaten theueren Deckgläser Streifen aus „Gelatinepapier" verwendet. Dieses Gelatinepapier besteht aus reiner Gelatine, ist fast ganz farblos, vollkommen durchsichtig und von glatter überdache. In Form ganz dünner, papierähnlicher Blätter von 60 cm Länge und 40 cm Breite ist das Gelatinepapier in den Schaufenstern vieler Ge- schäfte gebraucht, um ausgestellte Gegenstände vor Staub zu schützen. 160 Pranter: Ein billiger Ersatz für Deckgläser. XVIII, 2. Die dünneu Gelatineplättehen zeigen natürlich alle Eigenschaften der Gelatine selbst. Ein derartiges Blatt löst sich in Wasser, Glyce- rin , wässerigen Säuren und Alkalien , ist dagegen unlöslich in con- centrirtein Alkohol , Aether , Cloroform , Xylol , Benzin , fetten und ätherischen Oelen. Infolge seiner Durchsichtigkeit , Glätte und der Löslichkeitsverhältuisse kann es für mikroskopische Präparate einiger- maassen als Ersatz für Deckgläser dienen und zwar für alle jene Präparate, welche kein Wasser oder Glycerin enthalten. In Canada- balsam oder Damarlack, Xylol eingelegte Schnitte können zweckmässig mit Plättchen , welche man in beliebigen Dimensionen zuschneiden kann , bedeckt werden. Untersuchung selbst mit Oelimmersion lässt sich an solchen Präparaten ganz tadellos durchführen, da die optischen Verhältnisse denen des Glases nahe stehen. Im hiesigen Laboratorium rinden diese Gelatineplättehen nament- lich bei Untersuchung von Seeretpräparaten und allen nicht zu längerer Aufbewahrung bestimmten Präparaten Anwendung. Da das Gelatine- papier äusserst billig ist, wird dadurch eine grosse Menge von Deck- gläsern erspart. Zur Anfertigung von Dauerpräparaten eignet Gelatine sich weniger, weil namentlich bei höherer Temperatur oder in feuchten Räumen leicht störende Faltung auftritt. Man kann letztere zum Theil ver- meiden, wenn man nicht zu dünnflüssigen Lack verwendet und bei Anfertigung der Präparate das Gelatinepapier mit Fliesspapier, wel- ches mit Xylol befeuchtet ist, gut anpresst. Uebrigens zeigen sich manche ungefähr vor Jahresfrist von uns angefertigte Präparate noch ganz brauchbar ; speciell ist keine Trü- bung der Gelatine bemerkbar geworden, während andere, in warmer, feuchter Luft aufbewahrte Präparate schon nach Tagen leiden. Zur Reinigung der durch Berührung mit den Fingern fettig oder staubig gewordenen Oberfläche ist leichtes Abreiben mit Xylol oder Benzin genügend. Einen Nachtheil bildet die Empfindlichkeit der Plättchen gegen Wärme und Feuchtigkeit, welche beide zur Faltenbildung Veranlassung geben. Gegenüber den Glimmerplättehen besitzt Gelatine den Vortheil, dass sie fast keine Sprünge aufweist. Wir empfehlen den Gebrauch dieser Deckgelatine namentlich aus Sparsamkeitsrücksichten als Ersatz für Deckglässer bei sehr grossen Schnitten und für Präparate , welche nicht zu langer Auf- bewahrung bestimmt sind. Selbstverständlich kann sie nur theil- weise die Gläser ersetzen. XVIII, 2. Minervini: Modificationen der Weigert'schen Methode. ir>l Die Firma G. Grübler u. Co. in Leipzig hält diese Gelatine- plättchen in grösseren Streifen und in den üblichen Deckglasformaten vorräthig. [Eingegangen am 25. Juli 1901.] [Laboratorium für Chirurgische Pathologie der Universität zu Genua. Prof. Morisani.] Modificationen der Weigert'schen Methode zur specilischen Färbung des elastischen Gewebes. Von Dr. R. Minerviui Assistentarzt und Privat doeent in Genua. Hierzu Tafel IL Die Tinction des elastischen Gewebes war von jeher eine Frage, welche die Aufmerksamkeit der Forscher erregte , weil nur durch eine specifische Färbung, die die elastischen Elemente zur Darstellung bringt, die genaue Kenntniss ihrer Anordnung möglich wird. Eben durch diese Kenntniss wird die Lösung vieler interessanter physio- logischer und pathologischer Fragen bedingt. Die ältesten Methoden zur Sichtbarmachung elastischer Fasern bestanden darin, dass man dünne Gewebsfetzen oder -Schnitte der Ein- wirkung von Essigsäure aussetzte , welche alsbald alle anderen, das Gewebe bildenden Theile durchsichtig und so die elastischen Netze sichtbar macht ; oder indem man sie mit Kaliumhydroxyd- oder Pepsin-Lösung behandelte, deren auflösenden Wirkung die elastischen Fasern länger zu widerstehen vermögen. Man gebrauchte später die metallischen Imprägnationen mit Ueber- osmiumsäure (Hertwig) oder mit Gohlchlorid (Gerlach), noch später kam man auf die Farbstoffe , welche eine mehr oder minder grosse "Wahlverwandtschaft zu dem elastischen Gewebe besitzen, wie Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 2. 11 Iß2 Minervini: Moclificationen der Weigert'schen Methode. XVIII, 2. Safranin (Martinotti, Mibelli), Victoriablau (Lustgarten), Aurantia (Burci), Ürcei'u (Tänzer, Unna) und endlich die auf speciellen mikro- chemischen Reactionen oder auf dem specifischen Widerstände der elastischen Fasern gegen die Entfärbung basirende Methoden, wie jene von Baltzer (Eosin und Kali), Herxheimer (Hämatoxylin und Eisenchlorid), von Manchot (Fuchsin und Schwefelsäure) u. a. m. In neuerer Zeit hat Weigert 1 eine neue Methode angegeben, welche auf der Wahlverwandtschaft eines speciellen Farbstoffes, von Fuchsin stammend, zu dem elastischen Gewebe basirt. Diesen Farbstoff, dessen chemische Zusammensetzung darzulegen sehr schwierig wäre, der aber wenigstens in der Wirkung mit jenem der HERXHEiMER'schen Methode vielleicht analog ist, gewinnt man durch Fällung von Fuchsin aus einer wässerigen Lösung mittels Eisenchlorid. Der Niederschlag wird in Alkohol gelöst und färbt stark röthlich- violett ; behandelt man dann die Schnitte mit Alkohol, so bleiben die elastischen Fasern violett gefärbt, während alle anderen Elemente sich mehr oder weniger, z. Th. ganz entfärben. Diese Methode hat bei allen Forschern derartig treffliche Er- gebnisse geliefert, dass nach ihrer Publication viele Arbeiten auf dem Gebiete der normalen und pathologischen Histologie veröffent- licht wurden. Man kann behaupten, dass gerade diese Methode die gegenwärtige reichhaltige Literatur über das elastische Gewebe un- mittelbar veranlasst habe. Durch eine über lange Zeit ausgedehnte Beschäftigung mit dem Narbeugewebe und der Untersuchung der elastischen Fasern, habe auch ich mich von der Vortrefflichkeit der WEiGERT'schen Methode über- zeugt. Ich hatte dabei Gelegenheit, einige Beobachtungen über sie zu machen und in ihrer Technik einige Veränderungen anzubringen, welche vielleicht den Forschern nicht uninteressant sein dürften. a) Vor allem habe ich mit der WEiGERT'schen Methode wahr- nehmen können, dass nicht nur in den dünnen Gewebeschnitten die specitische Färbung der elastischen Elemente erfolgt, sondern auch und zwar sehr gut in Stücken des ganzen Gewebes (Massenfärbung). Um auf diese Weise gute Präparate zu erzielen, ist der empfehlenswertheste Weg der folgende : Das vorher bereits in Alkohol oder Formalin oder MüLLEit'scher Flüssigkeit fixirte Gewebe wird in : ) Weigert, C, Ueber eine Methode zur Färbung elastischer Fasern (Centralbl. f. allgem. Pathol. u. pathol. Anat. Bd. IX, 1898, No. 8, 9, p. 289; vgl. diese Zeitschr. Bd. XVI, 1899, p. 81). XVIII, 2. Miner vini: Modifikationen der Weigert'schen Methode. 163 kleine Stücke von höchstens 1 cc geschnitten ; diese werden 48 Stunden lang in der färbenden Lösung gelassen , dann 24 Stun- den in gewöhnlichen Alkohol (mit ein Procent Salzsäure versetzt; übertragen und für weitere 24 Stunden in 90procentigen Alkohol; sie gelangen dann durch absoluten Alkohol , Terpentin oder Xylol, und werden in Paraffin eingebettet. Die Beobachtung der Schnitte ergiebt, dass die specifische Färbung der elastischen Fasern ganz evident erscheint und auch im Centrum des Stückes erfolgte. b) Da ich ferner eine rothe Färbung der elastischen Elemente erzielen wollte, welche mit jener blauen des Hämatoxylins contrastiren könne, und erwägend, dass unter den gewöhnlichen Anilinfarbstoffen das Safranin derjenige ist, welcher die grösste Wahlverwandtschaft zu dem elastischen Gewebe besitzt (Methode Martinotti, Mibelli), so suchte ich , Weigert's Weg verfolgend , einen vom Safranin ab- stammenden Stoff zu erzielen, welcher dem gewünschten Zwecke ent- spräche. Nach einigen Versuchen gelangte ich mit dem nachfolgenden Verfahren zu sehr zufriedenstellenden Ergebnissen. Man bereite eine warme, wässerige einprocentige Safraninlösung (Merck) unter Zusatz von ein Procent Resorcin. Nach Kaltwerden filtrirt man. Dem Filtrat füge man ein Viertel des Volumens ge- wöhnlicher Eisenchloridlösung (Liquor ferri sesquichlorati, Dichte 30 Beaume) hinzu ; man erhält alsdann einen ausgiebigen ziegelrothen Niederschlag. Man erhitzt bis zum Siedepunkt, nach dem Abkühlen filtrirt man wieder ; der auf dem Filter bleibende Rückstand wird ge- waschen, dann getrocknet und unter Erwärmung in 100 Theilen Alkohol von 90 Procent mit ein Procent Salzsäure gelöst. Man ge- winnt so eine rubinrothe Lösung, welche man genau wie die WEiGERT'sche Farblösung benutzt. Die in diese Lösung für eine bis zwei Stunden gebrachten Schnitte nehmen eine lebhaft rothe Farbe an, welche sie jedoch im Alkohol sehr schnell verlieren. Bei der mikroskopischen Untersuchung solcher Präparate bemerkt man, dass, während alle anderen Gewebe ganz entfärbt erscheinen, das elastische Netz auch in seinen feinsten Verzweigungen eine prächtig scharlachrothe Färbung beibehält. Giebt man diesen Schnitten eine contrastirende blaue Färbung mit Hämatoxylin oder Methylblau, so erzielt man ganz reizende Präparate, bei welchen die elastischen Fasern mit grosser Evidenz wie rothe Corallenverzwei- gungen vom blauen Untergründe abstechen. c) Mit diesem Stoffe kann man auch eine Massenfärbung kleiner Gewebestücke vornehmen und zwar noch besser bei dem mit Müller- 11* 164 Minervini: Modificationen der Weigert'schen Methode. XVIII, 2. scher Flüssigkeit fixirten Material, als bei jenein mit Alkohol oder Formalm. Wie mir schien, ging ganz dasselbe vor sich wie bei Weigert's Methode, mit welcher ich, im Gegensatz zu dem, was Andere beobachteten, die besten Resultate erzielte und zwar mit in Kaliumbichromat- oder Chromsäure-Lösungen fixirten Stücken. d) Diese letzte Wahrnehmung, welche ich öfters zu wiederholen Gelegenheit hatte, Hess mich muthmaassen, dass die Chromsäure die Wirkung hätte, die WEiGERT'sche Reaction klarer und deutlicher zu machen. Ich habe daher die nach Weigert's Methode gefärbten Schnitte der Wirkung von Chromsäure - Lösungen in verschiedenen Verdünnungen ausgesetzt, und habe thatsächlich eine merkliche Ver- besserung der Reaction constatirt. Die Bilder werden dann deutlicher, weil die elastischen Fasern eine dunklere , manchmal sogar eine schwarze Färbung annehmen, während der Grund der Präparate sich sicherer entfärbt. Die ge- eignetste Chromsäurelösung schien mir solche von 0*5 Procent zu sein. In sie bringt man die bereits in Alkohol entfärbten Schnitte und belässt sie darin nicht unter einer Stunde , dann wäscht man sie rasch mit Wasser, lässt sie durch gewöhnlichen, dann absoluten Alkohol gehen, überträgt in Xylol und schliesst ein. e) Im weiteren Verlaufe dieser Versuchsreiche gelangte ich zu der Ueberzeugung , dass die specifische Farbenreaction in unserem letzteren Falle in näherer Beziehung zur Chromsäure-Wirkung stände, indem diese nach vorausgegangener Fuchsinfärbung intensiver sei, als die mit dem in Weigert's Farbstoff enthaltenen Eisensalz. Ich gedachte diese beiden Momente zu vereinigen, indem ich die beiden Substanzen neben einander reagiren Hess, und ich habe einen neuen vom Fuchsin stammenden Farbstoff zubereitet unter Befolgung einer der WEiGERT'schen ähnlichen Procedur. Dabei habe ich durch Be- handlung des Fuchsins mit Chromsäure einen in Wasser unlöslichen, in Alkohol löslichen Niederschlag erzielt, der gleichfalls die Eigenart besitzt, die elastischen Gewebe nach Wahlverwandtschaft zu färben. Hier der von mir befolgte Gang: Man präparire auf warmem Wege eine wässerige Fuchsinlösimg von ein Procent mit Zusatz von ein Procent Resorcin. Nach der Abkühlung filtrirt man und fügt ein Viertel des Volumens einer 2procentigen Chromsäure- oder einer 5procentigen Kaliumbichromat- Lösung zu; man erhält einen schwarzen Niederschlag, den man bis zum Siedepunkte unter Schütteln der Mischung erhitzt; nach dem Kaltwerden filtrirt man. Das Filtriren erfolgt sehr langsam, weil XVIII, 2. Minervini: Modificationen der Weigert'schen Methode. 165 der feine Niederschlag die Papierporen verschliesst und sie fast un- durchdringlich für Wasser macht. Den Rückstand auf dem Filter wäscht man, trocknet im Brütofen bei 30°, dann löst man in 90pro- centigem Alkohol warm, indem man das ganze Filter in den Alkohol eintaucht. Man fügt darauf so lange Alkohol hinzu, bis das Volumen der Flüssigkeit wieder das ursprüngliche geworden ist (100 Theile). Man säuert sie mit einprocentiger Salzsäure an und filtrirt wieder. Auf diese Weise erhält man eine durchsichtige Lösung von wein- rother Farbe , die die Eigenschaft besitzt , die elastischen Fasern sehr dmikelviolett zu färben. Die Schnitte lässt man 2 oder mehr Stunden in der Farb- lösung, dann überträgt man sie in 90procentigen Alkohol bis zur vollständigen Entfärbung, welche nach etwa 30 Minuten erfolgt. f) Man kann auch nach diesem Verfahren eine Massenfärbung kleiner Gewebestücke erzielen, indem man sie in der Farblösung einen bis 2 Tage und dann in angesäuertem Alkohol ungefähr 12 bis 24 Stunden belässt. — Die beschriebenen Versuche habe ich im Laboratorium des Herrn Prof. Dr. Morisani angestellt, und ich benutze die Gelegen- heit, ihm hierfür meinen verbindlichsten Dank auszudrücken. Figurenerklärung. Figur 1. Hautgewebe vom Arm eines Mannes in MÜLLER'scher Flüssigkeit fixirt und nach Weigert's Methode gefärbt. Zeiss Ocular 3, Objectiv D; Vergrösserung 320. Figur 2. Hautgewebe der inneren Handfläche eines Mannes in Alkohol fixirt, nach Weigert's Methode gefärbt und mit Oöprocentiger Chromsäurelösung behandelt. Gleiche Vergrösserung. Figur 3. Hautgewebe der Bauchdecke eines Mannes in MÜLLER'scher Flüssigkeit fixirt und mit dem Product von Safranin und Eisen- chlorid gefärbt. Gleiche Vergrösserung. Figur 4. Hautgewebe der Bauchdecke eines Mannes in MÜLLER'scher Flüssigkeit fixirt und mit dem Product von Fuchsin und Chrom- säure gefärbt. Gleiche Vergrösserung. [Eingegangen am 9. August 1901.] 166 Heidenhain: Paraffineinbettung mit Schwefelkohlenstoff. XVIII, 2. Ueber eine Paraffineinbettung mit Schwefelkohlenstoff als Durchgangsmedium. Von Prof. Dr. Martin Heidenhain in Tübingen. Seit Jahr und Tag benutze ich für wissenschaftliche Zwecke fast ausschliesslich ein neues Einbettungsverfahren, bei welchem als Durch- gangsmedium Schwefelkohlenstoff angewandt wird. Die vorzüglichen Erfahrungen, welche ich mit diesem Mittel gemacht habe, legen es mir nahe, die neue Methode zur allgemeinen Anwendung zu empfehlen. Ich nehme drei geräumige sogenannte Standpulvergläser (Pillen- gläser) mit sehr gut (!) eingeriebenem Stopfen. In das erste Glas bringe ich eine Mischung von Schwefelkohlenstoff und Alkohol zu gleichen Theilen , in das zweite und dritte Glas reinen Schwefel- kohlenstoff. Die Stücke müssen, nachdem sie vollkommen entwässert sind, jedes dieser drei Gläser passiren; den Aufenthalt bemesse ich jeweilen auf 24 Stunden. Bei der Einbettung benutze ich von jeher zwei Thermostaten; der eine steht auf 36 bis 38°, der andere auf 56 bis 57°. Ich habe mir nun als Durchgangsmedien zwei Schwefelkohlenstoff- Paraffin- mischungen in folgender Weise bereitet. Ich beschicke zwei wiederum sehr gut (!) schliessende Standpulvergläser mit Schwefelkohlenstoff, welcher etwa den fünften bis vierten Theil der Höhe des Glases auffüllen darf. Darauf stelle ich die beiden Gläser, das eine auf (!) den einen, das andere auf (!) den anderen Thermostaten und löse darin Paraffin zu 55°, so viel sich lösen mag. Es kommen sehr grosse Quantitäten zur Lösung. Man wird in dem Glase, welches auf dem höher temperirten Thermostaten steht, je nach Umständen (die Zimmerwärme kommt sehr in Betracht) das 3 - bis 4fache Volumen Paraffin und noch mehr lösen können. Dabei pflegt diese Paraffinmischung nur eine Temperatur von 41 bis 42° C. zu haben! Das andere Glas auf dem niederer temperirten Thermostaten löst entsprechend weniger , aber immerhin noch sehr viel Paraffin und XVIII, 2. Heidenhain: Paraffineinbettung mit Schwefelkohlenstoff. ißj hat dabei eine Temperatur, welche sicherlich noch weit unter der Körpertemperatur liegt. Nachdem die Stücke die beiden Mischungen, von der niederen zur höheren Temperatur ansteigend, passirt haben, bringe ich sie in reines Paraffin zu 55°, und zwar benutze ich zwei Paraffinschalen; den Aufenthalt in jeder bemesse ich auf eine bis anderthalb Stunden in jeder Schale. Es ist durchaus nöthig, auch das reine Paraffin in dieser Weise einmal zu wechseln , um den überschüssigen Schwefel- kohlenstoff total aus den Stücken auszuziehen. Die Vortheile der Methode sind folgende: 1) Der Schwefelkohlenstoff hat eine vorzügliche Durchdringungs- fähigkeit, die vielleicht so gross ist, wie bei keinem anderen Mittel. Wahrscheinlich hängt dies mit dem niederen Mol ecularge wicht des Schwefelkohlenstoffs zusammen im Verhältniss zu dem relativ hohen Moleculargewicht der gewöhnlich benutzten ätherischen Oele. Wegen dieser grossen Durchdringungsfähigkeit sind die Einbettungen sehr vollkommene, auch bei schwierigen Objecten. 2) Der grösste Theil des Einbettungsprocesses vollzieht sich bei sehr niederer Temperatur 5 eine Temperatur von 41 bis 42° C, wie sie bei der zweiten Paraffinmischimg vorzuliegen pflegt, liegt ja nur wenig über der normalen Körperwärme und doch wird schon hier die Einbettung beinahe vollständig, weil der Schwefelkohlenstoff bei dieser Temperatur schon ausserordentlich grosse Mengen Paraffin in Lösung hält. 3) Wegen der niederen Temperatur der Paraffinmischungen kann man die Stücke darinnen sehr lange liegen lassen ohne ihnen zu schaden. Dadurch wird die Einschmelzung eine um so vollkommenere. Deswegen ist es auch möglich, den Aufenthalt in dem reinen Paraffin bei 56 bis 57° C. auf ein möglichst geringes Zeitmaass herabzusetzen, wodurch die Gefahr der Schädigung der Stücke durch Hitzewirkung verringert wird. 4) Der Schwefelkohlenstoff wirkt nicht oxydirend. Daher kann man Stücke, die mit leicht oxydirbaren Farben durchgefärbt wurden (Chromhämatoxylin), in gut gefärbtem Zustande aus der Einbettungs- procedur hervorgehen sehen. Die vermittels des Schwefelkohlenstoffes eingeschmolzenen Stücke haben ein sehr gutes Aussehen. Sie zeigen sich glasig, durchsichtig, honigfarben, homogen und schneiden sich gewöhnlich vorzüglich. Die Methode war mir eine grosse Unterstützung bei Untersuchung des Herzmuskelfleisches. Es ist ja jedem Mikroskopiker bekannt, 168 Heidenhain: Paraffineinbettung mit Schwefelkohlenstoff. XVIII, 2. dass die Musculatur beim Schneiden leicht reisst; indessen erhielt ich vom Herzmuskel beim Längs- und Querschneiden prachtvolle, glatte und ganz gleichmässige Serien von 4 ^ welche bei der Unter- suchung mittels des Apochromaten sich nach jeder Richtung hin als vollkommen tadellos erwiesen. Man wolle wohl beachten: es ist ja richtig , dass wir auch sonst meist in der Lage sind , dünne Schnitte erzielen zu können; allein beim Dünnschneiden nehmen die Messerartefacte , wenn das Object nicht sehr günstig ist , leicht in starkem Maasse zu. Davon war hier schlechterdings nichts zu spüren; ich habe noch nie so gute Muskelschnitte erhalten wie an der Hand der neuen Einbettungen. Im übrigen habe ich bisher Hunderte von Stücken der alier- verschiedensten Organe nach der neuen Methode eingebettet und bin mit dem Erfolge fast ausnahmslos zufrieden gewesen. Es sind nun noch einige Vorsichtsmaassregeln zu be- sprechen , welche bei der Einbettung beachtet werden sollten. In erster Linie mache ich auf die eminente Feuergefährlichkeit des Schwefelkohlenstoffs aufmerksam. Aus diesem Grunde habe ich die Schwefelkohlenstoffgläser, ebenso die Gläser mit den Paraffin- mischungen, nur in dem entlegensten Winkel des Laboratoriums, weit ab von allen offenen Flammen, zu öffnen gewagt. In zweiter Linie möchte ich einen Wink in Bezug auf die Vermeidung des üblen Geruches geben. Es steht zwar in dem Lehrbuch von Wislicenus geschrieben, der Schwefelkohlenstoff sei eine angenehm riechende Flüssigkeit, indessen bin ich anderer Ansicht, da ich anfangs stark unter dem üblen Gerüche zu leiden hatte , bis ich die Erfahrung machte , dass sich derselbe fast voll- kommen vermeiden lässt. Der flüssige Schwefelkohlenstoff pflegt nämlich fast überhaupt kein Gas zu entbinden, wenn er nicht irgend- wie geschüttelt oder in Bewegung gesetzt wird. Manche Mikro- skopiker haben, ebenso wie viele Chemiker, die schlechte Angewohnheit jedes Glasgefäss , dessen Inhalt sie betrachten wollen , tüchtig zu schütteln; wer dies nicht unterlassen kann, der wird eine explosions- artige Entwicklung von Schwefelkohlenstoffgas zu beklagen haben. Umgekehrt: Hebt man die Gläser recht langsam von ihrem Platz, so dass die Flüssigkeit in vollkommener Ruhe verharrt, so findet eine merkbare Gasentwicklung nicht statt, und man wird dann auch keinen üblen Geruch in seinem Laboratorium haben. Insbesondere mache ich noch darauf aufmerksam , dass man beim Uebertragen der Stücke dieselben nicht hineinwerfen, sondern behutsam hinein- XVIII, 2. Heidenhain: Paraffineinbettung mit Schwefelkohlenstoff. 169 legen soll, um das Aufrühren der Flüssigkeit und die Gasentwicklung zu vermeiden. Es ist dienlich, wenn die Stücke in den Paraffinmischungen eine Zeit lang gelegen haben, den Inhalt der Gläser durch Herumschwenken durchzumischen, um so die Einschmelzimg zu befördern. In diesem Falle verlasse ich mit meinem Glasgefäss das Arbeitslocal , nehme dann den Stopfen heraus, schwenke um , warte bis die Gas- entwicklung beendet ist, setze dann erst den Stopfen wieder auf und trage das Gefäss an seinen Platz zurück. Des weiteren macht man während der Einbettung folgende Be- obachtungen. Beim Uebertragen in die Alkohol-Schwefelkohlenstoff- Mischung werden die Stücke meistens glasartig durchsichtig, eine Folge der homogenen Durchdringung. Beim Einbringen in den reinen Schwefelkohlenstoff pflegen sie sich wiederum etwas zu trüben. Die Stücke schwimmen sowohl in der Mischung wie auch im reinen Schwefelkohlenstoff zuerst an der Oberfläche der Flüssigkeit; nur allmählich senken sie sich zu Boden, ein Vorgang, der im Sinne einer allmählichen Uebertragung aus dem einen in das andere Medium wirksam ist. Die Mischung von Alkohol und Schwefelkohlenstoff ist nicht un- begrenzt haltbar. Sie verfärbt sich bald, scheidet Schwefel und Kohlenstoff ab und muss deswegen , und zwar sobald sich irgendwelche feinen grauen T heilchen zeigen, erneuert werden. Auch die Gläser mit reinem Schwefelkohlenstoff pflegen nach einiger Zeit die gleichen Zersetzungserscheinungen zu zeigen und müssen dann ebenso erneuert werden. Dagegen halten sich die Paraffin-Schwefelkohlenstoff-Mischungen sehr lange, jedenfalls monate- lang, so dass man der Mühe der oftmaligen Wiederherstellung dieser Mischungen überhoben ist. Beim Uebertragen vom reinen Schwefelkohlenstoff in die erste Paraffinmischung werden die Stücke abermals vollkommen durch- sichtig und sehen meist sehr schön honigfarben oder bernsteinartig aus; beim Uebertragen in die zweite Paraffinmischung nimmt jedoch der Grad der Durchsichtigkeit wieder ab. Das reine Paraffin muss durchaus einmal gewechselt werden. Wenn nämlich ein gewisser Gehalt an freiem Schwefelkohlenstoff zurückbleibt, so wird das Paraffin bröckelig. Man kann allerdings auch dann die Stücke sehr gut schneiden, indessen pflegt der Paraf- finrahmen des Schnittes zu brechen und zu bröckeln, was ja, nament- lich bei Serien, sehr unbequem sein kann. 170 Kolster: Paraffineinbettung im luftleeren Räume. XVIII, 2. Nach meinen eigenen Erfahrungen zu urtheilen wird die neue Methode sich rasch einbürgern und viele Freunde finden. Tübingen, August 1901. [Eingegangen am 12. August 1901.] Paraffineinbettung im luftleeren Räume. Von Dr. Rud. Kolster, Docent an der Universität zu Helsingfors (Finland). Beim Einbetten in Paraffin ist es wohl einem jeden Mikrosko- piker passirt, dass Gewebstheile, die ursprünglich verschiedene Con- sistenz besitzen und doch zusammengehören, beim Schneiden von einander gerissen werden. Dieses geschieht in geringerem Maasse auch noch zuweilen, wenn das Organ, welches eingebettet ist, eine homogene Beschaffenheit besitzt. So hat wohl jeder Pathologe unter seinen Präparaten einige zu verzeichnen, welche kernlose Zellen enthalten, und die ihm die Frage nahe gelegt haben, ist hier wirklich eine Coagulationsnekrose, ein sonstiger Untergang der Kerne vorhanden, oder was liegt hier vor? Eine genauere Prüfung zeigt, besonders bei Anwendung stär- kerer Vergrösserung, dass einzelne Zellen Lücken haben, dass in anderen der Kern verschoben ist, — lässt sich sogar durch pa- rallele Striche nachweisen, dass das Messer Scharten gehabt, so wird der Thatbestand ganz klar. Dass alsdann Kerne aus den Zellen gerissen sind, wird Keiner bezweifeln. Es liegt auf der Hand, der Schärfe des Messers einen bedeuten- den Antheil an dem angerichteten Unheil zuzuschreiben — aber hier liegt der Fehler nicht stets. Die noch so gute Schärfe des Messers und die sorgsamste Einbettung kann es nicht verhindern, dass bis- weilen, z. B. in Nervenzellen, ein Schnitt einen gegen die Peripherie verschobenen Kern zeigt, ebenso gut wie dieses sich manchmal an Nierenepithelien wahrnehmen lässt. XVIII, 2. Kolster: Paraffineinbettung im luftleeren Räume. 171 Es ist nun eine wichtige Frage, wie solches zu verhindern sei. Hier mögen sofort Zweifel ausgesprochen werden, ob es überhaupt in allen Fällen möglich sein wird, ein Mittel zu finden, um derartige Zerreissungen der Präparate auszuschliessen. Aber ein jeder Weg, um sicherer zu gehen, besonders wenn es sich um seltene, verschie- dene Härtegrade zeigende Stücke handelt , wird als ein Fortschritt zu begrüssen sein. Mit Versuchen, Paraffin verschiedener Härtegrade zu benutzen, kommt man zum Theil dem Ziele näher , aber wenn nur wenig Ma- terial vorliegt, ist ein Hin- und Hertappen, bevor das Rechte ge- troffen ist, wenig angebracht. Ein anderer Weg scheint mehr Erfolg zu versprechen. Der- selbe besteht darin, sich ein möglichst dichtes Paraffin zu ver- schaffen, gleichzeitig mit der Sicherheit, dass das Lösungsmittel des- selben gänzlich entfernt ist. Den ersten Theil hat Graf Spee in der Weise zu erfüllen ge- sucht, dass er das Paraffin eine längere Zeit kocht, dabei gehen Massen von Dämpfen ab, nach einiger Zeit nimmt das Paraffin eine dunkele, gelblichbraune Färbung an — und es wird bedeutend härter und fester. Kleine Veränderungen des Schmelzpunktes treten dabei ein, sind aber von geringer Bedeutung. Mit diesem Paraffin vermeidet man eine Menge Zerreissungen, und habe ich derartig vorbereitetes seit Jahren beinahe ausschliess- lich verwandt. Unfehlbar ist dasselbe aber leider nicht, und ich fand mich verschiedentlich veranlasst, nach einer weiteren Abhülfe der erwähnten Missstände zu suchen. In den Lehrbüchern der histologischen Technik finden sich keine Mittel angegeben, diesen zu entgehen — kaum dass dieselben er- wähnt werden. Dagegen findet sich bei Fol 1 eine kurze Angabe, vermittels Benutzung des Vacuum einzubetten. Von dieser Notiz ausgehend habe ich eine Reihe von Versuchen angestellt und bin mit den zuletzt erhaltenen Resultaten sehr zu- frieden. Durch Anwendung des luftleeren Raumes, wie er jederzeit mit einer Wasserluftpumpe hergestellt werden kann, entfernt man jede noch so geringe Spur von den flüchtigen Lösungsmitteln (Toluol, Xylol und Chloroform werden ausschliesslich von mir benutzt) und *) Fol, H. , Vergleichende mikroskopische Anatomie. Bd. I. Dio mikroskopisch -anatomische Technik. Leipzig 1884, p. 121 f. 172 K ölst er: Paraffineinbettung im luftleeren Räume. XVIII, 2. erhält einen festen Paraffinblock, der so ziemlich durchgehend s die- selbe Consistenz besitzt. In dieser Weise ist es mir gelungen, knorpelige embryonale Hüllen nebst darin liegendem Rückenmark und anliegendem Gewebe in tadellose Serien — von 4 bis zu 5 /u Dicke zu zerlegen. Auch die Chorda von Petromyzon mit ihrer harten Hülle lässt sich nach solcher Einbettung leicht im Zusammenhang mit Rückenmark, Spinal- ganglien und umliegender Musculatur in Schnitte von dieser und in günstigen Fällen auch von geringerer Dicke serienweise zerlegen. Binnen Kurzem fand ich es aber bedeutend vortheilhafter, nicht die bei Fol sich findende Vorschrift zu befolgen, nach welcher erst der Schluss der Einbettung im Vacuum vor sich geht. Eine bedeu- deutende Zeitersparniss lässt sich erreichen, wenn dieselbe von vorn- herein im luftleeren Raum stattfindet. Dieses ist auch natürlich, denn das Verdunsten des Lösungsmittels geht rascher vor sich und er- fordert, da dasselbe gänzlich in dieser Weise zu entfernen ist und durch sein Verdunsten dem Paraffin sogleich Zutritt gewährt, viel weniger Zeit, ein Umstand, der besonders bei Bearbeitung grösserer Stücke von Werth ist. Allerdings lassen sich nicht alle drei genannten Lösungsmittel mit gleicher Zeitersparniss in Vacuum verwenden. So ist es auf- fallend, wie lange sich das Chloroform , wenn auch nur spurenweise noch nachweisen lässt. Xylol und Toluol dagegen verschwinden schnell. Mein Verfahren bei der Einbettung wechselt daher ein wenig, je nachdem Chloroform oder Xylol und Toluol als Lösungsmittel ver- wendet werden. Bei Anwendung des ersten werden die mit Chloroform in ge- wöhnlicher Weise durchtränkten Präparate erst in den Wärmeschrank in eine Mischung von Paraffin und Chloroform und nach entsprechen- dem Aufenthalt in demselben in reines Paraffin übertragen und darauf unter Luftleere gebracht. Wird dagegen Xylol oder Toluol benutzt, so lässt sich das Prä- parat aus diesen Flüssigkeiten direct in reines Paraffin unter Luftleere bringen, nur bei äusserst empfindlichen Stücken kann es vortheilhaft sein, ein Gemisch von dem Lösungsmittel und Paraffin zu verwenden. Sofort beim Auspumpen der Luft (als Behälter werden am besten kurze Proberöhrchen benutzt) tritt eine lebhafte Gasentwicklung ein, die sich durch das Auftreten grosser Blasen kennzeichnet. Diese hört nach einer gewissen Zeit auf, nachdem eine Periode langsamer XVIII, 2. Kolster: Paraffineinbettung im luftleeren Räume. 173 Bildung kleiner Blasen vorangegangen ist, und alsdann ist die Ein- bettung vollendet. Der hierzu nöthige Apparat lässt sich jederzeit, wo eine Wasser- luftpumpe zur Verfügung steht, mit Leichtigkeit improvisiren. Helsingfors, im April 1901. [Eingegangen am 2. August 1901.] 174 Referate. XVIII, 2. Referate. 1. Präparationsmethoden im allgemeinen. Pfeiffer, R., Ein neues Präpari rmikroskop (Centralbl. f. Bacteriol., Abtli. ' 1, Bd. XXVII, 1900, No. 14, 15, p. 535 —537). R. Pfeiffer hat im Verein mit der Firma Leitz in Wetzlar ein neues Präparirmikroskop construirt, welches ihm z. B. bei der Iso- lirung der Speicheldrüsen der Mücke (bei Nachprü- fung der Ross'schen An- gaben) gute Dienste leistete. Das Gesichtsfeld ist gross, das Bild wird wie bei den ZEiss'schen Doppelfernroh- ren durch Prismen auf- gerichtet, wobei sich das Auge nur 13 bis 15 cm über der Fläche des Mikro- skoptisches befindet. Be- wegung des Tubus durch Zahn und Trieb, geräumige Tischplatte mit Handstützen, Irisblende. Für die Reise ist das Stativ zum Zu- sammenklappen eingerich- tet. Zu diesem Zwecke XVIII, 2. Referate. 17,-, lässt sich der Tisch nach Lösen einer Klemme in der Längsachse des Instrumentes um 90° drehen, auch die Handstützen sind mit Charnier versehen und werden vorher auf der Tischplatte zusammen- geklappt. Endlich sind die beiden Schenkel des Hufeisenfusses be- weglich, resp. zusammenklappbar. Das zusammengelegte Instrument befindet sich in einem Mahagonikasten von nur 20x14x8 cm Aus- dehnung. Die Vergrößerungen mit den Objectiven 1, 2, 3 sind 32-, 44-, 65 fach bei einer Objectdistanz von 45, 25, 15 mm. Der Preis des Instrumentes beträgt 150 Mark. Czapleivski {Köln). Beckmann, F., Ueber Spectrallampen (Zeitschr. f. physikal. Chem. Bd. XXXIV, 1900, p. 593; Bd. XXXV, 1900, p. 443 u. 652). Es werden hier verschiedene Spectrallampen beschrieben , bei denen der die Flamme färbende Stoff durch Zerstäubung vermittels poröser Körper und Druckluft der Flamme zugeführt wird und die in ihrer Wirkung von keiner anderen Lampe erreicht werden. Wegen der Vorrichtungen hierzu und der Construction der Lampen muss auf die Abhandlungen verwiesen werden. R. Brauns. 'O l Mallory, F. B., A contribution to staining methods. I. A differential stain for connective tissue, fibrillse, and reticulum. IL Chloride of iron hsematoxyline for nuclei and fibrin. III. Phos- photungstic acid hsematoxylin for neuroglia fibres (Journ. Exper. Med. vol. V, 1900, no. 1, p. 15). I. Die folgende Färbemethode ist nach Verf. die beste bis jetzt für diesen Zweck angegebene. Sie ist insofern nicht absolut specifisch, als sie auch einige hyaline Substanzen färbt, doch sind diese morphologisch so von den Fibrillen und dem Reticulum ver- schieden, dass eine Verwechslung nicht stattfinden kann. Die Methode ist auch verwendbar zum Studium von Fibrin , glatten und quer- gestreiften Muskelfasern und Amyloi'dsubstanzen. Methode: Fixi- rung in Sublimat oder ZENKER'scher Flüssigkeit, Einbettung in Cel- loi'din oder Paraffin, Färbung der Schnitte in einer wässerigen Lösung von Säurefuchsin von 0'05 bis 0*1 Procent während einer bis 3 Mi- nuten, Auswaschen in Wasser, Einlegen in eine einprocentige wässerige Lösung von Phosphormolybdänsäure (eiiie Minute oder länger ; Platin- oder Glasnadeln). Auswaschen in zweimal gewechseltem Wasser, Färbung in der folgenden Farbrnischung 2 bis 20 Minuten oder länger: 176 Referate. XVIII, % Anilinblau, wasserlöslich (Grübler) .... 0'5 g Orange G. (Grübler) 2*0 „ Oxalsäure 2-0 „ Wasser 100-0 „ Auswaschen in Wasser, Entwässern in 95procentigem Alkohol, Ueber- tragen auf den Objectträger, Abtrocknen mit Fliesspapier, Aufhellen in Xylol oder Oleum Origani Cretici, Einschluss in Xylol-Balsam. Die Bindegewebsfibrillen und das Reticulum, Amyloid, Schleim und einige andere hyaline Substanzen sind blau gefärbt , Kerne , Protoplasma, elastische Fasern, Achsencylinder, Neurogliafasern, Fibrin roth, rothe Blutkörperchen, Markscheiden gelb. Die verschiedenen Bildungen färben sich nicht mit gleicher Intensität, so dass einzelne sehr scharf hervortreten. Es gilt das besonders von Bindegewebsfibrillen und Reticulum, ebenso für Fibrin, glatte und quergestreifte Muskelfasern. Will man das Bindegewebe so scharf als möglich hervortreten lassen, so lasse man die Säurefuchsinfärbung fort, dann werden Kerne und Protoplasma gelb , und die blauen Fibrillen des Reticulums treten schärfer hervor. — Die besten Resultate erhält man wie oben an- gegeben nach Fixiruug in Sublimat oder ZENKER'scher Flüssigkeit, doch kann man auch hübsche Bilder nach der von dem Verf. vor einiger Zeit angegebenen Fixirung für Neurogliafasern erhalten. 1 Nach Alkohol und anderen Fixiruugsflüssigkeiten wird Alles blau. Man kann die Methode auch für Fibrin, glatte und quergestreifte Muskeln verwenden , da diese im Gegensatz zu dem Bindegewebe scharf hervortreten , besonders wenn man die Färbung mit Säure- fuchsin etwas verlängert, oder wenn man die Schnitte einige Minuten in Alkohol auswäscht, der das Anilinblau ziemlich rasch auszieht, das Säurefuchsin aber nicht angreift. Das Amyloid tritt hauptsächlich in der Leber hervor (blau gegen die rothen Leberzellen), Schleim in Epithelzellen wird blau gefärbt. — Diese Methode kann auch zum Studium des Central n er vensyste ms verwendet werden, ent- weder nach den angegebenen Fixirungsflüssigkeiten oder nach der er- wähnten Methode des Verf. für die Neuroglia. Methode: 1) Fixi- rung. Dünne Ausschnitte des Nervengewebes (2 bis 5 mm) kommen für wenigstens 4 Tage in eine 4procentige wässerige Lösung von Formaldehyd (10 Procent Formol); Uebertragen in eine gesättigte wässerige Pikrinsäurelösung (4 Tage oder länger); Uebertragen in eine 5procentige wässerige Lösung von doppeltchromsaurem Ammoniak J ) Journ. exper. Med. vol. II, 1897, p. 532. XVIII, 2. Referate. 177 (4 Tage im Brutofen). Man verwende eine reichliehe Menge dieser Lösung und wechsele nach 24 Stunden, um jeden Niederschlag zu ver- hüten. Alkohol, Celloidineinbettung. Gefärbt wird in einprocentiger wässeriger Lösung von Säurefuchsin (2 bis 5 Minuten); schnelles Aus- waschen in Wasser, einprocentige wässerige Lösung von Phosphor- molybdänsäure (eine bis 2 Minuten), Auswaschen in zweimal gewech- seltem Wasser; darauf Tinction (eine bis 3 Minuten) in der Anilinblau- und Orange G-Lösung (s. 0.), Auswaschen in Wasser, Entwässern in 95procentigem Alkohol, Abtrocknen auf dem Objectträger, Aufhellen mit Xylol oder Origanumöl (Ol. Orig. Cretici), Einschluss in Xylol- Balsam. Bindegewebe blau, Neurogliafasern tiefroth, Achsencylinder und Ganglienzellen heller roth. IL Diese Methode giebt gleichmässig schnelle und zufrieden- stellende Resultate nach allen gebräuchlichen Fixirungsflüssigkeiten mit Ausnahme vielleicht des Formols. Einbettung in Celloidin oder in Paraffin. Man färbe sodann die Schnitte auf dem Objectträger 3 bis 5 Minuten in einer lOprocentigen wässerigen Lösung von Eisen- chlorid. Abtropfen und Trocknen der Schnitte mit Fliesspapier. Dar- auf Uebergiesseu mit einigen Tropfen einer frisch bereiteten einpro- centigen wässerigen Hämatoxylinlüsung. Ist alles Hämatoxylin durch den Ueberschuss des Eisenchlorids niedergeschlagen, so giesse man die Lösung ab und ersetze sie durch neue. In 3 bis 5 Minuten sind die Schnitte dunkelschwarzblau gefärbt. Abwaschen in Wasser. Ent- färben und Differenziren in einer viertelprocentigen wässerigen Lo- sung von Eisenchlorid. Die Schnitte müssen in der Lösung fort- während bewegt werden. Die Differenzirung ist in einer Zeit von wenigen Secunden bis zu einer oder mehreren Minuten beendigt; Abwaschen in Wasser, Alkohol, Origanumöl, Xylol-Balsam. Es sind bei dieser Methode ganz bestimmte Concentrationen der Lösunger angegeben, doch können diese, ohne die Resultate zu verändern, in weiten Grenzen schwanken. Das Wesentliche ist, die Schnitte tief zu färben und dann langsam zu entfärben. Man kann die Differen- zirung in jedem Moment beendigen, wenn man die Schnitte in Wasser überträgt. Mitunter ist es praktisch, die Schnitte unter dem Mikro- skop zu untersuchen, um den Grad der Entfärbung festzustellen. !>i»' Concentration der Hämatoxylinlüsung ist nicht von Wichtigkeit. Man muss nur genug Hämatoxylin haben, um die gesammte Menge des Eisens im und um den Schnitt damit zu sättigen. Am einfachsten ist es, eine Prise von Hämatoxylinkrystallen in einigen cc Wassei im Reagensgläschen zu lösen. Die Erfahrung wird bald lehren wie- Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 2. 12 178 Referate. XVIII, 2. viel man braucht. Ist die Hämatoxylinlösung älter als einen oder 2 Tage , so ist die erhaltene Färbung mehr graublau und nicht so glänzend : Scharfe , dauerhafte , dunkelblaue Färbung der Kerne, graublaue bis schwarzblaue Färbung der Fibrillen. Wenn die Differen- zirung nicht zu weit gegangen ist, so treten die contractilen Elemente der quergestreiften Muskelfasern sehr scharf hervor. In Zexker- Präparaten nehmen die rothen Blutkörperchen eine graugrüne Farbe an, Bindegewebe wird blassgelb. Der Kern der Ainoeba coli färbt sich mit der Methode sehr deutlich. III. Diese Methode ist schon früher veröffentlicht worden. 1 Zu jener Zeit war die von Merck hergestellte Phosphorwolframsäuic nicht rein. Sie enthielt Spuren von Phosphormolybdänsäure und weiter einen oxydirenden Körper, welcher Hämatoxylin schnell reifen Hess. Eine nach den damaligen Vorschriften hergestellte Farblösung mit der jetzigen reinen Phosphorwolframsäure ergiebt negative Resul- tate , da die Hämatoxylinlösung auch nach Monaten noch nicht ge- reift ist. Man kann diese Reifung indessen schnell herbeiführen durch die für das Alaun-Hämatoxylin angegebene Methode, am besten mit Wasserstoffsuperoxyd. Die auch nach anderen Richtungen hin verbesserte neue Methode ist die folgende. Fixirung der Gewebs- stücke mit der oben angegebenen Formaldehyd - Pikrinsäure - Am- moniumbichromat- Methode. Zur Färbung kommen die Schnitte für 15 bis 30 Minuten in eine halbproeeiitige wässerige Lösung von über- mangansaurem Kalium. Auswaschen in Wasser, Uebertragen in eine einprocentige wässerige Lösung von Oxalsäure (wieder 15 bis 30 Minuten). Auswaschen in 2- bis 3mal gewechseltem Wasser. Färbung in der folgenden Lösung (12 bis 24 Stunden oder längen: Hämatoxylin Ol Wasser 80-0 Phosphorwolframsäure (Merck), lOprocentige wäs- serige Lösung 20 - Wasserstoffsuperoxyd (U. S. Pharm.) 02 (Man löse das Hämatoxylin unter Erhitzen in etwas Wasser und setze es nach einigem Abkühlen dem Rest des Wassers und der Säure zu, dann das Wasserstoffsuperoxyd. Die Lösung hält sich vollkommen gut und kann wiederholt verwendet werden.) Rasclx-s Auswaschen in Wasser, schnelles Entwässern in 95procentigem Al- kohol, Origanumöl, Xylol- Balsam. Kerne, Neurogliafasern und \) Journ. Experim. Med. vol. 111, 1898, p. IUI. XVIII, 2. Referate. 179 Fibrillen blau, Achsencylinder und Nervenzellen blassrosaroth, Binde- gewebe tiefrosaroth. Die blaue Farbe ist etwas empfindlich gegen- über hellem Licht und verbleicht bei längerer Belichtung zu rosa. Wünscht man eine permanente specifische Färbung der Neuroglia- fasern , so bringe man die Schnitte nach Färbung in der oben an- gegebenen Hämatoxylin-Phosphorwolframsäurelösung und Auswaschen in Wasser in eine 30procentige alkoholische Lösung von Eisenchlorid für 5 bis 20 Minuten (selten länger) , dann Auswaschen in Wasser und Entwässern wie oben angegeben. Jetzt treten die Kerne , die Neuroglia fasern und das Fibrin in hellblauer Farbe deutlich hervor, alles Uebrige ist entfärbt oder zeigt einen blassgelben oder grauen Farbenton. Die auf diesem Wege erhaltenen Resultate sind im wesentlichen identisch mit denen, welche mit einer der modificirten Fibrinfärbungen erhalten werden , und die vorliegende Methode hat den wesentlichen Vortheil , dass man sie auf eine beliebig grosse Anzahl von Schnitten auf einmal verwenden kann. Man erhält mit ihr auch ziemlich scharf in den ausserhalb des Rückenmarks ge- legenen Nervenfasern die LANTERMANN'schen Einkerbungen. — Die Hämatoxylin-Phosphorwolframsäurefarblösung kann auch gelegentlich mit gutem Erfolge für irgendwelche sonstigen Gewebe , die in ver- schiedener Weise fixirt sind , verwendet werden. Man braucht ge- wöhnlich 2 bis 24 Stunden zur Färbung. Kerne, Fibrin, elastische Fasern und die contractilen Elemente färben sich blau , die anderen Elemente rosa bis roth. Schieferdecker (Bonn*. Tische], A., Untersuchungen über vitale Färbung (Anat. Hefte, H. 52, 53, 1901, p. 417 -530 m. 6 Tfln.). Was wir über den Bau der Zellen wissen, beruht alles auf Be- obachtung von tixirten Objecten. Wie weit diese Fällungsbilder (A. Fischer) der Wirklichkeit entsprechen , ist durchaus nicht zu sagen. Es ist daher sehr wünschenswerth , der lebenden Zelle auf mikroskopischem Wege näher zu treten. Die Grenzen , innerhalb deren sich solche Untersuchungen an der lebenden, unveränderten Zelle bewegen können, sind jedoch bei den uns heute zur Verfügung stehenden Hülfsmitteln sehr eng gezogen. Es wäre daher ein grosser Vortheil, wenn wir in derselben Weise wie an der fixirten, so auch an der lebenden Zelle bestimmte Elemente ihres Plasmas vor den übrigen durch Färbung deutlich hervortreten lassen könnten. Ob dieses Ziel überhaupt erreichbar ist, und welche Schlüsse sich even- tuell auf diesem Wege über den architektonischen Aufbau des Plasmas N iL'* 180 Referate. XVIII, 2. ermitteln lassen, das festzustellen war der Zweck dieser Untersuchung. Das Material lnusste besondere Bedingungen erfüllen. Die Zellen mussten genügend gross und so beschaffen sein, dass sie histologische Details , soweit dieselben an der lebenden Zelle überhaupt sichtbar sind , leicht erkennen liessen. Auch mus,ste es möglich sein , den Erfolg der „vitalen" Färbung durch längere Zeit am lebenden Thier verfolgen zu können. Vortrefflich eignen sich hierzu gewisse grosse Zellen besitzende Amphibienlarven, die sich bequem im Wasser auf- ziehen lassen, so die von Rana temporaria , Siredon pisciformis und Salamandra maculosa. (Von den beiden ersten Arten wurden nur die Larven einer bestimmten Entwickluugsperiode, Rana 8 bis 10 mm, Siredon 10 bis 13 mm Länge untersucht, von Salamandra dagegen von sehr frühen zu diesen Untersuchungen überhaupt geeigneten Stadien, von etwa 20 mm Länge an bis zum Ende der Larvenperiode.) Die erstgenannten Larven stimmten mit den letztgenannten in den Erscheinungen vollkommen überein, doch vertragen sie nur relativ geringe Mengen von Farbstoffen. Bei Rana temporaria ist in Folge der starken Pigmentirung die erzielte Färbung nicht so deutlich. Die Larven wurden in Wasser gebracht, in welchem der betreffende Farbstoff gelöst war. Manche Farbstoffe mussten in heissem Wasser, welches dann abgekühlt wurde, gelöst, bisweilen auch filtrirt werden. Die zur Erzielung der Färbung nothwendigen , im allgemeinen sehr geringen Concentrationsgrade der Lösungen sind für die einzelnen Farbstoffe sehr verschieden. Von genaueren Angaben darüber sieht Verf. ab, da dabei sorgfältige Individualisirung nothwendig ist. Von jedem Farbstoff wurden mindestens zwei Lösungen geprüft, eine sehr schwache und eine ziemlich coneeiitrirte. Was die Wald der Farb- stoffe anbetrifft, so musste einfach empirisch vorgegangen werden, da über die eventuellen Beziehungen zwischen der chemischen Con- stitution eines Farbstoffes und seiner Fähigkeit „vital" zu färben nichts Näheres bekannt ist. So wurde einfach versucht, etwa 100 Farbstoffe auf die lebenden Thiere einwirken zu lassen, um nach den gefundenen Resultaten eine Auswahl treffen zu können. Vor- wiegend wurde nur eine Zellart auf ihr Verhalten gegenüber dem Farbstoff geprüft, die Zellen des Hautepithels und der Cornea. Die Untersuchung der Hauttheile wurde , soweit dies überhaupt möglich ist, direct am lebenden, leicht (z. B. durch Tabaksrauch) betäubten Thiere vorgenommen. Bei den Larven von Salamandra maculosa, namentlich bei älteren, ist es zur Erkennung des Details nothwendig, die Haut selbst abzuziehen , was bei einiger rebung leicht gelingt. XVIII, 2. Referate. 181 In physiologischer Kochsalzlösung Irisch untersucht , unterscheidet sich die Färbung solcher Hautstücke, wenn sie schonend abgelösl wurden , absolut nicht von der am lebenden Thiere , und man kann jede einzelne Gegend der Hautdecke auch mit stärkster Vergrösse- rung untersuchen. Da die Untersuchung wesentlich erleichtert wird, wenn die Epithelzellen möglichst wenige Pigmentkörnchen enthalten. so Avurden speciell die Larven von Salamandra maculosa noch vor ihrer Färbung nach der von dem Verf. und Flemming angegebenen Weise durch Wärme und Licht gebleicht. — Ihrer Wirkung auf die untersuchten Larven nach kann man die verwendeten Farbstoffe in mehrere Gruppen ordnen. Es giebt zunächst solche, die sich voll- kommen indifferent erweisen (auch bei concentrirter Lösung keine Aenderung der Zellen, auch bei längerer Einwirkung keine Störung der Functionen der Thiere). Solche Stoffe sind von Oxydations- producten des Anilins : Indulin, Nigrosin, Acetinblau ; von Oxazinen : Capriblau , Echtblau B A ; von Oxydationsproducten des Toluidins : Safranin , Safranin B extra ; von Oxydationsproducten der Gemische des Anilins und Toluidins : Diamantfuchsin, Fuchsin S, Rosanilin-Base, Rosanilin-Chlorhydrat , Alkaliblau, Wasserblau 4 B, Wasserblau R R, Bayerischblau 5 von Substitutionsproducten eines Wasserstoffatoms des Rosanilins durch Methyl- und Aethylradicale : Bleu de Lyon, Toluidinblau : von Substitutionsproducten von einer Phenylgruppe : Anilinblau; von Azofarben : Säuregelb, Orange, Helianthin, Azoblau, J anusgrün ; von Hyclrazinen : Tartrazin ; von Oxy-Azofarben : Tropäolin, Roccelline, Crocei'n, Scharlach, Echtroth D, Ponceau GG, Ponceau R, Xylidin-Ponceau , Bordeaux R , Congoroth ; von Phtaleinen : Eosin. Rose Bengal, Phloxin, Uranin, Cörulein S, Rhodamin, Pyronin; von Anthrazenen: Alizarinblau, ferner Indophenol, Toluylenblau , Indigo- blau, Chromogen, Orcein, Hämatoxylin, Härnatein, Muchämatei'n, Carm- alaun, Pikrocarmin, BioNDi'sches Gemisch. Es giebt Farben, welche einzelnen diesen indifferenten Stoffen chemisch sehr nahe verwandt sind und welche trotzdem eine sehr lebhafte Färbung von Zell- elernenten bewirken, ein Beispiel für die elective Thätigkeit der leben- den Zelle. Im geraden Gegensatz zu der angeführten Gruppe stehen andere Farbstoffe, welche sich als directe Gifte erweisen. Es kann diese Wirkung dabei ausgeübt werden, ohne dass die Gewebe über- haupt oder in deutlich merkbarem Grade gefärbt werden, so Corallin, Magdalaroth, Brillantgrün, Goldorange, Säurebraun, Brasilin; öderes tritt eine diffuse Färbung kurz vor dem Tode ein , so Benzyl-, Pfauen- und Baselerblau, das BixDSCHEDLER'sche und das Anilgriin. 182 Referate. XVIII, 2. das Anilin-, Metanil- und das Naphthylamingelb sowie das Acridin- orange. Bei Victoriablau erscheinen hierbei die pigmenthaltigen 1 lautstellen grün, die pigmentfreien blau, ein Unterschied, der sich auch noch bei anderen Farbstoffen findet. Sehr ungleich dagegen verhält sich das Methylgrün, welches eine Metachromasie zeigt. Ganz eigenartig giftig wirkt das Cyanin. Andere Farbstoffe nehmen eine eigenartige, gewissermaassen eine Mittelstellung zwischen den bisher besprochenen beiden Gruppen ein. Hierher gehören zunächst einige Körper , die vom Fuchsin , das selbst nicht färbt , abstammen und sämmtlich violett sind : Methyl-, Krystall-, HofmannV, Regina-, Rubin-, Anilin-, LAUTH'sches- und Gentianaviolett (B). Sie sind in stärkerer Lösung rasch wirkende Gifte , werden auch in schwacher Lösung nach längerer Einwirkung nicht vertragen. Die Larven werden in ziemlich übereinstimmender Weise gefärbt. Bestimmte Zellelemente bleiben indess dabei ungefärbt. Verwendet man dagegen eine Auramin- lösung, die nicht allzu stark sein darf, wenn sie nicht tödtlich wirken soll, so erscheinen die Thiere gleichmässig gelb. Jetzt aber sind gerade die Zellen , welche sich mit den vorigen Farbstoffen nicht färbten , intensiv gelb gefärbt. Weiter werden die Resultate der Färbung mit Dahlia , mit Malachitgrün und mit Chrysoidin erwähnt. Eine isolirte Stellung allen anderen Farbstoffen gegenüber nimmt das Alizarin ein , welches also eine Gruppe für sich bildet. Hier färbt sich die neu entstehende Knochensubstanz roth. Das Bild des Hautepithels ist auch ein ganz eigenartiges , nur diesem Farbstoff allein zukommendes. Es handelt sich um keine Färbung besonderer Inhaltseinschlüsse der Zellen, aber in den Intercellularlücken zwischen ihnen sind zahlreiche, braunrothe, kleinste Körnchen enthalten. Die letzte, ihrer Bedeutung nach wichtigste Gruppe von Farbstoffen ent- hält die folgenden: Biamarckbraun (Vesuvin oder Manchesterbraun), Methylenblau rectificirt und BX, Neutralroth, Neutralviolett, Nilblau- sulfat und Anilblauchlorhydrat. Diese Farbstoffe werden, wenn sie einmal in den Larvenkörper eingedrungen sind , meist mit ausser- ordentlicher Zähigkeit festgehalten. Wenn diese Ueberladung mit dem Farbstoffe für die Thiere auch nicht gleichgültig sein dürfte, so wird sie doch ohne ersichtlichen bedeutenderen Schaden ertragen. Am günstigsten scheint von diesen Stoffen das Neutralroth zu wirken, das noch monatelang in dem Thierkörper , auch in reinem Wasser, erhalten bleibt. Betreffs der näheren Beschreibung der histologischen Bilder muss auf das Original und seine Abbildungen verwiesen werden, ebenso wegen der chemischen Betrachtung über die vitale Färbung. XVIII, 2. Referate. ls;; In den Schlussfolgerungen bebt Verf. zunächst hervor, dass die Chemie uns in Beziig- auf das vitale Färbungsvermögen der einzelnen Farbstoffe vollständig im Stiebe lässt. Das histologische Grundprincip jeder wirklichen, d. h. für das Leben des Thieres unschädlichen und lange Zeit bewahrten vitalen Färbung ist das Hervortreten von Granulis im Zellleibe und zwar nur in diesem; niemals werden Faden- netze oder Waben sichtbar, nie färbt sich der Kern. Durch diese neuen Versuche ist Verf. in der Ueberzeugung, die er schon früher hatte , bestärkt worden , dass die Färbung des lebenden thierischen Protoplasmas zweifellos möglich und in einigen Fällen als erwiesene Thatsache hinzustellen sei. Jene Elemente , welche den Farbstoff aufnehmen, sind auch schon in der ungefärbten, normalen Zelle nach- weisbar. Was sich färbt, ist also etwas in der Zelle Präformirtes. Jene färbbaren Granula sind Elemente, welche constant und in unver- änderlicher Form den Zellen zukommen. Solche Elemente sind aber aller Wahrscheinlichkeit nach eher lebende Protoplasmatheile als todte, passive Producte der „Energide". Nicht alles, was sich in der lebenden Zelle färben lässt , braucht übrigens , wie auch die Färbung der Pigmentkörnchen zeigt (die auch von bestimmten Farb- stoffen gefärbt werden können), lebendem Plasma anzugehören. Für alle Farbstoffe gilt ausnahmslos, dass sich Granula nur im Zellleibe, niemals im Zellkerne darstellen lassen. Dieser letztere färbt sich nur dann, und zwar diffus, wenn die Zelle bereits abgestorben ist. Man muss aus den Ergebnissen der bisherigen Untersuchungen den Schluss ziehen , dass sich der lebende Kern der Metazoenzellen, wenigstens in seiner Reaction gegenüber den Farbstoffen principiell vom Zellleibe unterscheidet. Verf. bespricht dann die Frage, in welcher Weise die lebende Zelle die Farbstoffe in sich aufnimmt. Es muss dieserhalb auf das Original verwiesen werden , desgleichen wegen der Natur der Granula, welche bei der allgemeinen Besprechung über die Structur der Zellen behandelt wird , endlich betreffs der Fadenstructur des Protoplasmas. Schiefferdecker Bonn . Spuler, A., ü e b e r eine neue St ü c k f ä r b emethode (Deutsche med. Wochenschr. Bd. XXVII, 1901, No. 14, Vereinsbeilage p. 116). Im Gegensatz zu den Hämatoxylinfärbungen , welche nur Kern- tinctionen ergeben und ausserdem leicht überfärben, sowie zu den Pikrocarminfärbungen, bei denen es zu einer Auflösung des Biweisses kommt, hat der Verf. eine Methode gefunden, der diese Mängel nicht 184 Referate. XVIII, 2. anhaften. Die neue Methode entspricht ausserdem dem Haupterforder- niss jeder guten Stückfärbung', nämlich der gleichmä ssigen Färbung eines jeden Schnittes. Ferner eignen sich die mit der neuen Methode hergestellten Präparate vorzüglich zur Demonstration mit dem Projectionsapparate, da es sich um einen schwarzen Farben- ton handelt, der keine Abschwächung wie andere Farben erfährt. Die Methode liefert ferner sehr scharfe Bilder, denn es werden neben dem Kern namentlich die Zellconturen sehr gut gefärbt , so- dass solche Präparate den Eindruck von Federzeichnungen machen. Die Methode ist die folgende : Als Farblösung für die fixirten Prä- parate dient eine eigens zubereitete Cochenillelösung. Fein gepulverte Cochenille wird mit destillirtem Wasser gekocht, abfiltrirt und nicht ganz bis zur Trocknung eingedampft. Dann wird destillirtes Wasser zugesetzt und abfiltrirt. In dieser Farblösung werden die Stücke 24 Stunden oder länger in der Wärme auf dem Paraffinofen stehen gelassen , die Stücke abgespült und recht lange in einem dünnen Eisenalaunbad gebeizt , wobei sehr rasch der Farbenumschlag von Roth in Schwarz eintritt. Nach vollendeter Beizung werden die Prä- parate wieder mit destillirtem Wasser abgespült und gründlich aus- gewaschen, um dann in gewöhnlicher Weise eingebettet zu werden. Die Beizung mit Eisenalaun, Tannin oder jeder anderen Beize kann auch der Färbung vorangehen. Schiefferdecker {Bonn). 2. Präparationsmethoden für besondere Zwecke. A. Niedere Thiere. Merkel , T. , Beiträge zur Kenntniss des Baues von Polytrema miniaceum Pallas s p. (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXVII, 1900, p. 291—322 m. 2 Figg. u. 2 Tfin.i. Zur Fixirung waren absoluter Alkohol, Sublimat, FLEMMiNG'sche Flüssigkeit und Sublimateisessig verwendet worden. Zu Schnitten eignet sich das mit FLEMMiNG'scher Flüssigkeit und Sublimateisessig behandelte Material gut, da die harte Kalkschale völlig aufgelöst wird und nur die Schalenhäutchen und das Protoplasma zurückbleiben. Zur Entkalkung der Exemplare aus anderen Fixativen wurde 50pro- centiger Alkohol mit <>\"> Procent Salpetersäurezusatz verwendet. In XYIII, 2. Referate. L ß5 etwa 24 Stunden ist die Entkalkung beendet. Ausser Schliffen in Canadabalsam wurden Quer- und Längsschnitte hergestellt. Behufs Paraffineinbettung ist es vorteilhaft , das entkalkte Material lange Zeit in Chloroform liegen zu lassen und die Ueberführung in Paraffin möglichst langsam vorzunehmen, am besten so, dass man Paraffin in Chloroform löst und erst, wenn das Object längere Zeit in dieser Lösung gelegen hat . dasselbe in den Wärmeschrank in Chloroform- Paraffin bringt. Es empfiehlt sich, nicht länger als höchstens 4 Stun- den einzuschmelzen. Als Färbung erwies sich zum Studium des Schalenhäutchens stark verdünnte Hämatoxylinlösung als besonders ge- eignet. Zur Differenzirung von Protoplasma , Kern und Nahrungs- körpern wurden Doppelfärbungen angewendet: Die Schnitte kamen 50 Minuten in unverdünntes Alauncarmin, wurden ausgewaschen und dann 10 bis 15 Minuten mit Bismarckbraun nachgefärbt. Bessere Resultate gab Färbung der Schnitte mit Methylenblau und Nach- behandlung mit Pikrinsäure. Es ist hierbei darauf zu achten, dass die Präparate möglichst rasch durch Alkohol geführt werden , damit nicht zu starke Entfärbung eintritt. Ungünstig zur Kerndifferenzirung ist wässerige Safraninlösung, Flemming's Safranin und eine einpro- centige Lösung von Säurefuchsin in concentrirter Pikrinsäurelösung. range-Lösung dürfen die Schnitte nur eine bis 2 Minuten verweilen, dann Abspülen mit Wasser und Differenziren in dem gewöhnlichen einprocentigen Salzsäurealkolml etwa eine Stunde , bis der Schnitt kornblumenblau oder noch heller geworden ist. Entwässern in absolutem Alkohol, Aufhellen in Xylo!. ') Vgl. wegen der Vorschrift von MaleoRy o. p. 175 ff.; ferner Aschofp ii. Gaylord, (ur.su« der pathologischen Histologie, Wiesbaden 1900, }». 304. XVIII, 2. Referate. 195 Die Salzsäure nimmt zugleich den Kalk, das Xylol das Fett weg. Bei aufgeklebten Paraftinschnitten ist das Verfahren gut verwendbar. Nach dieser Methode erschienen die quergestreifte Musculatur und die Bindegewebszelleu gelblich bis orange ; im übrigen war der Schnitt blau. Die zu untersuchenden Herde waren sofort als hellere, durch dunkle Rippen unterbrochene Flecken kenntlich. Bei Ein- stellung mit Immersion traten die Bindegewebsfibrillen recht scharf hervor. Schiefferdecker (Bonn). Thome , R. , Die Kreisfasern der capillären Venen in der Milz (Anat. Anz. Bd. XIX, 1901, No. 11, p. 271 —280). Verf. hat, um die viel umstrittene Natur der Kreisfasern an den capillären Milzvenen festzustellen , weitere Untersuchungen an der Milz eines 22jährigen Hingerichteten ausgeführt, die etwa eine Stunde nach dem Tode in Zenker'scIic Flüssigkeit eingelegt und dann in Paraffin eingebettet worden war. Die Schnitte (4 bis 8 ju) waren mit Wasser auf den Objectträger aufgeklebt und wurden so den verschiedenen Färbemethoden unterworfen. 1) Mit saurem Orcei'n (absoluter Alkohol 100, Orcei'n 1, Salzsäure 1), wurde nach der Angabe von Schumacher unter Erwärmen auf etwa 50° eine halbe bis 3 Stunden gefärbt. Die Resultate waren bei verschiedener Dauer der Färbung doch annähernd dieselben. Bei den meisten Venen waren die Querschnitte der Kreisfasern deutlich zu sehen. Seltener gelang es, ein deutliches Längsbild der Fasern zu erhalten. Die Fär- bung der Kreisfasern war auch bei den intensivst gefärbten etwa> heller als die der typischen elastischen Fasern. 2) Mit Weigert's Resorcin -Fuchsin wurde eine halbe bis 24 Stunden bei Zimmer- temperatur gefärbt. Bei kurzer Färbedauer war von den Kreisfasern noch nichts zu sehen, während alles elastische Gewebe schon intensiv gefärbt war. Nach 24 stündiger Färbung waren dag.egen die Kreis- fasern in derselben Ausdehnung gefärbt wie mit Orcei'n, vielleicht etwas undeutlicher. Auch hier war die Färbung durchschnittlich nicht so intensiv wie die des elastischen Gewebes. 3) Statt des van GiESON'schen Pikrofuchsins benutzte Verf. die in der mikro- skopischen Technik von Böhm und Oppel (1900) angegebene Binde- gewebsfärbunsr von Hansex : 'o Pikrinsäure, gesättigte, wässerige Lösung . . 100 cc Säurefuchsin, 2procentige, wässerige Lösung . 5 „ 13* 196 Referate. XVIII, 2. Vor dem Gebrauehe sind ."><) cc dieser Lösung 7 Tropfen einer einprocentigen Essigsäure zuzusetzen. Eine Kernfärbung wurde nicht vorausgeschickt. Nach halb- bis einstündigem Färben waren die Kreisfasern überall schön roth. Erheblich intensiver wurde die Färbung noch, wenn die Schnitte bis zu 24 Stunden in der Lösung verblieben. Ausser den Kreisfasern waren noch die Bindegewebs- fasern in den Trabekeln und das Reticulum roth gefärbt. 4) Die schönsten Resultate ergab die MALEORY'sche Hämatoxylinfärbung (Hämatoxylin, krystallisirt 1*75 g; Wasser, destillirt 200 cc ; Phosphor- molybdänsäure, lOprocentige Lösung 100 cc; Carbolsäure, krystallisirt 5 g; nach Stöhr). Zunächst wurden die Schnitte unter geringer Modifi- cation der Angaben von Stöhr, die sich auf freie Schnitte beziehen, 5 bis 10 Minuten in eine lOprocentige Lösung von Phosphormolybdän- säure gebracht, dann nach Abspülen in Wasser auf 10 bis 20 Minuten in die Hämatoxylinlösung. Es gelingt auch bei geeigneter Färbe- dauer , die Fasern ohne vorhergehendes Bebandeln mit der Säure nur mit der Hämatoxylinlösung darzustellen. Befriedigende Ergebnisse erzielte Verf. aber nur an Präparaten, die mit ZENKER'seher Flüssig- keit fixirt waren. Ausserordentlich deutlich hoben sich die Kreis- fasern sowie alle Bindegewebsfasern intensiv dunkelblau von einem viel helleren, graublauen Hintergrunde ab. Das elastische Gewebe, z. B. die Elastica interna der kleinen Arterien war an den meisten Präparaten nicht nur nicht dunkler, sondern eher noch etwas weniger gefärbt als das übrige Gewebe. Ganz dieselben Resultate erhielt Verf. mit den angegebenen Färbemethoden an Milzschnitten von Kaninchen und Hund, die in verschiedener Weise fixirt waren (Zenker- sche Flüssigkeit, Sublimat, Alkohol), nur waren die Bilder der Kreis- fasern , wie dies auch von früheren Untersuchern schon angegeben worden ist, nicht so schön und deutlich wie beim Menschen. Schiefferdecker {Bonn). Hennel)erg , B. , Ruhende und t h ä t i g e Muskelzellen in der Arterienwand (Anat. Hefte, H. 55, 1901, p. 427—465). Ks wurde lediglich die Carotis des Rindes verwendet. Das Gefäss war stets leicht zu erhalten und liess sich bequem aus der Musculatur herausschälen. Ausserdem war es sehr bald nach der Tödtung zu bekommen. In dem Giessener Schlachthause werden die Rinder fast ausnahmslos durch den Schächtschnitt getödtet. Dabei werden die Carotiden durchschnitten und die proximalen Enden der- XVIII, 2. Referate. 197 selben spritzen stark. In Folge dessen sind sie sofort aufzufinden, und es ist leicht , ein Stück sofort nach dem Tode abzuschneiden. Nachdem das anhaftende Fett und Bindegewebe entfernt und das Gefäss selbst in kleine, etwa 0"5 cra lange Stücke zertheilt war, wurden diese Stücke fixirt und zwar in Formol, Sublimat und heissem Wasser. Andere öfters versuchte Mittel erwiesen sich nicht als zweckmässig. Die Fixirung durch Hitze wurde angewendet, da sie offenbar am schnellsten wirkt und daher anzunehmen war, dass vor- handene Zustände auf solche Weise am sichersten erhalten bleiben. Wie Vergleiche mit anders üxirtem Material zeigten, waren die ge- wonnenen Präparate sehr brauchbar. Eingebettet wurde hauptsächlich in Paraffin , zur Controle auch zuweilen in Celloidin. Von jedem Gefässstückchen wurden Quer- und Längsschnitte angefertigt. Schnitt- dicke 5 |tt. Gefärbt wurde mit Hämalaun, van Gieson's Pikrinsäure- fuchsin, Heidenhain's Eisenhämatoxylin und Orcein. Schiefferdecker {Bonn) . Michaelis, L. , lieber die Methy lenblau-Eosinfärbung (Deutsche med. Wochenschr. Bd. XXVII, 1901, No. 8, p. 127). Verf. hat 1899 1 eine Methylenblau -Eosinmethode veröffentlicht, mit der er heute noch vollkommen zufrieden ist. Inzwischen haben v. Willebrand und Becker 2 ebenfalls Mittheilungen über solche Methoden gemacht. In der gegenwärtigen Mittheilung will Verf. nur eine allgemeine Bemerkung über die Methylenblau - Eosingemische veröffentlichen. Nach Rosin und Becker steht die schwere Löslich- keit der rein dargestellten Methylenblau- Eoshiverbindung in den ge- bräuchlichen Lösungsmitteln der Verwendung dieses Farbstoffes im Wege. Dem gegenüber bemerkt Verf., dass man eine gut verwend- bare Flüssigkeit erhält , wenn man den Farbstoff in absolutem Al- kohol löst (nicht Erwärmen, wenigstens nicht in Glasgefässen, welche sehr leicht Alkali abgeben und den sehr labilen Körper spalten) und etwa zur Hälfte mit Wasser verdünnt. Diese Lösung färbt langsam aber gut. Nur die neutrophilen Granula werden gar nicht oder höchst unvollkommen tingirt. Worauf das beruht, will Verf. später ausführlich mittheilen. — Er widerspricht der Ansicht von Becker, dass das eosinsaure Methylenblau in Essigsäure löslich sei. Mit x ) Deutsche med. Wochenschr. Bd. XXV, 1899, No. SO. -) Vgl. die folgenden Referate. 198 Referate. XVIII, 2. dieser Lösung geht eine Spaltung des eosinsauren Methylenblaus Hand in Hand. — Im Gegensatz zu den Bemühungen , den reinen neutralen Farbstoff zur Färbung zu benutzen, steht die Methode des Verf., welche nur ein Gemisch von Methylenblau und Eosin ist. Der Zusatz von Alkohol und Aceton verzögert die Unilagerung zwischen Methylenblau und Eosin , und man färbt mit dieser Lösung bevor noch diese Reaction eintritt. Trotzdem kennt Verf. ausser dem EHRLiCH'schen Triacid keine Farblösung, welche die neutrophilen Granulationen so vollkommen zur Anschauung bringt wie die von ihm angegebene. Der Farbenton derselben ist roth; nur die jungen neutrophilen Granulationen werden mehr violett und die allerjüngsten (Leukämie) sogar blau. Die beste Fixirung dafür ist die trockene Hitze (Trockenkasten) nicht unter 105°, nicht über 110° eine Stunde lang, lieber Entstehung von vorzeitigen Niederschlägen kann Verf. im Gegensatz zu Becker nicht klagen. Auch auf Schnitten lassen sich, wie Benda gezeigt hat, nach der Methode des Verf. die neutrophilen Granula nach einer von Benda angegebenen Fixationsmethode darstellen. Verf. hat beobachtet, dass in Gefrier- mikrotomschnitten sich nach einfacher, kurzer Fixirung in lOpro- centigem Formalin die neutrophilen Granula ebenfalls und zwar roth färben. Sie sind von den eosinophilen durchaus zu unterscheiden, nicht aber am Farbenton. Verf. meint, dass man Dutzende von Methylenblau - Eosingemischen finden wird , die dasselbe leisten wie seine Methode; aber eine jede solche Methode erfordert ein ganzes Studium, bis man sie richtig anwenden lernt. Schiefferdecker (Bonn). Willelbrand, E. A. v., Eine Methode für gleichzeitige C o m - binationsfärbung von Bluttrockenpräparaten mit E o s i n undMethylenblau (Deutsche med. Wochen- schr. Bd. XXVII, 1901, No. 4, p. 57 f.). Verf. bemerkt, dass bei mikroskopischen Blutuntersuchungen es nicht selten darauf ankommt , alle Zellformen , besonders die ver- schiedenen Arten der weissen Blutkörperchen deutlich unterschieden in demselben Präparat darzustellen. Es scheint ihm hierzu weder die EnRLiCH'sche Triacidfiirbung, noch die Eosin - Hämatoxylinlösung von Gollasch besonders geeignet. Es sind ferner verschiedene Methoden der Färbung mit Eosin und Methylenblau vorgeschlagen worden, mit denen Verf. jedoch auch ziemlich unbefriedigende Resul- tate erhielt. Fügt man zu einer Eosin -Methylenblaulösung Alkali, XVIII, 2. Referate. 199 wird die blaue Farbe die vorherrschende, während umgekehrt h Zusatz einer Säure das Eosin hervortritt. Man erreicht also durch Zusatz von Alkali oder Säure die gleiche Wirkung wie durch einen Ueberschuss der alkalischen oder der sauren Farbe. Indem \Cit'. nun mit einer Farblösung, welche überschüssiges Methylenblau enthielt , Essigsäure mischte , ist es ihm gelungen , eine Farbflüssig- keit herzustellen, die sehr gute Resultate liefert. Die Mischung (Eosin, gelöst in TOprocentigem Alkohol, 0\')proeentig; Methylenblau, concentrirte wässerige Lösung, zu gleichen Theilen) färbt die Prä- parate gewöhnlich diffus blau. Setzt man aber tropfenweise ver- dünnte Essigsäure (einproeentig) hinzu , so gewinnt allmählich das Eosin immer mehr an Färbekraft. Nach einigen Controlfärbungen gelingt es immer , eine Flüssigkeit herzustellen , welche gute Bilder giebt. Auf 50 cc braucht man gewöhnlich 10 bis 15 Tropfen Essig- säurelösung ; vor der Anwendung filtriren. Die Blutpräparate müssen in trockener Hitze , in absolutem Alkohol oder in einprocentigem Formolalkohol gut iixirt sein. Färbung 5 bis 10 Minuten unter wiederholter Erwärmung bis zur Gasentwicklung. Abspülen in Wasser, keine Entfärbung: Erythrocyten roth, Kerne dunkelblau, neutrophile Granula violett, acidophile roth, Granula der Mastzellen intensiv blau. Schiefferdecker {Bonn). Becker, E., lieber den Zusatz von Essigsäure zur Eosin-Methylenblau 1 ö s u n g bei Färbung v o n Blutpräparaten ^Deutsche nted. Wochenschr. Bd. XXVII, 1901, No. 5, p. 78 f. . Verf. bemerkt, dass er ebenso wie v. Willebrand schon seit einiger Zeit die Essigsäure als Zusatz von Säurefuchsin-Methylenblau und Eosin -Methylenblau benutzt. Er geht näher darauf ein, wie eine ideale Färbeflüssigkeit für das Blut beschaffen sein müsse, wes- halb auf das Original verwiesen wird. Er hebt hervor, dass bei den bisherigen Methoden ein Niederschlag nicht zu vermeiden ist. Es wäre richtiger, nach einem Lösungsmittel für diesen Niederschlag zu suchen. Er glaubt gefunden zu haben , dass derselbe in Säuren löslich ist. Von diesen schien ihm die Essigsäure die geeignetste zu sein. Er hat mit Essigsäurezusatz oft recht schöne Präparate erzielt, doch ist es ihm bisher nicht gelungen, eine wirklich zu- verlässige und einigermaassen haltbare Mischung ausfindig zu machen. Deshalb ist er noch mit weiteren Versuchen beschäftigt. Schiefferdecker i Bmvn i. 200 Referate. XVIII, 2. Ellgel , C. S. , Zu r F ä r b u n g von Blut- u n d E i t e r p r ä - paraten mit Eosin-Methylenblau (Deutsche med. Wochenschr. Bd. XXVII, 1901, No. 14, p. 22.°, f.). Um sowohl im Blute wie im Auswurf, im Urin, im gonor- rhoischen wie im anderen Eiter die verschiedenen Granulationen neben den Bacterien scharf zu färben , bediente sich Verf. des folgenden Verfahrens: Die fixirten Deckglaspräparate kommen auf 5 Minuten in eine Eosinlösung (Eosin 1 g, Wasser, destillirt 90 g, Alkohol 10 g), nach Abspülen mit Wasser auf .30 Secunden in concentrirte wässerige Methylenblaulösung oder LöFFLEit'sehes Methylenblau. Es ist wichtig, dass das Methylenblau nicht zu lange auf die Präparate einwirkt. Zur Fixirung genügt bei Sputum, Urin, Eiter ein dreimaliges Ziehen durch die Flamme ; Blutpräparate werden so lange fixirt , bis der gelbröthliche Farbenton anfängt gelbbraun zu werden. Auch Alkohol, der durch ausgeglühtes Kupfersulfat wasserfrei gemacht ist , iixirt die Blutpräparate in einer Stunde genügend. Bei dieser Nacheinander- färbung sind die neutrophilen Granula ebenso roth wie die eosino- philen und unterscheiden sich von diesen nur durch ihre Feinheit. Die Einwirkung des Methylenblaus soll etwa den zehnten Theil der Färbezeit des Eosins betragen. Schiefferdeck&r {Bonn). Japha, A., Zur Eosin -Methylenblaufärbung des Blutes (Deutsche med. Wochenschr. Bd. XXVII, 1901, No. 14, p. 224). Verf. hat vor einiger Zeit die zufällige Wahrnehmung gemacht, dass man eine Darstellung der neutrophilen Granula erreicht, wenn man nach der alten Methode mit Eosin und Methylenblau hinter ein- ander färbt. Er fixirt die gut lufttrockenen Präparate mit ein- bis 2procentigem Formalina lkohol etwa eine Minute, färbt gut mit starker wässeriger Eosinlösung vor, dann mit verdünnter, aber nicht zu dünner wässeriger Methylenblaulösung secundenlang nach. Bei diesem letzten Abschnitt der Färbung muss Vorsicht angewandt werden. Verf. betrachtet das einfach abgetrocknete Präparat von Zeit zu Zeit mit starker Vergrösserung um den Grad der Färbimg fest- zustellen. Nöthigenfalls wird es noch einmal in die Methylenblau- lösung kurz eingetaucht. Schiefferdecker (Bonn). Heinz, R., Ueber Blutdegeneration und -Regeneration (Beitr. z. pathol. Anat. u. z. allgem. Pathol. Bd. XXIX, 11. 2, 1901, p. 299—404 m. :; Tfln.). XVIII, 2. Referate. 201 Verf. betont im Eingang seiner Arbeit, dass zur Feststellung von Veränderungen an den rothen Blutkörperchen die Untersuchung des frischen Blutes absolut nothwendig und durch die EHRLicn'sche Fixirung und Färbung des angetrockneten Präparates wohl zu ergän- zen aber nie zu ersetzen ist. Dieselbe Forderung der Untersuchung des frischen Blutes stellen und, wie er ausdrücklich bemerkt, mit Recht Israel uud Pappenheim für die Untersuchung der embryonalen, kern- haltigen rothen Blutkörperchen auf. 1 Ein geübter Beobachter, der die EHRLicn'sche Methode vollständig beherrscht, wird wohl die Verände- rungen, die er am frischen Blut constatirt, auch am fixirten und gefärb- ten Präparat wiedererkennen. Bei einseitiger Verwendung jener Methode dagegen, d. h. bei Unterlassung der Untersuchung des frischen Blutes, ist die Gefahr des Uebersehens jener Veränderungen gegeben. Dies erklärt, warum Hirsch und Ehrlich die ..Körncheninidung" an den rothen Blutkörperchen nur zufällig und gleichsam nebenher beobach- teten, während nach den Ergebnissen des Verf. bei Nitrobenzol- vergiftung im frischen Präparat sich sämmtliche rothe Blutkörperchen typisch verändert zeigten. Die Untersuchung des frischen Blutes muss unter bestimmten Vorsichtsmaassregeln erfolgen. Nur solches Blut ist zu verwenden, das in einem kräftigen Tropfen aus der an- geschnittenen Stelle hervortritt. Langsam hervortretendes Blut zeigt durch Berührung mit Luft Eintrocknung, Stechapfelbildung etc. Soll die Zahl der rothen Blutkörperchen bestimmt werden, so darf das Hervortreten des Blutes nicht durch Herauspressen befördert werden, weil hierbei zugleich Gewebssaft sich dem Blute beimischt, wodurch die Zahlenverhältnisse der rothen Bluthkörperchen verändert werden. Nadeln sind zur Gewinnung eines ausreichenden Blutstropfens viel weniger geeignet als schneidende Instrumente : Einstechen eines schmalen Messerchen in die Fingerbeere beim Menschen, ein flacher Scheerenschnitt am Ohr des Kaninchens oder ähnliches. Bei der Untersuchung des frischen Blutes ist jede Zusatzflüssigkeit zu ver- meiden, weil wir eben keine besitzen, die die Blutkörperchen gar- nicht verändert. Verf. entnimmt mit dem Rande des Deckglases einen kleineu Tropfen Blut und schiebt das Deckglas ohne Anwen- dung von Druck seitlich auf den Objectträger hinauf. Das Blut vertheilt sich dann in dünner Schicht zwischen Deckglas und Object- träger. Die Blutkörperchen sind von unverändertem Plasma um- 1 ) Israel, 0., u. Pappenheim, A., Ueber die Entkernung der Säuge- thiererythroblasten (Virchow's Arch. Bd. CLVIII, p. 419). 202 Referate. XVIII, 2. geben. In der Mitte des Präparates sind sie genügend vor Aus- trockmmg geschützt und erhalten sich eine Zeit lang unverändert, so dass man sie beobachten, messen und zeichnen kann. Wegen der verschiedenen Gifte , vermittels deren Veränderungen des Blutes herbeigeführt wurden und ihrer Wirkung muss auf das Original ver- wiesen werden. — Das Knochenmark, das für die Regeneration zu untersuchende Object , besitzt einen sehr complicirten Bau. Die Deutung der einzelnen Elemente hängt in hohem Grade von dem angewandten histologisch-technischen Verfahren ab. Die färberische Technik bei der Untersuchung der verschiedenen Blutelemente ist ungemein entwickelt. Diese hoch entwickelte Färbekunst birgt aber Gefahren in sich, da man sich zu leicht verleiten lässt, zu viel Gewicht auf die Färbungsverschiedenheiten zu legen und aus einer neuen Färbungsvarietät zu viel zu schliessen. Gerade für die Unter- suchung von Blut und Knochenmark sind mehrere, möglichst ver- schiedene Fixirungs- und Färbungsmethoden nothwendig. Man darf auf die Färbungsresultate nicht zu viel geben. So giebt es z. B. eine ganze Anzahl von ..Hämoglobinfärbungen" und doch ist keine Färbung für Hämoglobin specifiseh. Erhält man mit Orange-Eosin etc. ein positives Resultat , so braucht das Gefärbte noch durchaus nicht Hämoglobin zu sein ; anderseits kann es vorkommen , dass ge- ringe Mengen Blutfarbstoffes durch die Färbung nicht genügend hervorgehoben werden. Auch bei den Fixirungsmethoden muss man stets darauf achten , was sie in Bezug auf die Conservirung des Hämoglobin leisten. Für die Regeneration gilt dasselbe wie für die Degeneration , dass die frische Untersuchung des Blutes ohne jeden Zusatz am meisten bietet. Ueber die Beschaffenheit der Erythro- blasten, des wichtigsten Bestandtheiles des Knochenmarkes, insbeson- dere über die Structur des Kerns und den Hämoglobingehalt des Protoplasmas kann nur die Untersuchung des frischen, dem eben ge- tödteten Thiere entnommenen Knochenmarkes Auskunft gewähren. Hauptsächlich diente als Untersuchungsobject das Kaninchenknochen- mark in verschiedenen Regenerationsstadien (nach Vergiftung). Das Knochenmark von Meerschweinchen, Hund und Katze zeigt dieselben Verhältnisse. Das Knochenmark des normalen Kaninchens ist grauroth, fettglänzend, leicht bröckelnd, zeigt mikroskopisch sehr viel Fett. Im Stadium der Regeneration ist es compacter, specifiseh schwerer, fettfrei und dunkelweinroth. Für die mikroskopische Untersuchung wurde das Knochenmark den Epiphysen des Feinur entnommen, indem aus dem der Länge nach mit der Laubsäge durchsägten Knochen mit XVIII, 2. Referate. 203 einem feinen Skalpell cylindrische Stücke herausgeschnitten wurden. Dabei Hessen sich Knochenbalken vermeiden, sodass eine Entkalkung unnöthig war. Das dem frisch getödteten Thier entnommene Mark wurde in vorgewärmte Fixir lösungen gebracht. Als solche haben sich sowohl für die Blutdegeneration wie -Regeneration am geeig- netsten erwiesen: Formol -Kochsalzlösung (10 bis 15 Procent Formol in 0'6procentiger Kochsalzlösung), Formol-Sublimat-Eisessig-Koch- salzlösung (8:3*5:0*5 Procent in 0'6procentiger Kochsalzlösung). Bei allen Untersuchungen , bei denen es auf die Darstellung hämo- globinhaltiger Gewebstheile ankommt, ist das Formol unschätzbar, da das Formaldehyd mit dem Hämoglobin eine methämoglobinähnliche Verbindung von grosser Persistenz eingeht. Diese Formaldehyd- verbindung besitzt einen etwas dunkleren Farbenton als das Hämo- globin selbst, sodass die rothen Blutkörperchen wie die blutpigment- haltigen Zellen eher noch scharfer hervortreten als im frischen Prä- parate. Die Formol-Sublimat- Eisessig-Kochsalzlösung ist sehr geeignet zur Darstellung feinster Structuren (Granula, Kerntheilungsfiguren etc.). Die auf Bluttemperatur vorgewärmte Fixirungsflüssigkeit mit den Präparaten kam in den Brütofen (37*5°), wodurch rasches gleich- massiges Eindringen des Sublimats zu erzielen war. Die Präparate wurden herausgenommen, sobald sich (an Probestücken) feststellen Hess, dass die Fixirungsflüssigkeit bis zur Mitte durchgedrungen war (nach 2 bis 3 Stunden). Längeres Verweilen macht die Stücke bröckelig und schlecht färbbar. Dann 24stündiges Auswaschen in fliessendem Wasser, Härtung in steigendem Alkohol von 50 Procent an, Ent- fernung des Sublimats durch Jodalkohol, Einbettung in Paraffin nach Chloroform. Auch das Formol leistet ganz Vorzügliches. Nach 12stündiger Behandlung mit lOprocentigem Formol waren Granula, Mitosen, hämoglobinhaltige Zelltheile aufs Beste erhalten. Das Hämo- globin wird sogar noch besser erhalten als durch die oben genannten Combinationen. Gefärbt wurde zunächst mit den gewöhnlichen Kern- farbstoffen, Alauncarmin oder Alauncochenille, Hämatoxylin oder Hä- matei'n (in der Form des Hämalaun Mayer). Damit erhält man gute Bilder der Kernstructuren und Kerntheilungsfiguren. Für eine voll- ständige Ausdeutung des Präparats ist aber Kernfärbung allein un- genügend ; man sieht ein verwirrendes Bild von runden, ovalen, poly- morphen Kernen , die zum Theil ein deutliches Kerngerüst zeigen, zum Theil pyknotisch erscheinen. Orientiren kann sich an einem solchen Bilde nur Derjenige, der den feineren Bau des Knochenmarks schon mit anderen Hülfsmittein untersucht hat. Zur Kernfärbung 204 Referate. XVIII, 2. muss mindestens noch eine Protoplasmafärbung kommen. Sehr gut hat sich Verf. die Combination Hämalaun- Orange bewährt, indem durch das Orange die Blutfarbstoff führenden Theile deutlich hervor- treten. Für die Darstellung aller feineren Structuren ist aber auch die Combiniruug von Kern- und Protoplasmafarbstoffen nicht aus- reichend. Hier hat sich das EHRLiCH-HEiDEXHAix-BiONDi'sche Drei- farbengemisch am besten bewährt. Schieff&rdecker {Bonn . Botezat , E. , Die Innervatio n d e s harte n G a u mens d e r Säugethiere (Zeitschr. f. wiss. Zool. Bd. LXIX, 1901, p. 429—443 m. 1 Fig. u. 2 Tibi.). Zur Untersuchung diente hauptsächlich Felis. Dem mit einem Gemisch von Chloroform und Aether narkotisirten Thiere wurde nach Oeffnung der Brustdecke in die linke Herzkammer oder in die Aorta eine bis auf Bluttemperatur erwärmte einprocentige Methylen- blaulösung in physiologischer Kochsalzlösung injicirt. Durch die Herzthätigkeit wird das Methylenblau bis in die feinsten Capillaren getrieben , und man erkennt die gelungene Injection an dem Blau- werden der haarlosen Körperstellen, wie Fussballen, Schnauze etc. War dies eingetreten, so wurde das Thier eine Zeit lang liegen ge- lassen, bis die Herzthätigkeit vollständig aufgehört hatte, dann wurde der Gaumen abgetragen , auf einen Objectträger mit der Innenseite nach oben gelegt und mit einer (Vlprocentigen Methylenblaulösung befeuchtet. Zum Studium der Nervenendigungen wurde eine Gaumen- leiste abgetrennt und mit dem Basirmesser in Längs- und Quer- schnitte zerlegt und diese ebenfalls mit schwacher Methylenblau- lösung behandelt. Zeigte das im Thermostaten auf Bluttemperatur gehaltene Material bei Controle unter schwacher Vergrösserung ge- nügende Färbung, so wurden die Objecte in lOprocentigem Ani- moniummolybdat fixirt. Am nächsten Tage konnten die Präparate nach Auswaschen in destillirtem Wasser und Behandlung mit Alkohol steigender Concentration in Bergamottöl und Xylol überführt und dann in Xylol - Dammarharz eingeschlossen werden. Etwa zu dick aus- gefallene Schnitte wurden nach der Xylolbehandlung mittels eines scharfen Basirmessers noch feiner geschnitten. E. Schoebel (Neapel). Cade, A., Etüde de la Constitution histologique normale et de quelques variations fonc tionnelles et experimentales des elements secretcurs des XVIII, 2. Referate. 205 g 1 a n d e s g a s t r i q u e s du f o n d c h e z 1 e s m a m m i- feres (Arch. d'Anat. Microsc. t. IV, fasc. 1, 1901, ]>. 1 — 86, av. 2 plches.)- Die Untersuchungen wurden ausgeführt an Hund, Katze, Ratte, Maus, Igel und Murmelthier. Die Thiere befanden sich theils in be- stimmten physiologischen Zuständen (Thätigkeit oder Ruhe des Ver- dauungsapparates etc.) , theils unter bestimmten experimentellen Be- dingungen (Anwendung von Pilokarpin , Vagusdurchschneidung etc.). Sie wurden meist durch Chloroform getödtet, die Präparate unmittel- bar nach dem Tode oder schon während der Chloroformnarkose ent- nommen. Es wurden verschiedene Fixationsmittel angewandt, deren Wirkungen auf die später in Paraffin eingeschlossenen Präparate sehr verschieden waren. Alkohol bewirkte bedeutende Schrumpfungen. Nach MüLLEivscher Flüssigkeit wurden die Objecte durch den Paraffin- einschluss stark verändert; ohne Erfolg wurde auch das doppelt- chromsaure Kalium mit Essigsäure nach Tellyesniczki angewendet. Bessere Resultate ergab Formol (lOprocentig) in wässeriger Lösung und besonders in künstlichem Serum aufgelöst. Die Mischung von Lenhossek (gesättigte wässerige Sublimatlösung 75 Voll., absoluter Alkohol 25 Voll., Essigsäure 5 Voll.) erwies sich besser als die ein- fache gesättigte wässerige Sublimatlösung mit Essigsäure. Die CENSLEY'sche Sublimatmischung ergab keine besseren Resultate als die von Lenhossek. Am besten erwies sich die Formol-Pikrinsäure- Essigsäuremischung von Bouin. Das Verfahren dabei war das folgende. Der herausgenommene Magen wird eröffnet, nach Bedürfniss schnell in physiologischer Kochsalzlösung abgespült, dann werden kleine Stückchen , welche nur die Mucosa umfassen , herausgenommen und für 6 bis 8 Stunden in die Fixirungsflüssigkeit gelegt. Darauf steigender Alkohol von 60° bis 93° (in jedem 24 Stunden); Ein- bettung in Paraffin. Die Präparate verblieben im Ofen gewöhnlich eine halbe Stunde. Die Schnitte hatten eine Dicke von 10 bis 3'o ju. Gefärbt wurde mit Hämalaun und Eosin in alkoholischer Lösung, seltener in wässeriger Lösung, Häinatoxylin-Eosin-Glycerin von Renaut, Hämalaun und Bismarckbraun (in wässeriger Lösung einprocentig), Eisenhämatoxylin. Rubin 8, Thionin (besonders Carbolthioninj, Toluidin- blau, Bordeaux R, ferner Victoriablau (einprocenti^e , wässerige Lösung) , welches auf hinreichend entfärbten Präparaten bestimmte Körner electiv darstellte. Die verschiedenen Carmine (Alauncarmin. Boraxcarmin, Lithioncarmiu etc.) ergeben nur sehr langsam eine Fär- bung. Das Mucicarmin (Mayer) ergab interessante Präparate . sei 206 Referate. XVIII, 2. es für sich angewendet oder mit vorhergegangener Färbung mittels Hämalaun. Sehr häufig wurde auch die von Rabl angegebene Doppelfärbung mit Hämatei'n und Safranin verwendet. Wegen der genaueren Wirkungsweise dieser einzelnen Farbstoffe muss auf das Original verwiesen werden. Schiefferdecker (Bonn). Guieysse, A. ? La capsule surrenale.du cobaye. Histo- logie et f onctionnement (Journ. de l'Anat. et de la Physiol. t. XXXVII, 1901, no. 3, p. 312—341 av. 1 piche.). Meistens wurde zur Fixirung ZEXKER'sche Flüssigkeit nach der Methode von Retterer angewendet. Die unmittelbar nach dem Tode dem Thier entnommenen Stücke werden mit dem Rasirmesser quer durchschnitten und in eine grosse Menge von ZEXKER'scher Flüssig- keit mit Zusatz von 3 Procent Essigsäure gelegt. Nach 3 bis 4 Stunden kommen sie in eine gesättigte wässerige Lösung von Sublimat ohne Essigsäure (12 Stunden), dann Auswaschen mit flies- sendem Wasser (5 bis 6 Stunden), endlich Alkohol ( TOprocentig) mit Zusatz von einigen Tropfen Jodtinctur. So lange sich der Alkohol entfärbt, setzt man Jod zu bis die Flüssigkeit einen leicht gelben Ton behält, dann steigender Alkohol bis zu absolutem ; Xylol. Sind die Präparate gut aufgehellt, so kommen sie in eine Mischung von gleichen Theilen von Xylol und Paraffin in den Ofen bei 4.")°, 2 bis 3 Stunden in reines Paraffin (Schmelzpunkt 48 oder 52°). Diese Methode erwies die besten Dienste. Die Gewebe waren gut Hxirt, und man konnte fast alle Farbstoffe , besonders auch das Eisenhämatoxylin nach Heidexhaix verwenden. Verf. hat auch einfachen Alkohol benutzt, der aber das Mark nicht hinreichend energisch fixirt. Dasselbe gilt von der Formol- Pikrinsäure -Essigsäuremischung von Bouix, die Verf. weniger gut als die ZEXKER'sche Flüssigkeit findet. Bei der Nebenniere hat man ein gutes Kriterium , um die mehr oder weniger starke Wirkung einer Fixirungsflüssigkeit zu prüfen , das Markgewebe. Um dieses gut zu tixiren , sind , wie schon Sweal Vincent bemerkt hat, besonders energisch wirkende Flüssigkeiten nothwendig. So zeigt sich ein deutlicher Gegensatz zwischen der ZENKER'schen Flüssigkeit und der FLEMMcWschen auf der einen Seite, und dem Alkohol und der Flüssigkeit von Boltn auf der an- deren. Die FLEMMiNo'sche wirkt daher auch auf das Mark sehr günstig , doch hat sie den Nachtheil , die Stücke oft brüchig und schwer färbbar zu machen. Ausserdem giebt sie der Rindenschicht eine allgemeine braune Färbung, die für die Untersuchung sehr im- XVIII, 2. Referate. L >(»7 günstig ist. Besonders günstig ist sie für die Untersuchung des Markes, da hier die angegebenen Nachtheile nicht hervortreten und das Fett intensiv gefärbt wird. Zur Färbung wurden verwendet Hämalaun (P. Mayer), Häniatoxylin (Delafield) mit Contrastfärbung durch Eosin oder Orange. Diese Färbemittel sind wold gut zur allgemeinen Uebersicht, reichen aber nicht hin, um die Frage der Seeretion der Nebenniere und die dabei auftretende Protoplasma- differenzirung deutlich zu machen. Die besten Resultate ergab hier- für das Eisenhämatoxylin nach Heidenhain. Die Schnitte kamen für 5 bis 10 Stunden in eine 2procentige Lösung des Eisenalauns. Dann Auswaschen in Wasser, Färben in einer einprocentigen wässerigen Hämatoxylinlösung während 12 bis 15 Stunden. Nach reichlichem Auswaschen Differenzirung in der ersten Eisenalaunlösung. Nach der Differenzirung ist es nützlich, das Protoplasma durch eine wässerige Eosinlösung zu färben , da die Details dann besser hervortreten. Ferner wurde auch für die feineren Untersuchungen die Ehrlich- BioNDi'sche Triacidfärbung verwendet. Die in FLEMMiNG'scher Flüssigkeit fixirten Stücke wurden mit Anilinsafranin nach Benda gefärbt , doch ergab diese Methode nicht die erwünschten Resultate, die sonst mit ihr gewöhnlich erhalten werden. Die Braunfärbung der Rinde, welche durch die Osmiumsäure schon herbeigeführt war. wurde noch erhöht, auch war die Färbung nicht dauerhaft. Nur für das Mark waren die Resultate gut. Verf. verwandte daher viel lieber eine Färbung mit Magentaroth und Pikrinsäure -Indigcarmin mit Entfärbung in Nelkenöl. Diese Methode ergab sehr gute Re- sultate. Die Kerne waren schön roth gefärbt, das Protoplasma war grün. Das Magentaroth färbt weiter bestimmte , differenzirte Proto- plasmatheile, die dem Verf. sonst entgangen sein würden. Schiefferdecker (Bonn). Regaud, Cl., Etudes sur la structure des tubes semini- feres et sur la Spermatogenese chez les mam- miferes (Arch. d'Anat. Microsc. t. IV, 1901, fasc. 1, p. 101 — 153, av. 2 plches.). Die Untersuchungen wurden an erwachsenen Ratten (Mus de- cumanus , Albinos) ausgeführt. Sie wurden durch Chloroform ge- tödtet und die Hoden gleich nach Beginn der Narkose herausgenommen und fixirt. Verf. hat eine grosse Menge von Fixirungstiüssigkeiten durchprobirt. Er führt die folgenden genauer an : Die Mischungen von Flemming 'starke Mischung) und von Hermann sind sehr gut, 208 Referate. XVIII, 2. besonders die letztere. Sie haben indessen zwei Nachtbeile , sie dringen schlecht ein und manche wichtigen Färbungen wie z. B. die von Hamatei'n mit Alaun sind nur schwer auszuführen. Das Fett tritt nach diesen Fixirungsmischungen sehr gut hervor. Was die von Lenhossek 1898 empfohlene Sublimat- Essigsäuremischung anlangt, so stellt man sie am besten kurz vor dem Gebrauch her , um die Bildung von Essigäther zu vermeiden , welche am Geruch leicht er- kennbar ist. Diese Mischung giebt zweifellos bessere Resultate als die einfache wässerige Sublimatlösung mit Essigsäurezusatz. Die Form und die gegenseitigen Beziehungen der Samenzellen sind gut erhalten. Die Protoplasmastruetur aber wird grobkörnig. Wendet man diese Flüssigkeit nach der Angabe von Lenhossek (24stün- diger Aufenthalt im Ofen bei 35°) an, so schrumpfen die Gewebe ganz enorm. Der Hoden wird etwa auf die Hälfte verkleinert. Bessere Resultate hat Verf. erhalten , wenn er die Flüssigkeit nur einige Stunden in der Kälte einwirken liess und dann direct in 60grädigen Jodalkohol übertrug. Das Sublimat hat den Vortheil, alle Färbungen zu erlauben. Die Centrosomen kann man leicht mit dem Eisenhämatoxylin nach Heidenhain färben . was übrigens auch nach den Osmiummischungen , namentlich nach der von Hermann gelingt. Die Formol-Pikrinsäure-Essigsäuremischung von Bouin muss ebenfalls frisch bereitet sein. Man lässt sie 12 bis 14 Stunden bei Stubentemperatur einwirken, wäscht in Wasser aus und überträgt in 60grädigen Alkohol. Die Samenzellen werden gut tixirt ohne Schrumpfung. Das Blut und das Bindegewebe aber sind schlecht erhalten. Alle gebräuchlichen Färbungen sind möglich , doch erfor- dern einige längere Zeit. Die Bichromat- Essigsäuremischung von Tellyesniczki empfiehlt Verf. am meisten. Die Flüssigkeit kann vorher bereitet werden. Die Stücke bleiben in ihr bei Stuben- temperatur wenigstens 24 Stunden bis zu 3 Tagen. Man kann dann, wenn man Eile hat, in fliessendem Wasser 24 Stunden lang aus- waschen und in steigendem Alkohol härten, oder was besser ist, sie noch einige Tage oder einige Wochen in einer 3procentigen Kalium- bichrom atlösung liegen lassen. Die Stücke schrumpfen absolut nicht. Die Fixirungsflüssigkeit dringt schnell und tief ein. Protoplasma und Kern sind vollständig gut erhalten. Alle Färbungen sind möglich. Die Beizimg durch das Bichromat ist ausserdem wesentlich für bestimmte Färbungen. — Der Hoden ist im allgemeinen ein weiches Organ, besonders der der Ratte. Schneidet man den frischen Hoden an, so zerdrückt und verschiebt man die Samenröhrchen und das Paren- XVIII, 2. Referate. 209 chym tritt durch die Albuginea vor. Da man anderseits das Organ wegen seiner Grösse, und weil die Albuginea das Eindringen der Reagentien hindert, nicht im ganzen fixiren kann, so ist es praktisch, bevor man den Hoden anschneidet, die Samenröhrchen durch eine interstitielle Injection der Fixirungsflüssigkeit wenigstens oberflächlich zu fixiren (Hermann). Will man dagegen das Bindegewebe des Hodens untersuchen, das man durch eine interstitielle Injection sicher verändert , und will man sämmtliche Samenröhrchen intact erhalten, so darf man nur eine subalbugineale Injection in folgender Weise vornehmen : Mit einer feinen Pincette hebt man eine Falte der Al- buginea auf. An der Basis der Falte sticht man vorsichtig die Kanüle ein , deren Spitze man tangential bewegt , indem man sich hütet, ein Samenröhrchen anzustechen. Verf. verwendet eine ganz aus Glas hergestellte Spritze von Lüer-Malassez mit einer Platin- Iridiumkanüle. Man injicirt einige Tropfen der Fixirungsflüssigkeit und führt diese Operation so an drei verschiedenen Punkten aus. Man muss sich wohl hüten, die Albuginea bei dem Einstich zu zerreissen da sonst die Samenkanälchen durch die Oefthung vortreten würden. Hat man 1 bis 2 cc injicirt, so hat sich die Albuginea mit dem unterliegenden Parenchym in ganzer Ausdehnung abgehoben, und die Fixirungsflüssigkeit bildet unter ihr eine Schicht um das Hoden- parenehym. Will man den Hoden mit der Mischung von Tellyes- niczki fixiren, so ist es praktisch, die Injection nicht mit dieser Flüssigkeit , sondern mit der starken Mischung von Flemming aus- zuführen , die den Hodenkanälchen eine sehr feste Consistenz ver- leiht, welche die Albuginea leicht abzuziehen erlaubt. Man entfernt diese letztere mit Hülfe von Pincetten und feinen Scheeren, indem man die wenigen Gefässe , welche von ihr zum Parenchym herüber- treten, durchschneidet. Im Niveau des Nebenhodens wird die Al- buginea abgeschnitten. Das so freigelegte Hodenparenchym , das seine Form vollkommen bewahrt hat , wird nun in einer grossen Menge der Fixirungsflüssigkeit aufgehängt. Bei Anwendung der TELLYESxiczKi'schen oder der LENHOSSEic'schen Flüssigkeit braucht man ihn nicht anzuschneiden. Verwendet man das Pikroformol oder die Osmiummischungen, so muss man den Hoden in dünne Scheiben oder in kleine Stücke zerlegen. Als beste allgemeine Färbung empfiehlt Verf. Hämatei'n mit Alaun und Eosin oder Erythrosin, welches auch wichtige Kernbilder liefert. Das Alauncarmin ist weit weniger gut. Nach Osmiummischung wirkt das Hämatei'n nicht gut, sehr schnell nach der von Lenhossek. Nach den Fixirungen nach Bouix Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. XVIII, 2. 14 210 Referate. XVIII, 2. und Tellyesniczki muss man länger färben (eine bis 24 Stunden und länger.) Bei Ueberfärbung verwende man Ameisensäure (3 bis 4pro- centig) oder wässerige Pikrinsäurelösung. Die Kernmembran wird leicbt gefärbt, und es treten in Folge dessen die Details der Kern- oberfläche deutlich hervor , ebenso wie das Chromatin. Die Rabl- sche Doppelfärbung (Hämatei'n und Safranin) giebt besonders nach Fixirung mit dem Essigsäurebichromat die besten Bilder für das Chromatin. Man färbt die Schnitte zuerst mit dem Alaunhämatein recht intensiv. Nach sorgfältigem Auswaschen in Wasser und bei Ueberfärbung bei theilweiser Entfärbung kommen sie für wenigstens 24 Stunden in Safranin (Alaunsafraniu nach Zwaard